导读:本文包含了甜菜碱醛脱氢酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:脱氢酶,甜菜碱,基因,转基因,花粉管,甘蓝,菌种。
甜菜碱醛脱氢酶论文文献综述
柴靓,李浩杰,张锦芳,崔成,蒋俊[1]（2018）在《油菜甜菜碱醛脱氢酶在拟南芥中过量表达增强耐旱性》一文中研究指出本研究用RT-PCR技术从甘蓝型油菜中克隆出油菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BnBADH-1)全长。测序析结果表明,BnBADH-1的cDNA全长1 506bp,核酸序列与拟南芥BADH基因的相似性为90.24%。利用片段两端的粘性末端酶切位点BamHⅠ和SacⅠ将BnBADH-1片段连接在真核表达载体pBI121上。通过PCR及酶切鉴定确认过量表达载体pBI121-BnBADH-1已成功构建。将载体pBI121-BnBADH-1经由农杆菌介导的花序浸染法导入拟南芥。在T_0中挑选出3个阳性植株,自交2代得到T_2纯合的转BnBADH-1拟南芥(B1、B2和B3)。用不同浓度用甘露醇(mannitol)加入MS固体培养基来模拟不同程度的干旱胁迫。将B1、B2、B3和野生型WT种子分别铺在MS、MS+100mmol/L mannitol、MS+200mmol/Lmannitol培养基上,25℃/16h光照下培养。:MS培养基上种子萌发7d后,观察植株发现:①在普通MS培养基上,转基因B1、B2、B3植株与WT在出芽率、根长、叶绿素等方面无差异;②在MS+100mmol/Lmannitol培养基上,B1、B2、B3植株完全出芽而WT出芽率为85%;3个转基因株系根长均比MS上短,但都比同样处理下WT长;叶绿素含量高于WT;③在MS+200mmol/Lmannitol培养基上,转基因植株和WT的出芽率、根长、叶绿素都进一步下降,但转基因植株均高于WT。也就是说,在不同程度的干旱胁迫下,转BnBADH-1拟南芥种子的出芽率及幼苗根长、叶绿素含量均强于WT。即BnBADH-1基因的过量表达增强了拟南芥对干旱胁迫的耐受性。(本文来源于《中国作物学会油料作物专业委员会第八次会员代表大会暨学术年会综述与摘要集》期刊2018-11-19）
李春枝,潘彩霞,刘宏伟,刘冰,罗晓明[2]（2018）在《转甜菜碱醛脱氢酶基因增强羽衣甘蓝的耐盐性研究》一文中研究指出羽衣甘蓝(Brassica oleracea L.var.accephala DC.)是目前常用观赏植物。该研究中,菠菜BADH(甜菜碱醛脱氢酶)基因用农杆菌介导转入了羽衣甘蓝中,共获得了7株转基因植株,并经PCR、Southern blot和实时荧光定量PCR分析。结果表明:BADH基因已整合到羽衣甘蓝基因组并在转基因植物中表达。在盐胁迫下,转基因植物中的BADH酶活性明显高于野生型植物,而转基因植株的MDA含量及相对电导率明显低于野生型植物。表明BADH活性增加,膜的渗透性保护能力也增强,转基因植物的抗逆性增加。同时,在盐胁迫下转基因羽衣甘蓝植株平均主根长、鲜质量、成活率和叶绿素含量均显着高于野生植株,而干质量/鲜质量明显低于野生植株。转基因羽衣甘蓝耐盐性明显增强,该转基因植物可以为羽衣甘蓝抗性育种提供分子基础。(本文来源于《北方园艺》期刊2018年05期）
郑贞贞,李佳,叶广继,黄含,王芳[3]（2017）在《马铃薯青薯九号甜菜碱醛脱氢酶基因(StBADH)克隆及进化分析》一文中研究指出本研究利用同源克隆,从马铃薯青薯9号中克隆到2个甜菜碱醛脱氢酶基因,分别命名为St BADH-504和St BADH-505。St BADH-504为1 631 bp,CDS为1 515 bp,编码504个氨基酸蛋白,编码蛋白亚细胞定位于线粒体;St BADH-505为1 709 bp,CDS为1 518 bp,编码505个氨基酸蛋白,编码蛋白亚细胞定位于叶绿体或过氧化物酶体,二个蛋白都有醛脱氢酶高度保守的十肽(VSLELGGKSP)结构。进化分析表明,St BADH-504和St BADH-505蛋白与茄科植物中BADH蛋白聚为一类,但二者分属不同分支。盐胁迫表达特征分析表明,马铃薯叶片中St BADH-504表达受盐胁迫的诱导,而St BADH-505为组成型表达,不受盐胁迫诱导。本研究有助于了解马铃薯耐盐机理,为耐盐马铃薯资源创制提供理论参考。(本文来源于《分子植物育种》期刊2017年09期）
喻时周,杨成龙,郭建春,段瑞军[4]（2016）在《海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆、高效表达及酶学特性分析》一文中研究指出在许多渗透调节剂中,甜菜碱是最理想的有机小分子渗透调节物质。甜菜碱在植物体内大量积累不会带来危害,同时能提高植物对环境胁迫的抗性。将海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到表达载体p ET-28a(+)上,获得重组载体p ET-Sp BADH并将其成功地转化到BL21(DE3)中得到重组工程菌,经IPTG诱导能高效表达55 k D目的蛋白,表达量可以达到301μg m L–1。酶学特征分析表明,该蛋白最适p H值为7.2,在偏碱条件下能维持较高的催化活性;Sp BADH蛋白对高温敏感,且温度对催化活性影响较大,超过55℃时酶活性只有20%,最适酶催化活性温度为37℃;而有机小分子醇类对酶的催化活性有保护作用,可以通过自身特征维持酶催化活性的微环境。(本文来源于《作物学报》期刊2016年10期）
尚丽霞,蔡勤安,于志晶,杨向东,孟凡钢[5]（2016）在《甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因转化大豆的研究》一文中研究指出本研究利用农杆菌介导法将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入大豆,以提高大豆的耐盐性。对132棵转化植株进行了PCR检测,获得64棵阳性植株,阳性率达到48%。对PCR阳性植株进一步进行Southern杂交分析,证明BADH基因已经整合到大豆基因组中。(本文来源于《东北农业科学》期刊2016年02期）
刘增美,朱天艺,龚一富,王何瑜,章丽[6]（2015）在《北美海蓬子甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及表达载体构建》一文中研究指出以北美海蓬子种子为材料,采用RACE技术获得北美海蓬子BADH基因的c DNA全长序列.结果表明:BADH基因c DNA全长为1 836 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 503 bp,编码500个氨基酸,预测蛋白的分子量为54.5 k Da,理论等电点为5.31.推测出BADH氨基酸中含有甜菜碱醛脱氢酶家族高度保守的十肽序列(VTLELGGKSP)及与酶功能相关的半胱氨酸残基(Cys).序列比对和系统进化树显示,北美海蓬子与盐节木和盐穗木的亲缘关系最近,同源性达94%.并构建了植物表达载体p CAMBIA3301-BADH,将其成功导入到农杆菌EHA105中,为进一步研究该基因的功能奠定了基础.(本文来源于《宁波大学学报(理工版)》期刊2015年04期）
吴红珍[7]（2015）在《色盐杆菌DSM 22428~T新种鉴定及其甜菜碱醛脱氢酶研究》一文中研究指出菌株DSM 22428T是本实验室从东营滨海盐地碱蓬分离的一株内生中度嗜盐菌,其可生长的NaCl浓度范围为0.6-20%(w/v),比嗜盐古菌有更广的耐盐范围,对外界盐浓度的剧烈变化有更好的适应性。本实验室的前期研究证实,菌株DSM 22428T在高盐条件下可通过在细胞内积累渗透保护剂甘氨酸甜菜碱来抵抗外界的渗透胁迫,维持细胞内外渗透平衡。甘氨酸甜菜碱是细菌,植物,动物最有效的无毒渗透保护剂,目前已经对植物中的betB进行了深入研究,且为植物抗逆工程的重点。BADH基因序列在不同的物种中有较大差异,因此赋予菌株抗渗透胁迫能力也不相同。细菌以胆碱为底物经胆碱脱氢酶CDH和甜菜碱醛脱氢酶BADH催化合成甘氨酸甜菜碱,而甜菜碱醛脱氢酶BADH是甘氨酸甜菜碱合成的关键酶。此外,甜菜碱醛脱氢酶还在病原菌入侵宿主时发挥重要的作用。因此对DSM 22428T甜菜碱醛脱氢酶的酶学性质进行研究有助于深入了解甜菜碱醛脱氢酶的特点,对于进一步明确该菌的抗盐机理有重要意义。同时经前期研究发现菌株DSM 22428T应属于色盐杆菌属的一个新种,相关鉴定工作已经开展。但是随着分子鉴定在细菌新种鉴定中的作用越来越大,DNA杂交、脂肪酸、极脂分析等已经成为必要的项目,因此对DSM 22428T进行更多的分子鉴定对于确定其在盐单胞菌科中的分类地位是十分必要的。本文首先将色盐杆菌DSM 22428T甜菜碱醛脱氢酶基因betB在大肠杆菌中进行了异源表达及功能验证,然后进行了酶的纯化及酶学性质研究,最后对色盐杆菌DSM22428T进行了新种的鉴定。具体实验结果如下：1.根据GenBank中色盐杆菌DSM 22428T甜菜碱醛脱氢酶基因betB序列,设计一对上下游引物,以色盐杆菌DSM 22428T总DNA为模板扩增获得betB基因的全序列,双酶切后连接到表达载体pET-15b上,转化大肠杆菌BL21(DE3),在重组大肠杆菌中成功进行了甜菜碱醛脱氢酶的异源表达。在不同NaCl浓度梯度基本培养基中添加终浓度为1mM的胆碱,接种色盐杆菌DSM22428T,结果发现和对照相比,在盐胁迫条件下,外界提供一定浓度的胆碱,可以明显提高野生菌株的耐盐能力,说明野生菌株甜菜碱醛脱氢酶具有明显的渗透调节功能。为了进一步验证异源表达的甜菜碱醛脱氢酶是否具有渗透调节功能,在不同NaCl浓度梯度的LB培养基中添加终浓度为1mM的胆碱,接种重组大肠杆菌,用IPTG诱导表达,结果发现带有betB基因的重组大肠杆菌生长速度远高于带空质粒的对照组,尤其在高盐条件下效果更加明显,色盐杆菌DSM 22428T甜菜碱醛脱氢酶基因betB的导入显着提高了重组大肠杆菌的耐盐性,说明异源表达的色盐杆菌DSM 22428T甜菜碱醛脱氢酶同样具有渗透调节功能。2.用0.3mM的IPTG低温诱导重组大肠杆菌过量表达甜菜碱醛脱氢酶蛋白,高压匀浆机破碎菌体细胞,并通过镍柱亲和层析、离子交换层析、分子筛柱层析进行蛋白纯化。最终得到了较纯的目的蛋白,蛋白浓度约为1.5mg/ml,单体分子量在61KDa左右,与生物信息学分析的DSM22428T甜菜碱醛脱氢酶分子量相同。3.将提纯的甜菜碱醛脱氢酶进行酶学性质研究,经测定酶的最适pH为7.5,酶的比活为3.6×10-2 U/mg。同时研究发现该酶具有耐盐性,盐浓度为2M时,该酶仍保留40%左右的酶活,说明该酶具有较强的抗高盐浓度的能力。4.按照Halomonadaceae科菌种鉴定的最小标准对菌株DSM 22428T进行分类学研究。菌株DSM 22428T盐浓度生长范围为0.6-20%(w/v)(最适盐浓度为5-6%,w/v),生长温度为5-45℃(最适温度为35℃),生长pH范围为5-9(最适pH为7-8),可积累聚-β-羟丁酸和产胞外多糖。主要含有的脂肪酸为summed feature 3 (C16L1ω/C15:0iso2-OH,23.1%), C18:1ω7c(22.6%)和C16：0(22.3%)。主要的呼吸醌为泛醌Q-9(86%)。主要的极性脂为：磷脂酰乙醇胺PE；磷脂酰甘油PG；一种未知糖脂GNL；一种未知糖磷脂PGNL;双磷脂酰甘油DPG；一种未知脂类L；一种未知氨基脂AL。16S rRNA基因序列及级联的16S rRNA, gyrB, rpoD基因序列系统发育分析显示菌株DSM 22428T属于色盐杆菌属的新种。其最相近菌株为Chromohalobacter israelensis DSM67681 (95.4% 16S rRNA序列相似性)。菌株DSM 22428T与C. israelensis DSM 6768T, C. salexigens DSM 3043T, C. beijerinckii DSM 7218T, C. canadensis DSM 6769T, C. nigrandesensis DSM 14323T, C. sarecensis DSM 15547T DNA-DNA杂交值范围为15%±2%-430%±1%。根据形态和生理特征及系统发育分析证明菌株DSM 22428T代表了色盐杆菌属的新种。(本文来源于《山东师范大学》期刊2015-05-20）
陈世龙[8]（2015）在《矮沙冬青甜菜碱醛脱氢酶基因（AnBADH）转化烟草及其对耐旱和耐盐性的改良》一文中研究指出干旱和土壤盐渍化等非生物逆境,严重制约了作物生长发育和地理分布,是造成农作物产量下降甚至绝收的原因之一。提高作物抵抗逆境胁迫的能力,具有重要的理论和现实意义。植物为了适应或抵抗不利环境,在进化过程中逐步形成了一定的抗逆机制来减轻胁迫伤害。矮沙冬青(Ammopiptanthus nanus)与蒙古沙冬青(Ammopiptanthus mongollcus)同属豆科沙冬青属,是第叁纪古地中海消失后,在气候旱化过程中逐渐适应,并在塔里木盆地西部幸存下来的残遗物种。对其干旱瘠薄的恶劣环境有极强的适应性,是我国西部荒漠地区唯一常绿阔叶灌木。克隆矮沙冬青抗逆相关基因,异源转化表达验证其功能,可为抗逆转基因育种提供基因资源。本实验用前期克隆的矮沙冬青甜菜碱醛脱氢酶基因AnBADH,构建双子叶植物表达载体,通过农杆菌介导法转化野生型烟草品系“W38”,对转基因烟草株系进行抗逆相关测定,得到如下结果：1.通过农杆菌介导法转化烟草,经潮霉素初步筛选后获得58个抗性植株,PCR检测鉴定,其中20个植株为阳性,扩增条带大小和质粒一致,说明AnBADH基因插入到烟草基因组中。2.选取H13、H16和H22叁个阳性转基因烟草T1株系的种子,在含有20 mg·L-1潮霉素的MS培养基上做发芽试验,分别并移栽至含有200 mmol·L-1 NaCl和200 mmol·L-1甘露醇的MS固体培养基上,模拟高盐、干旱胁迫,观察测定其形态变化。结果表明,转AnBADH基因烟草株系的幼苗在干旱和高盐胁迫胁迫条件下均能够正常生长,与野生型对照相比,植株健壮,侧根发达,根系更长,具有一定抵抗干旱和高盐胁迫的能力。3.经抗生素筛选和PCR检测的H13、H16和H22的T1代阳性株系,用10%的聚乙二醇6000和300 mmol·L-1的NaCl模拟干旱和高盐胁迫,测定叶片的相对电导率,以及叶片中甜菜碱、游离脯氨酸、丙二醛和可溶性糖的含量。结果表明,干旱胁迫下转基因和野生型植株甜菜碱含量差异不明显,转基因株系可溶性糖含量明显增加,转基因H13和H16两个株系的游离脯氨酸含量增加,H22株系的丙二醛含量在胁迫之后明显降低,转基因株系相对电导率在干旱胁迫第2d和第3d显着低于野生型对照。高盐胁迫下,转基因和野生型植株甜菜碱含量变化差异不明显,转基因株系可溶性糖含量明显增加,游离脯氨酸含量均有所上升,而丙二醛含量明显减少。转基因株系相对电导率在高盐胁迫第2d显着低于野生型对照。4.在自然干旱条件下,转基因烟草株系耐受能力强于野生型,在干旱处理28d后,上部叶片仍然保持绿色,而野生型对照呈现严重脱水症状。复水后转基因株系能够迅速恢复正常生长,叶片挺立,但野生型植株叶片仍呈萎焉状态。从上述几方面的试验结果看,转化AnBADH基因的烟草株系在干旱和高盐胁迫下,细胞能迅速积累渗透调节物质,细胞膜过氧化程度减轻,透性降低,植物耐受性增强,说明克隆的矮沙冬青甜菜碱醛脱氢酶基因AnBADH具有较好的抗逆功能,进一步验证后可用于作物转基因改良。(本文来源于《四川农业大学》期刊2015-05-01）
蒋玉蓉,袁俊杰,陈国林,祝水金[9]（2015）在《转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因棉花的获得及其耐盐性鉴定》一文中研究指出甜菜碱醛脱氢酶(betaine aldehyde dehydrogenase,BADH)是合成甜菜碱的关键酶,广泛用于植物的耐盐转基因研究。为获得耐盐性提高的棉花植株,本研究通过花粉管通道法将山菠菜甜菜碱醛(BADH)基因转化到陆地棉品种——中棉所35。经卡那霉素田间抗性鉴定、标记基因NPT-Ⅱ和目标基因BADH的PCR检测,以及Southern杂交检测,结果表明BADH已整合到棉花的基因组中,并获得转标记基因NPT-Ⅱ和目标基因BADH棉株5株。通过对T2种子在0.6%Na Cl盐池发芽实验结果表明,转化植株的出苗率高达63.4%,对照材料出苗率2.4%,转化植株耐盐性较对照有明显提高。本研究获得转基因植株可作为抗逆育种的种质材料。(本文来源于《分子植物育种》期刊2015年01期）
杨成龙,刘姣,周扬,李瑞梅,段瑞军[10]（2014）在《海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达》一文中研究指出本研究利用从海马齿中克隆到的甜菜碱醛脱氢酶基因构建到高效表达载体p GEX-4T-1上,构建重组载体p GEX-4T-Sp BADH,并对GST-Sp BADH融合表达的IPTG诱导浓度、诱导不同温度、不同菌液浓度和诱导时间等条件进行优化。研究结果表明:随诱导时间增长GST-Sp BADH融合蛋白表达量提高,在37℃时,OD为0.6左右,诱导5 h GST-Sp BADH融合蛋白的表达量达到最大,在0.2 mmol/L IPTG浓度下,可以有效诱导GST-Sp BADH融合蛋白的表达。本研究结果以期解析Sp BADH基因的功能以及在海马齿抗盐过程中的作用机理。(本文来源于《分子植物育种》期刊2014年06期）
甜菜碱醛脱氢酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
羽衣甘蓝(Brassica oleracea L.var.accephala DC.)是目前常用观赏植物。该研究中,菠菜BADH(甜菜碱醛脱氢酶)基因用农杆菌介导转入了羽衣甘蓝中,共获得了7株转基因植株,并经PCR、Southern blot和实时荧光定量PCR分析。结果表明:BADH基因已整合到羽衣甘蓝基因组并在转基因植物中表达。在盐胁迫下,转基因植物中的BADH酶活性明显高于野生型植物,而转基因植株的MDA含量及相对电导率明显低于野生型植物。表明BADH活性增加,膜的渗透性保护能力也增强,转基因植物的抗逆性增加。同时,在盐胁迫下转基因羽衣甘蓝植株平均主根长、鲜质量、成活率和叶绿素含量均显着高于野生植株,而干质量/鲜质量明显低于野生植株。转基因羽衣甘蓝耐盐性明显增强,该转基因植物可以为羽衣甘蓝抗性育种提供分子基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甜菜碱醛脱氢酶论文参考文献
[1].柴靓,李浩杰,张锦芳,崔成,蒋俊.油菜甜菜碱醛脱氢酶在拟南芥中过量表达增强耐旱性[C].中国作物学会油料作物专业委员会第八次会员代表大会暨学术年会综述与摘要集.2018
[2].李春枝,潘彩霞,刘宏伟,刘冰,罗晓明.转甜菜碱醛脱氢酶基因增强羽衣甘蓝的耐盐性研究[J].北方园艺.2018
[3].郑贞贞,李佳,叶广继,黄含,王芳.马铃薯青薯九号甜菜碱醛脱氢酶基因(StBADH)克隆及进化分析[J].分子植物育种.2017
[4].喻时周,杨成龙,郭建春,段瑞军.海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因克隆、高效表达及酶学特性分析[J].作物学报.2016
[5].尚丽霞,蔡勤安,于志晶,杨向东,孟凡钢.甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因转化大豆的研究[J].东北农业科学.2016
[6].刘增美,朱天艺,龚一富,王何瑜,章丽.北美海蓬子甜菜碱醛脱氢酶基因的克隆及表达载体构建[J].宁波大学学报(理工版).2015
[7].吴红珍.色盐杆菌DSM22428~T新种鉴定及其甜菜碱醛脱氢酶研究[D].山东师范大学.2015
[8].陈世龙.矮沙冬青甜菜碱醛脱氢酶基因（AnBADH）转化烟草及其对耐旱和耐盐性的改良[D].四川农业大学.2015
[9].蒋玉蓉,袁俊杰,陈国林,祝水金.转甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因棉花的获得及其耐盐性鉴定[J].分子植物育种.2015
[10].杨成龙,刘姣,周扬,李瑞梅,段瑞军.海马齿甜菜碱醛脱氢酶基因在大肠杆菌中表达[J].分子植物育种.2014
论文知识图
