噬菌体展示随机肽库论文_何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏

导读:本文包含了噬菌体展示随机肽库论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:噬菌体,白蛋白,抗原,血清,特异性,长效,技术。

噬菌体展示随机肽库论文文献综述

何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏[1](2019)在《利用噬菌体展示随机肽库筛选与犬PD-1和PD-L1结合的多肽》一文中研究指出研究目的:癌症是致犬死亡的常见病之一。目前治疗犬肿瘤的方法有手术、化疗和放疗。除此之外现已开发出了一些针对免疫检查点的靶向抗体药物,并在体外和体内进行了测试,如程序性细胞死亡受体1(Programmed cell death protein 1,PD-1),它是一种重要免疫抑制分子。PD-L1(programmed death ligand 1,CD274)是PD-1的天然配体。PD-1/PD-L1结合激活通路后,在癌症、病毒感染、器官移植方面会抑制免疫系统发挥功能。阻断PD-1和PD-L1(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集》期刊2019-07-27)

叶长烂,周霞,谢浩然,马金魁,张宏斌[2](2019)在《噬菌体展示随机环八肽库的构建》一文中研究指出目的构建表达于噬菌体表面的随机环八肽库。方法通过自行设计,人工合成编码随机环八肽的寡核苷酸片段,通过延伸引物扩增获得编码随机环八肽的基因片段。将编码基因片段和M13KE噬菌体载体经过EagⅠ和KpnⅠ限制性内切酶双酶切后进行连接,重组产物电转入大肠杆菌ER2738感受态细胞获得噬菌体展示随机环八肽库,噬斑及测序检测库容和多样性。结果构建的环八肽库库容超过7.5×109,重组阳性率为92.5%,不同率为97.3%。结论成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机环八肽库。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2019年14期)

史云龙,刘永明[3](2016)在《噬菌体展示随机肽库技术的医学研究应用》一文中研究指出噬菌体展示随机肽库是将编码外源性多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白基因,产生由数十亿种随机肽段与噬菌体外壳蛋白以融合形式呈现在噬菌体表面的重组噬菌体库。近年来,噬菌体展示随机肽库已成为筛选蛋白和多肽的重要生物技术,并被广泛应用于医学研究。笔者就其在肿瘤和自身免疫性疾病研究以及疫苗研制中的应用现状进行综述。(本文来源于《华夏医学》期刊2016年03期)

王筱蒙,邱郑,张芳,王旻[4](2014)在《噬菌体展示随机十五肽库的构建》一文中研究指出为了满足药物筛选的需要,本实验以pCANTAB 5E噬菌粒为载体,构建表达于丝状噬菌体尾丝蛋白P3N末端的随机十五肽库。通过自行设计引物与模板,人工合成编码随机十五肽的寡核苷酸片段及含有酶切位点的引物。通过PCR技术进行模板扩增获得编码随机十五肽的基因。将扩增后的目的基因经过SfiΙ,NotΙ两个限制性内切酶双酶切后,与经同样双酶切的5'去磷酸化的噬菌粒载体连接,将重组产物电转入大肠埃希菌TG1感受态细胞。集合菌落后进行库容和多样性检验。所建肽库库容可达5×108。随机挑取20个克隆测序,其核苷酸序列及推断出的氨基酸序列均随机。成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机十五肽库。(本文来源于《中国药科大学学报》期刊2014年02期)

汤兆明,容宇,胡丽华[5](2013)在《用噬菌体展示随机7肽库筛选血型A抗原模拟肽》一文中研究指出目的:通过血型A单克隆抗体从噬菌体展示随机7肽库中筛选血型A抗原的模拟多肽。方法:通过对噬菌体随机7肽库进行3轮亲和筛选,从第叁轮筛选后获得的洗脱物中挑选多个噬菌体克隆,采用ELISA方法鉴定阳性克隆,测序并推导噬菌体展示短肽的氨基酸序列,化学合成短肽、红细胞凝集抑制试验鉴定短肽模拟A抗原的能力。结果:叁轮筛选后特异性噬菌体被富集了200多倍,对ELISA鉴定信号较强的16个噬菌体克隆DNA测序并推导氨基酸序列的结果显示两个克隆展示相同的序列FSYLPSH。化学合成肽能抑制A型红细胞与抗A的凝集作用。结论:肽FSYLPSH具有模拟血型A抗原表位的作用,具有代替天然血型A抗原在临床中应用的潜能。(本文来源于《临床血液学杂志(输血与检验版)》期刊2013年01期)

杨芳,张文红[6](2011)在《噬菌体展示随机肽克隆的一种快速、高通量测序技术》一文中研究指出目的:探索应用焦磷酸微测序(Pyrosequencing)技术建立一种针对噬菌体展示随机肽的高通量序列测定方案。方法:环7肽噬菌体展示随机肽库的淘筛后随机挑选10个蓝色噬菌斑作为模板,PCR扩增随机7肽区序列,应用Pyrosequencing技术进行实时测序和分析。结果:应用Pyrosequencing技术对10例样品的随机7肽区进行序列分析,得到一个GXXXHPQ的同源基序(X为任意氨基酸),此基序为链亲合素的结合肽基序,结果与预期相符合。结论:Pyrosequencing技术具有操作简易快速、高通量的优点,必定可以广泛应用于各种随机肽库的筛选测序。(本文来源于《东南大学学报(医学版)》期刊2011年03期)

张佳娣,边蕾,石屹峰[7](2010)在《从噬菌体展示随机肽库中定量筛选人血清白蛋白黏附肽》一文中研究指出人血清白蛋白作为长效化载体蛋白可用于改善蛋白质药物的半衰期。除了以人血清白蛋白融合方式提高蛋白质药物的半衰期,黏附人血清白蛋白也已成为改善蛋白质药物药代动力学特性的策略。本研究以人血清白蛋白为靶分子,利用噬菌体表面展示技术对随机七肽库进行生物淘选,挑取噬菌体单克隆进行特异性鉴定。经4轮生物淘选后回收率和选择比都有了一定提高,使用滴度检测方法对所挑选的噬菌体阳性克隆进行了相对亲和力的测定,并经过DNA测序得到了4个特异性黏附肽HSA-1、HSA-5、HSA-6和HSA-10的序列。将此类多肽插入到蛋白质药物上,将有助于提高蛋白质药物在血清中的半衰期,从而达到长效目的。(本文来源于《大连工业大学学报》期刊2010年04期)

张林,江涛,计融[8](2010)在《应用随机肽库筛选展示河豚毒素模拟表位噬菌体》一文中研究指出目的利用噬菌体随机肽库筛选展示河豚毒素(TTX)模拟抗原表位的噬菌体,并以其替代毒素建立免疫学检测方法。方法以抗TTX单克隆抗体为靶分子,从以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ表面的随机七肽库中进行生物亲和淘选,用ELISA法鉴定阳性克隆。结果通过4轮淘选,获得了7株能与抗TTX单克隆抗体特异性结合的噬菌体,采用间接竞争ELISA,筛选到3株能抑制TTX的阳性克隆。其中以4号噬菌体建立的免疫检测方法,线性范围为1~20ng/ml(TTX毒素浓度),R2=0.9947,检测下限为1ng/ml。结论从噬菌体七肽库筛选到了展示TTX模拟抗原表位的噬菌体,淘选出来的噬菌体粒子可作为毒素的替代品用于免疫学检测。(本文来源于《卫生研究》期刊2010年03期)

张佳娣[9](2010)在《从噬菌体展示随机肽库中定量筛选人血清白蛋白黏附肽的研究》一文中研究指出人血清白蛋白(Human Serum Albumin, HSA)约占人体血浆总蛋白的50%-60%,半衰期可达到19天,在体内起着维持血液渗透压、运输营养和保护其他重要生物物质的作用,它是血液中重要的物质输送和药物运输载体,也是是药物设计理想的载体蛋白。以人血清白蛋白为载体的纳米药物正在逐步兴起,它可以提高药物的稳定性、缓释药物从而延长其作用的时间,而且可达到靶向输送的目的。除了与人血清白蛋白融合,黏附人血清白蛋白也已成为改善蛋白质药物药代动力学特性的策略。人血清白蛋白黏附方法延长蛋白质药物半衰期的关键是要有特异性和亲和力高的人血清白蛋白黏附肽。本文利用噬菌体表面展示技术(Phage Display Technology,PDT),以人血清白蛋白为靶分子,利用甘氨酸-盐酸(pH2.2)为洗脱液对噬菌体随机七肽库进行生物淘选,并以回收率和选择比双重标准定量优化淘选过程。回收率是洗脱得到的噬菌体量与投入的噬菌体量的比值;选择比(P/B)是人血清白蛋白包被板与对照空白板上洗脱噬菌体量的比值。通过包被、结合、洗脱、扩增的步骤连续淘洗4轮后,回收率从第一轮的1.97×10-6上升到第四轮的1.49×10-4,选择比也从第二轮的3.6上升到了第四轮的7.1,说明得到与靶分子特异性结合的外源蛋白或多肽。利用回收率和选择比双重标准定量优化淘选过程,更加确保了实验的可行性和准确性。另外利用选择比还可以对人血清白蛋白特异性黏附肽进行初步筛选。挑取噬菌体单克隆进行特异性鉴定,成功的挑选出一些可以与HSA特异性结合的噬菌体阳性克隆。本文使用滴度测定的方法成功地对所挑选的噬菌体阳性克隆进行了相对亲和力的测定,此方法简单易操作,最终得到了四个特异性黏附肽的序列。筛选出的4个特异性人血清白蛋白黏附肽没有同源序列,说明其黏附的可能是人血清白蛋白的不同部位。本文以噬菌体滴度测定的方法测得的亲和力为0.73μM、0.42μM、0.81μM和0.15μM。噬菌体展示表面技术是将外源DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白结构基因中,与外壳蛋白融合表达,通过表型筛选获得其编码基因。噬菌体展示技术作为研究蛋白质与蛋白质相互作用的重要工具,在功能基因组的研究中发挥着巨大的作用。(本文来源于《大连工业大学》期刊2010-03-01)

李娜[10](2009)在《噬菌体展示随机肽库技术及其在动物医学中的应用》一文中研究指出1概述1985年,Smith利用基因工程手段首次将EcoR I内切酶的部分基因片段与丝状噬菌体pⅢ基因融合,使外源基因编码的多肽呈现在噬菌体的表面,从而建立了噬菌体展示技术[1]。1988年Scott等成功将含有随机序列的丝状噬菌体融合蛋白pⅢ呈现在噬菌(本文来源于《甘肃畜牧兽医》期刊2009年02期)

噬菌体展示随机肽库论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的构建表达于噬菌体表面的随机环八肽库。方法通过自行设计,人工合成编码随机环八肽的寡核苷酸片段,通过延伸引物扩增获得编码随机环八肽的基因片段。将编码基因片段和M13KE噬菌体载体经过EagⅠ和KpnⅠ限制性内切酶双酶切后进行连接,重组产物电转入大肠杆菌ER2738感受态细胞获得噬菌体展示随机环八肽库,噬斑及测序检测库容和多样性。结果构建的环八肽库库容超过7.5×109,重组阳性率为92.5%,不同率为97.3%。结论成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机环八肽库。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

噬菌体展示随机肽库论文参考文献

[1].何海汛,陈威,李丹,孙国鹏,李鹏.利用噬菌体展示随机肽库筛选与犬PD-1和PD-L1结合的多肽[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十五次学术交流会、中国病理生理学会动物病理学专业委员会第二十四次学术研讨会、中国实验动物学会实验病理学专业委员会第四次学术研讨会、中国兽医病理学家第四次研讨会论文集.2019

[2].叶长烂,周霞,谢浩然,马金魁,张宏斌.噬菌体展示随机环八肽库的构建[J].国际检验医学杂志.2019

[3].史云龙,刘永明.噬菌体展示随机肽库技术的医学研究应用[J].华夏医学.2016

[4].王筱蒙,邱郑,张芳,王旻.噬菌体展示随机十五肽库的构建[J].中国药科大学学报.2014

[5].汤兆明,容宇,胡丽华.用噬菌体展示随机7肽库筛选血型A抗原模拟肽[J].临床血液学杂志(输血与检验版).2013

[6].杨芳,张文红.噬菌体展示随机肽克隆的一种快速、高通量测序技术[J].东南大学学报(医学版).2011

[7].张佳娣,边蕾,石屹峰.从噬菌体展示随机肽库中定量筛选人血清白蛋白黏附肽[J].大连工业大学学报.2010

[8].张林,江涛,计融.应用随机肽库筛选展示河豚毒素模拟表位噬菌体[J].卫生研究.2010

[9].张佳娣.从噬菌体展示随机肽库中定量筛选人血清白蛋白黏附肽的研究[D].大连工业大学.2010

[10].李娜.噬菌体展示随机肽库技术及其在动物医学中的应用[J].甘肃畜牧兽医.2009

论文知识图

整个被选噬菌体集合测序结果双倒数法对人血清白蛋白黏附肽相对亲...竞争ELISA结果抗体纯化电泳图群小川型霍乱弧菌及其它细菌的LPS的S...夹心ELISA结果

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