导读:本文包含了酶的纯化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,层析,东乡,活性,胶原酶,夜蛾,抑制。
酶的纯化论文文献综述
肖伟,徐梅珍,谷丰,蒋伦伟,王义华[1]（2019）在《东乡野生稻过氧化物酶分离纯化及其酶学特性研究》一文中研究指出过氧化物酶与植物体内活性氧的清除和逆境适应性反应密切相关,为了深入研究过氧化物酶在植物抗逆反应中的重要作用,以东乡野生稻叶片组织为材料,采用浸提、盐析、透析和柱色谱法分离纯化POD蛋白,采用聚丙烯凝胶活性电泳检测蛋白,利用愈创木酚法研究POD的活性和酶学特性。结果表明,经磷酸缓冲液浸提、40%～80%硫酸铵盐析、再经Sephadex G-100凝胶柱层析等步骤,从东乡野生稻叶片组织分离制备得到POD1同工酶组分,酶蛋白的纯化倍数为16.49,比活力为568.80 U/mg。聚丙烯凝胶活性电泳检测仅呈单一POD1同工酶带,属于单一组分。POD酶Km为1.26 mmol/(L·min),最大反应速度Vmax为17.51 mmol/(L·min),最适宜的pH 5.0,最适宜温度35℃～45℃,Cu~(2+)和Zn~(2+)对POD有较强的激活作用,而Fe~(3+)对POD活性有一定的抑制作用,POD酶活性受20%的甲醇、乙醇和丙酮等有机试剂抑制。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年36期）
薛晶晶,乔婧,高建德,刘雄[2]（2019）在《酶辅助提取纯化芹菜总黄酮的工艺研究》一文中研究指出目的:筛选纤维素酶辅助提取芹菜总黄酮的最优提取工艺。方法:采用单因素试验方法分别考察乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数以及酶用量、pH值、酶解时间、酶解温度对芹菜总黄酮提取率的影响,同时对以上因素分别进行L_9(3~4)正交试验,得到酶辅助提取芹菜总黄酮的最佳提取工艺。结果:最佳工艺条件是纤维素酶用量7.0%、pH值4.4、酶解温度45℃、酶解时间1 h、乙醇浓度60%、料液比1∶20、提取时间2 h、提取次数1次。在此工艺下,芹菜总黄酮的提取率为4.17%。结论:加入纤维素酶可以有效提高芹菜总黄酮的提取率。(本文来源于《中兽医医药杂志》期刊2019年06期）
燕晓婷,陈华国,周欣,高赛[3]（2019）在《黑骨藤总黄酮的提取纯化及体外抗黄嘌呤氧化酶的活性筛选》一文中研究指出目的对黑骨藤总黄酮进行提取纯化,并测试总黄酮、2个黄酮类化合物槲皮素-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(QP)和槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(QG)的体外抑制黄嘌呤氧化酶(XOD)活性,为其药效物质研究提供依据。方法使用大孔树脂联合聚酰胺法纯化黑骨藤总黄酮,根据Lambert-Beer定律测定总黄酮含量,采用紫外分光光度法测定不同浓度总黄酮及2个黄酮类化合物的体外XOD抑制活性。结果分离纯化得到了含量>95%的总黄酮。总黄酮及2个黄酮类化合物均显示有体外XOD抑制活性,且随浓度增加,抑制活性逐步增强。总黄酮的IC50为608.9μg/ml,而2个黄酮类化合物QG和QP的IC50分别为261.2和221.2μg/ml。结论黑骨藤总黄酮及2个黄酮类化合物QG和QP均显示出一定的体外XOD抑制活性。(本文来源于《国际药学研究杂志》期刊2019年07期）
王会征,兰玉彬[4]（2019）在《辣椒疫霉菌葡聚糖酶抑制蛋白的原核表达、纯化及结晶》一文中研究指出葡聚糖酶抑制蛋白(GIP)是辣椒疫霉菌在病理环境下诱导产生的一类蛋白,是病原菌抗性蛋白的一种。本研究根据辣椒疫霉菌全基因组序列,通过生物信息学分析、序列比对获得葡聚糖酶抑制蛋白全长基因序列。以辣椒疫霉高致病菌株SD33全基因组为模板扩增GIP基因cDNA,并对其进行相关生物信息学分析。基因经测序验证后与载体pET28a(+)连接,构建好的重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli Rosetta),用IPTG诱导表达重组蛋白6×His-GIP。重组蛋白在5 mol/L尿素变性环境下进行亲和层析纯化,对纯蛋白进行透析、复性、浓缩后进行分子排阻层析纯化,并对获得的纯蛋白进行蛋白结晶试验,为进一步阐明GIP作用机理奠定基础。(本文来源于《山东农业科学》期刊2019年10期）
刘川海,朱平平[5]（2019）在《柠檬苦素降解酶的分离纯化与酶学性质》一文中研究指出为从根本掌握柠檬苦素(下述均以IDE予以表述)的特性,深化其酶活力,本文将以柠檬苦素IDE的分离纯化与酶学性质研究作为切入点,在此基础上予以深入的探究,相关内容如下所述。(本文来源于《生物化工》期刊2019年05期）
杨付来,王月华,赵真真,张兰,张燕宁[6]（2019）在《甜菜夜蛾SeGrx1基因的克隆原核表达纯化及酶动力学研究》一文中研究指出克隆甜菜夜蛾(Spodoptera exigua,H(u|¨)bner)的谷氧还蛋白(glutaredoxin,Grx)基因,构建甜菜夜蛾的谷氧还蛋白原核蛋白表达系统,最终得到高纯度的谷氧还蛋白,并测定SeGrx1的酶动力学参数。RACE技术克隆甜菜夜蛾SeGrx1基因全长,构建pET16b-SeGrx1原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21,IPTG诱导融合蛋白表达,用镍柱初步纯化裂解菌液上清可溶性蛋白,Tev酶切除融合蛋白的6x His标签,再用Superdex75/200分子筛进一步纯化,目的蛋白的Western-bloting (WB)验证,酶动力学参数测定。SeGrx1基因的GeneBank的注册号MK318813,构建了表达效率很高的pET16b-SeGrx1重组质粒,最佳诱导方式:在细菌生长至OD_(600)=0.6时加入终浓度0.5mM的IPTG,30℃诱导4h;最佳纯化方式为:先用镍柱纯化菌液上清中可溶性蛋白,20mM,50mM咪唑梯度洗脱杂蛋白,300mM咪唑洗脱融合蛋白;最佳酶切融合蛋白的条件为:在含有0.5mM EDTA和1mM DTT的酶切缓冲液中,去除融合蛋白中的高浓度盐和咪唑,在pro:tev=2:5时(质量比)可以得好的酶切效果;再用Superdex 75/200分子筛进一步纯化,可获得纯度在95%以上目的蛋白。WB验证我们所表达的蛋白就是SeGrx1,以谷胱甘肽还原酶作为反应底物测定酶的活性为3.1倍hGrx1活性,酶学动力学参数Vmax=13.87 (±0.083),Km=6.5 (±0.17)×10～(-3)。成功在体外大量表达高纯度高活性的甜菜夜蛾谷氧还蛋白Grx1,并且获得了它的酶学动力学参数,将为进一步挖掘谷氧还蛋白的生物学功能,为探索以谷氧还蛋白作为特异性杀虫剂靶标打下了基础。(本文来源于《中国植物保护学会2019年学术年会论文集》期刊2019-10-23）
张文静,陈海超,郭利建,刘香利,赵惠贤[7]（2019）在《小麦TaWTG1的原核表达、纯化及去泛素化酶活性分析》一文中研究指出去泛素化酶是泛素化途径的逆调节酶,参与调控蛋白质的降解。为了探索小麦(Triticum aestivum)去泛素化酶家族成员WTG1 (wide and thick grain 1)基因的功能,本研究利用生物信息学方法对小麦TaWTG1编码蛋白的理化性质和结构进行了分析;进一步构建其原核表达载体p ET28a-TaWTG1,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)表达菌株BL21(DE3),对重组蛋白His-TaWTG1诱导表达条件(包括培养温度,异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside, IPTG)浓度和诱导时间)进行优化;进一步对重组蛋白进行可溶性分析和镍柱分离纯化,并对其去泛素化活性进行体外验证。结果表明,TaWTG1蛋白由319个氨基酸组成,理论分子量为35.38 kD,等电点为4.62;其叁级结构主要由α螺旋构成,含有OTU (ovarian tumor-related proteases)相关蛋白酶家族的otubain保守结构域;重组蛋白His-TaWTG1的最佳诱导表达条件为0.4 mmol/L IPTG、28℃诱导6 h;该重组蛋白主要以可溶形式存在于上清液中。Western blot分析确定用镍柱分离纯化获得的重组蛋白为目的蛋白;体外活性分析实验表明,TaWTG1具有去泛素化酶活性,可以切割赖氨酸(K)48和K63连接的四聚泛素链。本研究为TaWTG1基因功能研究提供了基础资料。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2019年10期）
李丹阳,樊帅,金媛媛,杨兆勇[8]（2019）在《UDP-3-O-(R-羟基十四酰)-N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰基酶的表达、纯化及与ACHN-975复合物的X-射线衍射分析》一文中研究指出目的以UDP-3-O-(R-羟基十四酰)-N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰基酶(LpxC)-ACHN-975晶体复合物结构为基础,研究小分子与靶蛋白的结合位点与方式,进而依据复合物结构设计该化合物,以获得活性强、毒性低的药物小分子。方法运用大肠杆菌表达系统对超嗜热菌(Aquifex aeolicus)来源的Aa LpxC进行异源表达,采用Zn~(2+)-NTA亲和层析、Q-HP强阴离子交换色谱和Superose12分子排阻色谱对重组蛋白进行分离纯化,对AaLpxC进行结构生物学研究,采用蒸汽扩散-悬滴法进行结晶条件筛选以及优化。结果获得纯度在90%以上的超嗜热菌来源的Aa Lpx C,经过结晶条件的优化获得分辨率为1.21?(1?=1×10-10m)的AaLpxC与ACHN-975的复合物晶体的衍射数据,其晶胞参数为a=65.569?,b=65.569?,c=131.595?,α=90.000°,β=90.000°,γ=120.000°。结论 ACHN-975与AaLpxC复合物晶体结构的获得有望对ACHN-975小分子结构优化及设计提供指导方向及重要依据。(本文来源于《中国医药生物技术》期刊2019年05期）
吴怡,马鸿飞,曹永佳,司静,崔宝凯[9]（2019）在《真菌漆酶的性质、生产、纯化及固定化研究进展》一文中研究指出真菌漆酶是一种性质优良的多酚氧化酶,由于在分子氧的协助下可将酚类、芳胺类化合物等多种底物氧化,最终得到水及其终产物,符合当代环保工业要求,因而在纸浆漂白、环境治理、生物检测、有机合成等领域有着巨大的应用潜力。就漆酶的生物学性质、生产、纯化、固定化等研究进展和现状进行了介绍和总结,同时对其今后的发展方向进行了展望。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年09期）
李雪成,姜利建,崔成都,朴明淑[10]（2019）在《胶原酶浓度及消化时间对屠宰猪胰岛分离纯化的影响》一文中研究指出本试验为确定分离猪胰岛的最佳胶原酶浓度,以屠宰猪胰腺为试验材料进行猪胰岛分离纯化研究。结果表明,猪胰岛获取量与不同浓度胶原酶1.0 mg/ml、1.5 mg/ml、2.0 mg/ml各组间均差异显着(P<0.05);在相同的消化时间(15 min)条件下,猪胰岛分离1758±125个/g,纯化后1485±119个/g,纯度为84%存活率为92%。由此可知,屠宰猪胰岛分离的最佳胶原酶浓度为1.5mg/ml,而最佳消耗时间为15 min。(本文来源于《科学技术创新》期刊2019年27期）
酶的纯化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:筛选纤维素酶辅助提取芹菜总黄酮的最优提取工艺。方法:采用单因素试验方法分别考察乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数以及酶用量、pH值、酶解时间、酶解温度对芹菜总黄酮提取率的影响,同时对以上因素分别进行L_9(3~4)正交试验,得到酶辅助提取芹菜总黄酮的最佳提取工艺。结果:最佳工艺条件是纤维素酶用量7.0%、pH值4.4、酶解温度45℃、酶解时间1 h、乙醇浓度60%、料液比1∶20、提取时间2 h、提取次数1次。在此工艺下,芹菜总黄酮的提取率为4.17%。结论:加入纤维素酶可以有效提高芹菜总黄酮的提取率。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶的纯化论文参考文献
[1].肖伟,徐梅珍,谷丰,蒋伦伟,王义华.东乡野生稻过氧化物酶分离纯化及其酶学特性研究[J].中国农学通报.2019
[2].薛晶晶,乔婧,高建德,刘雄.酶辅助提取纯化芹菜总黄酮的工艺研究[J].中兽医医药杂志.2019
[3].燕晓婷,陈华国,周欣,高赛.黑骨藤总黄酮的提取纯化及体外抗黄嘌呤氧化酶的活性筛选[J].国际药学研究杂志.2019
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[6].杨付来,王月华,赵真真,张兰,张燕宁.甜菜夜蛾SeGrx1基因的克隆原核表达纯化及酶动力学研究[C].中国植物保护学会2019年学术年会论文集.2019
[7].张文静,陈海超,郭利建,刘香利,赵惠贤.小麦TaWTG1的原核表达、纯化及去泛素化酶活性分析[J].农业生物技术学报.2019
[8].李丹阳,樊帅,金媛媛,杨兆勇.UDP-3-O-(R-羟基十四酰)-N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰基酶的表达、纯化及与ACHN-975复合物的X-射线衍射分析[J].中国医药生物技术.2019
[9].吴怡,马鸿飞,曹永佳,司静,崔宝凯.真菌漆酶的性质、生产、纯化及固定化研究进展[J].生物技术通报.2019
[10].李雪成,姜利建,崔成都,朴明淑.胶原酶浓度及消化时间对屠宰猪胰岛分离纯化的影响[J].科学技术创新.2019
论文知识图
