靶向大鼠Vegf/Vegfr基因siRNA的基因沉默效应研究

靶向大鼠Vegf/Vegfr基因siRNA的基因沉默效应研究

论文摘要

目的筛选靶向血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体(Vegf/Vegfr)基因的si RNA序列,有效沉默大鼠Vegf/Vegfr基因的表达。方法根据大鼠Vegf、Vegfr1 (Flt1)、Vegfr2 (Flk1)基因,设计合成了各三个siRNA序列,转染大鼠内皮细胞后,通过RT-PCR、Western blot检测对靶基因的沉默效果。结果所设计的siRNA有2个序列可有效沉默Vegf的表达,分别有一个序列可有效沉默Flt1和Flk1的表达。结论所筛选出的靶向Vegf/Vegfr基因的siRNA有效序列,可用于VEGF/VEGFR相关的血管生成研究中。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 主要仪器与设备
  •   1.4 方法
  •     1.4.1 靶向Vegf/Vegfr基因si RNA序列的设计与合成
  •     1.4.2 大鼠内皮细胞培养
  •     1.4.3 siRNA转染条件的筛选
  •     1.4.4 靶向大鼠Vegf/Vegfr siRNA的转染
  •     1.4.5 靶基因沉默效应检测
  •       1.4.5. 1 Western blot检测VEGF/VEGFR的表达
  •       1.4.5. 2 RT-PCR检测Vegf/Vegfr的m RNA水平
  •   1.5 统计分析
  • 2 结果
  •   2.1 靶向vegf/vegfr基因siRNA对大鼠内皮细胞转染条件的筛选
  •   2.2 蛋白水平筛选siRNA有效沉默序列
  •   2.3 mRNA水平筛选siRNA有效沉默序列
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈林中日,殷冬来,赵泽婷,韦芊含,陈昕,张雨梅

    关键词: 血管内皮生长因子,血管内皮生长因子受体,小干扰,大鼠

    来源: 实验动物与比较医学 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学

    单位: 扬州大学比较医学研究院,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

    基金: 江苏高校优势学科建设工程资助项目

    分类号: Q78

    页码: 26-33

    总页数: 8

    文件大小: 2348K

    下载量: 61

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