导读:本文包含了内源性绵羊肺腺瘤病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:内源性绵羊肺腺瘤病毒,全基因序列,原核表达,生物信息学分析
内源性绵羊肺腺瘤病毒论文文献综述
吴丹丹,徐斯日古楞,李慧萍,鲁凤霞,刘淑英[1]（2018）在《蒙古绵羊内源性绵羊肺腺瘤病毒全基因组序列测定与囊膜蛋白的表达分析》一文中研究指出为了克隆内源性绵羊肺腺瘤病毒(en JSRV)全基因组序列,针对env基因分析其结构并构建原核表达质粒,并诱导囊膜蛋白表达。根据Gen Bank中提供的en JSRV DNA序列(AF152615)设计引物,采用PCR方法进行序列扩增并克隆,并对克隆结果进行测序和生物信息学分析。然后将添加了Bam HⅠ和HindⅢ酶切位点的env基因片段克隆至p ET-32a载体构建表达质粒,并将质粒转化至大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中诱导囊膜蛋白表达,最后利用SDS-PAGE电泳及Western-blot检测、鉴定囊膜蛋白。结果显示,en JSRV序列长7 382 bp,其中env基因片段长1 836 bp,en JSRV与en JSRV-23的同源性为97.3%。PSORTⅡ及DNAStar等软件预测分析en JSRV囊膜蛋白主要定位于细胞质、线粒体内膜等位置,且存在多个抗原表位。在37℃条件下,0.5 mmol/L IPTG诱导转入p ET32-Env的E.coli BL21(DE3),8 h后可获得分子质量约为89 ku的以包涵体形式存在的囊膜蛋白。本试验测定了en JSRV全基因序列,并成功构建了表达囊膜蛋白的p ET32a-Env载体,为今后制备en JSRV-Env抗体奠定了试验基础,同时为囊膜蛋白生物学功能的深入探讨提供了理论参考。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2018年07期）
周艳喜,苏佳,李靖,刘霄卉,马学恩[2]（2012）在《内源性绵羊肺腺瘤病毒全基因组序列测定与序列分析》一文中研究指出参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20全基因组序列设计合成3对引物,应用PCR技术扩增内源性绵羊肺腺瘤病毒基因片段分别连接pMD-18T载体并测序,完成了内源性绵羊反转录病毒基因组序列测定。分析结果显示,测定序列全长7 519bp,与内源性绵羊肺腺瘤病毒代表株enJSRV-20核苷酸同源性为99.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒代表株AF357971.1的核苷酸同源性为90.4%。基于全基因组序列核苷酸的系统进化发生树分析结果显示,扩增序列与enJSRV-20的亲缘关系最近。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2012年07期）
周艳喜[3]（2012）在《绵羊肺腺瘤病相关基因突变的检测及绵羊、山羊内源性反转录病毒的扩增》一文中研究指出研究背景：绵羊肺腺瘤病(ovine pulmonary adenomatosis, OPA)是一种由绵羊肺腺瘤病病毒(jaagsiekte sheep retrovirus, JSRV)引起的肺脏肿瘤性疾病。病原JSRV为β反转录病毒。自然感染绵羊潜伏期为2～24个月,人工感染绵羊潜伏期为3-7个月,患病绵羊病死率为100%。世界动物卫生组织将该病列为B类传染病。JSRV的Env蛋白是在体内和体外起主要作用的癌蛋白,有研究表明PI3K/AKT和RAS-MEK-MAPK是JSRV Env蛋白转化细胞的信号通路。建立特异、快速诊断方法是本病防控的基础。病毒致病机制的研究是深入了解本病的重点。研究目的方法：建立特异性诊断OPA的方法和研究OPA与癌症相关基因突变的关系。本实验在JSRV结构基因研究的基础上参照GenBank中登录的JSRV基因序列,针对编码Env蛋白YXXM基序列设计了特异性PCR引物,建立了PCR检测方法,并对保存的病料进行了检测。参照SANGER、UCSC、GenBank数据库对nras、kras、pik3ca、egfr,p53基因发生突变较高的位点的外显子进行扩增。应用SSCP-PCR技术对扩增产物进行分析,对疑似突变的扩增产物进行测序检测。参照GenBank中登录的enJSRV基因序列,设计叁对特异性引物扩增出一株绵羊内源性肺腺瘤反转录病毒和一株山羊内源性肺腺瘤反转录病毒基因片段。以山羊基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增山羊内源性病毒基因片段,分别连接PMD-18T载体并测序。利用Methyl Primer Express v1.0查找绵羊和山羊enJSRV启动子区CpG岛,各设计一对甲基化引物和一对非甲基化引物。以处理的绵羊和山羊基因组DNA为模板,检测绵羊胎儿不同组织基因组DNA的甲基化情况,和不同山羊组织基因组DNA甲基化情况。构建含enJSRV的pro、env融合基因的真核表达载体EGFP-enpro、pcDNA3.1-enenv并在小鼠肺上皮细胞系TC-1中表达。实验结果：(1)建立的特异性PCR检测方法,具有高的特异性、重复性,可检测出最低10～20拷贝的JSRV前病毒DNA。检测出JSRV阳性样品10例。(2)应用PCR-SSCP检测法,对10例JSRV阳性样品和10例阴性样品进行检测,结果在2例阳性标本中发现kras基因第二外显子第12氨基酸杂合型突变,CDS突变356)T,氨基酸突变G12V。1例阳性样品检测出p53基因第7外显子杂合型突变,CDS突变825T>C,氨基酸未发生突变C275C。(3)完成了一株绵羊内源性肺腺瘤病毒和一株山羊内源性肺腺瘤病毒基因序列的测定和序列分析,结果显示测得的绵羊enJSRVN序列与enJSRV-20(EF680302.1)病毒株的核苷酸同源性为99.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒JS7(AF357971.1)病毒株的核苷酸同源性为90.9%。测得的山羊GERV序列与内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-5(EF680305.1)的核苷酸同源性为94.2%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒株JS-7(AF357971.1)的核苷酸同源性为88.1.%。扩增的绵羊和山羊内源性反转录病毒的同源性为93.1%。对enJSRV基因启动子甲基化检测,结果显示绵羊和山羊不同组织中均存在甲基化与非甲基化修饰的病毒启动子。(4)经过酶切鉴定pro.eNV基因成功连接入真核表达载体pEGFP-C1和pcDNA3.1(+),蛋白免疫荧光和Western BlOt方法检测显示重组质粒、EGFP-enpro、 pcDNA3.1-enenv能够在真核细胞中瞬时表达.结论：(1)本研究建立了JSRV的特异性检测方法,对OPA的早期诊断和防控具有实用价值。(2)检测到JSRV感染绵羊肿瘤组织基因组中kras.p53基因突变,对研究OPA的致病机制具有重要参考价值。(3)成功扩增出一株绵羊和一株山羊enJSRV基因序列,检测了绵羊和山羊enJSRV启动子区的甲基化修饰情况。(4)分别构建了包含enJSRV的pro、env基因的真核表达质粒,为研究enJSRV的功能和抑制JSRV感染的作用奠定了基础。(本文来源于《内蒙古农业大学》期刊2012-04-01）
张月梅,刘淑英[4]（2011）在《内源性绵羊肺腺瘤病毒与宿主共进化研究进展》一文中研究指出近年来的研究表明,内源性逆转录病毒作为哺乳动物基因组的重要组成部分,在与宿主共进化过程中发挥重要作用。对内源性绵羊肺腺瘤病毒的研究,为揭示哺乳动物内源性逆转录病毒与宿主共进化关系提供了一个独特的模型系统。内源性绵羊肺腺瘤病毒在与宿主共进化过程中不断的增强自身的宿主适应性,通过取代宿主原有的促进孕体发育及胎盘形成的机制而发挥作用。通过分析近年来国内外学者对于内源性逆转录病毒一些相关研究,从内源性逆转录病毒在进化中可能的作用、内源性绵羊肺腺瘤病毒的分类、基因结构特点、在与宿主共进化过程中可能的作用、对孕期激素的影响及与外源性绵羊肺腺瘤病毒相互作用关系等方面进行了综述。(本文来源于《动物医学进展》期刊2011年07期）
苏佳,周艳喜,马学恩,幺宏强,赵晓慧[5]（2011）在《内源性绵羊肺腺瘤病毒env基因的克隆及序列分析》一文中研究指出参照GenBank上已发表的内源性绵羊肺腺瘤病毒env基因与5′长末端重复序列保守区序列设计引物,应用PCR技术成功扩增出内源性绵羊肺腺瘤env基因与5′长末端重复序列,将纯化的扩增片段连接pMD18-T克隆载体进行测序获得目的基因序列。应用MEGA4.1、DNASTAR进行序列分析,分析结果表明,内源性env基因具有完整的开放阅读框,内源性env基因序列与内源性绵羊肺腺瘤(AF153615.1)基因同源性高达99.7%,与外源性绵羊肺腺瘤(M80216.1)基因的同源性仅为90.6%;由内源性env基因推导的氨基酸在NCBI进行BLAST比较:与AF153615.1的氨基酸同源性高达100%。内源性env基因编码表达的蛋白具有亲水性。这些结果为研究5′长末端序列对内源性env基因调控等问题提供了重要参考。(本文来源于《畜牧与饲料科学》期刊2011年01期）
柴局,齐景伟,刘淑英,张文广,赖双英[6]（2009）在《内源性绵羊肺腺瘤病毒基因在蒙古羊染色体上的分布研究》一文中研究指出本研究旨在探究内源性绵羊肺腺瘤病毒基因在蒙古羊染色体上的分布情况。参照已登入GenBank中的内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV,登录号为DQ838493)序列,设计合成1对引物,PCR扩增gag基因的部分片段,用地高辛标记制备探针,利用荧光原位杂交(FISH)技术检测enJSRV在蒙古羊染色体上的分布。结果表明,用en-JSRV的gag基因合成的DNA探针在蒙古羊中期分裂相的6条染色体上均有杂交信号,分别为1q45、1p23、2q41、3q23、6q13、9q22和14q25,其中在6和9号染色体上出现有较强的荧光信号。结果提示,在6和9号染色体上这2个位点上有多拷贝的enJSRV基因,1q45、1p23、2q41、3q23、和14q25拷贝数少,这与内源性绵羊肺腺瘤病毒进化有关。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2009年11期）
徐萌杰,刘淑英[7]（2009）在《内源性绵羊肺腺瘤病毒生殖生物学的研究进展》一文中研究指出从内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)的基因结构特点、染色体中的分布、在绵羊肺腺瘤发生过程中的作用、孕体植入前的作用、对胎盘形成的影响等方面综述了enJSRV生殖生物学作用的最新研究进展,为哺乳动物内源性逆转录病毒生殖生物学领域的研究提供了新的思路。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2009年08期）
徐萌杰,刘淑英,吴晓莉,齐景伟[8]（2009）在《内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)及其受体Hyal-2在妊娠蒙古绵羊子宫和孕体的表达》一文中研究指出为了明确内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)是否在蒙古绵羊的发育过程中发挥作用以及在绵羊肺腺瘤病致瘤过程中可能发挥的作用,本试验利用RT-PCR和组织原位杂交技术对enJSRV及其受体Hya1-2在妊娠绵羊的子宫和孕体的表达规律和分布定位进行了研究。结果表明:enJSRV及其受体Hya1-2在蒙古绵羊不同妊娠期(27d、56d、91d和107d)的子宫内膜、绒毛膜、胎盘和孕体中均有表达,且二者特异性的表达在子宫内膜的腔上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞、胎盘的子叶及滋养层巨型双核细胞和多核合胞体小半鞘翅。enJSRV及其受体Hya1-2在妊娠蒙古绵羊子宫和孕体中的表达,揭示其在胎盘和孕体发育过程中可能发挥重要作用,同时可通过干扰exJSRV的侵入而影响肺腺瘤病的发生。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集》期刊2009-07-01）
吴江鸿,张文广,刘淑英,李金泉[9]（2009）在《绵羊基因组中内源性绵羊肺腺瘤病毒相关序列的确定》一文中研究指出绵羊都含有与绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)密切相关的15~20拷贝内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)相关序列。宿主可利用内源性病毒来预防致病性反转录病毒的感染,一些内源性病毒可以有效地干扰相关外源性病毒的复制。本试验通过分子生物学手段确定了蒙古绵羊基因组中含有enJSRV6和enJSRV10两个内源性病毒基因而内蒙古白绒山羊中未发现。通过比较内、外源病毒LTR序列的酶切图谱,获得专一作用外源性病毒的核酸内切酶M spⅠ、TfiⅠ、BsaWⅠ,如果将酶切与聚合酶链式反应(PCR)相结合,不需要经过测序就可分辨enJS-RV和外源性绵羊肺腺瘤病毒(exJSRV),形成"酶切-PCR"检测技术,将为绵羊肺腺瘤病的快速诊断提供了新的手段。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2009年03期）
王宇,刘淑英,韩敏,李建云[10]（2007）在《内源性绵羊肺腺瘤病毒NM株pol基因的克隆与序列分析》一文中研究指出参照GenBank中内源性绵羊肺腺瘤病毒enJS56A1株pol基因序列设计了2对引物。应用PCR技术特异性地扩增出病毒的pol基因片段,将其克隆到PMD19-T载体后测序。应用计算机软件将测定序列与内源性南非代表毒株enJS56A1(AF153615)的pol基因序列比较,核苷酸同源性为99.3%,推导出的氨基酸同源性为95.0%。与外源性南非代表株JSRV-SA(M80216)的pol基因序列比较,核苷酸同源性为99.0%,氨基酸同源性为99.3%。这也是我国首次报道的内源性绵羊肺腺瘤病毒pol基因序列,为我国科研工作者进行更深入的研究奠定基础。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2007年12期）
内源性绵羊肺腺瘤病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
参照内源性绵羊肺腺瘤病毒株enJSRV-20全基因组序列设计合成3对引物,应用PCR技术扩增内源性绵羊肺腺瘤病毒基因片段分别连接pMD-18T载体并测序,完成了内源性绵羊反转录病毒基因组序列测定。分析结果显示,测定序列全长7 519bp,与内源性绵羊肺腺瘤病毒代表株enJSRV-20核苷酸同源性为99.4%,与外源性绵羊肺腺瘤病毒代表株AF357971.1的核苷酸同源性为90.4%。基于全基因组序列核苷酸的系统进化发生树分析结果显示,扩增序列与enJSRV-20的亲缘关系最近。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
内源性绵羊肺腺瘤病毒论文参考文献
[1].吴丹丹,徐斯日古楞,李慧萍,鲁凤霞,刘淑英.蒙古绵羊内源性绵羊肺腺瘤病毒全基因组序列测定与囊膜蛋白的表达分析[J].中国兽医科学.2018
[2].周艳喜,苏佳,李靖,刘霄卉,马学恩.内源性绵羊肺腺瘤病毒全基因组序列测定与序列分析[J].中国兽医学报.2012
[3].周艳喜.绵羊肺腺瘤病相关基因突变的检测及绵羊、山羊内源性反转录病毒的扩增[D].内蒙古农业大学.2012
[4].张月梅,刘淑英.内源性绵羊肺腺瘤病毒与宿主共进化研究进展[J].动物医学进展.2011
[5].苏佳,周艳喜,马学恩,幺宏强,赵晓慧.内源性绵羊肺腺瘤病毒env基因的克隆及序列分析[J].畜牧与饲料科学.2011
[6].柴局,齐景伟,刘淑英,张文广,赖双英.内源性绵羊肺腺瘤病毒基因在蒙古羊染色体上的分布研究[J].畜牧兽医学报.2009
[7].徐萌杰,刘淑英.内源性绵羊肺腺瘤病毒生殖生物学的研究进展[J].中国兽医科学.2009
[8].徐萌杰,刘淑英,吴晓莉,齐景伟.内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)及其受体Hyal-2在妊娠蒙古绵羊子宫和孕体的表达[C].中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集.2009
[9].吴江鸿,张文广,刘淑英,李金泉.绵羊基因组中内源性绵羊肺腺瘤病毒相关序列的确定[J].畜牧与兽医.2009
[10].王宇,刘淑英,韩敏,李建云.内源性绵羊肺腺瘤病毒NM株pol基因的克隆与序列分析[J].中国兽医杂志.2007
标签：内源性绵羊肺腺瘤病毒; 全基因序列; 原核表达; 生物信息学分析;