凡纳滨对虾多酚氧化酶的纯化及性质分析

论文摘要

通过硫酸铵盐析、DEAE-Cellulose离子交换、Phenyl-Sepharose疏水层析、Hi-Trap Capto-Q强阴离子交换层析等方法,从凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）虾头中分离纯化出一种多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE）显示其分子质量约为210 ku。肽质量指纹图谱的比对结果表明,纯化得到的PPO中含有187个氨基酸残基的14个片段与NCBI数据库中酚氧化酶原（gi|147724160）序列相似性为100%。该酶的最适温度和最适pH值分别为40℃和6.0,且在温度0～50℃及pH=5.0～8.0可保持相对稳定的活性。圆二色谱分析结果表明,对虾PPO的二级结构主要为反平行结构及无规则卷曲。抗坏血酸、茶多酚和特丁基对苯二酚（tertiary butylhydroquinone,TBHQ）等具有生物活性羟基的抑制剂对其均有较好的抑制效果。

论文目录

• 0 引言
• 1 材料与方法
•   1.1 材料、试剂与仪器
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 凡纳滨对虾PPO的分离纯化
•     1.2.2 PPO的活力测定
•     1.2.3 SDS-PAGE
•     1.2.4 PPO的多巴活性染色
•     1.2.5 PPO的肽指纹质量图谱分析
•     1.2.6 PPO的最适温度和热稳定性
•     1.2.7 PPO的最适pH值及pH值稳定性
•     1.2.8 PPO的圆二色谱测定
•     1.2.9 抑制剂对PPO活性的影响
• 2 结果与讨论
•   2.1 PPO的分离纯化
•   2.2 凡纳滨对虾PPO的性质分析
•     2.2.1 PPO的最适温度和热稳定性
•     2.2.2 PPO的最适pH值和pH值稳定性
•     2.2.3 PPO的圆二色谱分析
•     2.2.4 抗坏血酸对PPO的抑制作用
•     2.2.5 茶多酚对PPO的抑制作用
•     2.2.6 TBHQ对PPO的抑制作用
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 鲍俊旺,李越,翁凌,张凌晶,孙乐常,曹敏杰

关键词: 凡纳滨对虾,多酚氧化酶,纯化,黑变

来源: 集美大学学报(自然科学版) 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 集美大学食品与生物工程学院,水产品深加工技术国家地方联合工程研究中心

基金: 福建省科技计划项目(2017N5011),厦门南方海洋研究中心项目(14CZP030HJ04)

分类号: TS201.25

DOI: 10.19715/j.jmuzr.2019.02.03

页码: 100-109

总页数: 10

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