体外诱导论文_张权,陈恋,常铖,张亚奇,肖翠红

导读:本文包含了体外诱导论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:干细胞,诱导,细胞,神经细胞,体外,因子,骨髓。

体外诱导论文文献综述

张权,陈恋,常铖,张亚奇,肖翠红[1](2019)在《两种不同的体外诱导人脐带间充质干细胞成软骨细胞方法的比较》一文中研究指出该课题探讨了3D悬滴培养与贴壁培养体外诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells, hUC-MSCs)在成软骨分化特性上的差异。采用机械匀浆法和组织块贴壁培养法体外分离培养获得第5代h UC-MSCs,流式细胞术检测干细胞表面免疫标记物,经3D悬滴培养与贴壁培养诱导应用番红O和阿利辛蓝染色及荧光定量检测富含透明质酸糖胺聚糖的细胞外基质形成情况以及不同时间点(3天、7天、14天)成软骨相关基因ACAN、MIA、COL1A2、COL2A1和COL10A1表达,并用免疫组化染色的方法检测II型胶原的表达情况。结果显示,流式细胞术检测的第5代h UC-MSCs间充质干细胞表面标记物结果符合国际细胞疗法协会制定的鉴定标准; 3D悬滴培养的h UC-MSCs可形成致密的细胞聚合物,贴壁培养的细胞形态成长梭形;番红O和阿利辛蓝染色结果显示, 3D悬滴培养和贴壁培养的h UC-MSCs均能形成软骨细胞;但荧光实时定量PCR结果显示, 3D悬滴培养的h UC-MSCs形成软骨细胞的成软骨相关基因的表达明显多于贴壁培养细胞形成软骨细胞的成软骨相关基因; II型胶原免疫组化染色的阳性细胞染色及统计结果显示, 3D悬滴培养比贴壁培养的诱导的h UC-MSCs成软骨能力更强。3D悬滴培养法是一种理想的h UC-MSCs诱导成软骨培养方法。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2019年10期)

张觅,刘洋,谭俊峰,刘立冰,严磊[2](2019)在《GDF-5在体外诱导脂肪干细胞向软骨细胞转化实验研究》一文中研究指出目的研究体外生长分化因子5(GDF-5)对脂肪干细胞向软骨细胞分化能力的影响。方法选择40只4周龄雌性SD大鼠,体质量约50 g。采用酶消化-密度梯度离心法提取脂肪干细胞,行体外培养,并通过流式细胞术鉴定脂肪干细胞。体外培养的脂肪干细胞分3组,即对照组、矿化组和GDF-5诱导组。不同试剂培养2周后分别进行免疫组织化学、甲苯胺蓝及免疫荧光染色。结果原代细胞经过接种沉降贴壁大量增殖后,按一定方向性排列呈旋涡状或束状,传代后细胞增殖迅速,生长稳定。细胞接种经Ⅱ型胶原免疫组织化学染色:GDF-5诱导组棕黄色阳性表达的细胞数量多;矿化组弱阳性,染色细胞数量少;对照组呈阴性表达。细胞甲苯胺蓝染色示:GDF-5诱导组蓝染阳性,细胞胞浆及其周围有紫红色异常染色;矿化组染色淡,染色细胞少;对照组阴性,细胞几乎均失染。结论 GDF-5能够在体外增强脂肪干细胞的软骨化。(本文来源于《生物医学工程与临床》期刊2019年06期)

刘洋,吕洋,王浩宇,李娇,任君旭[3](2019)在《1,25-维生素-D_3体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的最适浓度》一文中研究指出目的探讨1,25-维生素D_3(1,25-vitamin-D_3)体外诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的最适浓度。方法采用全骨髓贴壁法结合密度梯度离心法分离培养SD大鼠BMSCs,应用3、6、12、24 nmol/L 1,25-vitamin-D_3对第2代BMSCs进行定向诱导,倒置相差显微镜下动态观察细胞生长状况。运用流式细胞仪对BMSCs进行鉴定。应用免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测诱导后4周的BMSCs原肌球蛋白(TPM)、间隙连接蛋白43(Cx43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达情况。运用透射电子显微镜观察分化细胞与心肌细胞类似的超微结构。在诱导后1、2和4周这3个时间点,以Real-time PCR法检测细胞心肌早期转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)、Nkx2.5的表达。结果 1.倒置相差显微镜下观察,原代细胞培养72 h后,大部分细胞呈短梭形;培养1周后,细胞呈现出多样化的形态;诱导4周的BMSCs,相邻细胞间联系紧密,排列具有明显的方向性。不同浓度1,25-vitamin-D_3诱导后的BMSCs,其数量及形态存在差异。2.流式细胞术的鉴定结果显示,CD29、CD45、CD90的阳性表达率分别为97.4%、3.3%和91.4%。3.免疫细胞化学、免疫荧光及Western blotting法检测不同浓度1,25-vitamin-D_3诱导4周后的BMSCs均可见TPM、Cx43及cTnT的阳性表达,其中6 nmol/L组的表达均最高,而未诱导组细胞呈弱阳性或阴性表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。4.透射电子显微镜观察,细胞诱导培养至4周,胞质内可见较多平行排列的肌丝及线粒体、核糖体、粗面内质网等细胞器。5.Real-time PCR检测结果显示,GATA4及Nkx2.5基因于诱导后1周表达增强,2周表达减弱,4周表达增强;4个诱导组相比较,6 nmol/L组明显优于其他3组(P<0.05)。结论 1,25-vitamin-D_3可以诱导BMSCs获得心肌分化表型,其诱导分化最适浓度为6 nmol/L。(本文来源于《解剖学报》期刊2019年05期)

甘富斌,扎西卓玛,吴庆侠,白玛次仁,李家奎[4](2019)在《LPS体外诱导牦牛子宫内膜炎症模型的建立》一文中研究指出为建立大肠杆菌细菌脂多糖(LPS)体外诱导牦牛子宫内膜细胞炎症的模型,在生长良好的牦牛子宫内膜上皮细胞中分别加入浓度为1、50、100、200、500、1000 ng/mL的LPS,采用MTT法检测其细胞毒作用,确定LPS最佳浓度;在牦牛子宫内膜上皮细胞中添加最佳浓度LPS,孵育至24、48、72 h,分别收集培养上清液,采用ELISA法测定白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌变化情况。结果表明,LPS体外诱导牦牛子宫内膜炎症模型的最佳浓度为100 ng/mL,在孵育至24 h及以上时,IL-1β和TNF-α的质量浓度与对照组相比差异显著(P <0.05),表明该炎症模型建立成功。(本文来源于《高原农业》期刊2019年04期)

刘振东,王瑞,杨建东,王静成[5](2019)在《胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化》一文中研究指出背景:骨髓间充质干细胞作为中胚层来源的多能干细胞,除了能够分化为间充质系细胞如成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞外,还具有神经分化潜能,具有广阔的应用前景。目的:探讨胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞的可行性。方法:选用健康SD大鼠,采用全骨髓贴壁法体外培养、纯化骨髓间充质干细胞,经流式细胞仪进行细胞表型鉴定。取生长状态良好的第4代骨髓间充质干细胞进行实验分组:对照组不加任何诱导剂;实验组培养液内加入胶质细胞源性营养因子,调整质量浓度分别为20,50,100μg/L,倒置相差显微镜连续观察细胞生长情况及形态变化。诱导6,12,24,48,72 h,采用免疫组化法检测巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶的表达。结果与结论:①原代提取获得的骨髓间充质干细胞形态均一性较好,流式细胞仪检测结果为CD44,CD90呈强阳性表达,CD34,CD45阳性表达率很低;②经胶质细胞源性营养因子诱导后,细胞胞体逐渐向胞核收缩,变形细胞逐渐增多,出现双极、多极和锥形等典型的神经元样细胞形态,细胞边缘出现突起,且与邻近细胞突起逐渐相互连接;③胶质细胞源性营养因子诱导6 h后出现巢蛋白表达阳性,24 h后达顶峰,50,100μg/L胶质细胞源性营养因子组巢蛋白表达显着高于20μg/L胶质细胞源性营养因子组。胶质细胞源性营养因子诱导12h后检测到神经元特异性烯醇化酶表达阳性,且表达强度随时间延长逐渐增加,48h后达顶峰,50,100μg/L胶质细胞源性营养因子组巢蛋白表达显着高于20μg/L胶质细胞源性营养因子组。对照组未见明显神经元样细胞的形态变化及特异性标志的阳性表达;④结果表明,大鼠骨髓间充质干细胞可通过全骨髓贴壁法在体外进行原代提取分离及传代培养,经胶质细胞源性营养因子诱导后具有向神经元样细胞分化的潜能。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年29期)

王姣杰,安慧娟,单泓,韩小改,别立莉[6](2019)在《体外诱导外周血造血干细胞分化为成熟红细胞》一文中研究指出背景:随着人口老龄化、医疗技术不断的更新,红细胞需求呈增加趋势,血液供应也日趋紧张。体外制备可供临床应用的血液制品成为众多专家关注的热点,而体外诱导造血干细胞向成熟红细胞分化是获得新型血源的可能途径之一。目的:探讨采用叁阶段悬浮培养体系诱导外周血废弃白膜层来源造血干细胞向成熟红细胞分化及体外生产成熟红细胞的可行性。方法:经河南省红十字血液中心伦理委员会批准,采用外周血废弃白膜层为原料(献血者均知情同意),分离出CD34~+细胞,以此为种子细胞,采用叁阶段21 d悬浮培养体系体外诱导造血干细胞向成熟红细胞分化,分别在第4,7,9,11,13,15,17,19,21天进行细胞计数,绘制细胞生长曲线,了解细胞生长情况;在第7,11,15,19,21天进行细胞涂片和瑞氏-吉姆萨染色,显微镜下观察细胞形态学变化;在培养第7天时,采用流式细胞仪检测红系早期分化情况;在第7,11,15,17天时,采用流式细胞仪检测红系终末分化情况;在第15,17,19天时,采用流式细胞仪检测脱核率。结果与结论:①随着培养天数增加,细胞呈增加趋势,到第17天达高峰,细胞扩增约1 300倍,之后趋于平稳状态;②随着培养天数的增加,细胞从原幼红细胞向嗜碱性幼红细胞、多染幼红细胞、正染幼红细胞分化,培养至21 d时,几乎全部分化为脱核红细胞;③红系早期分化情况:IL-3R/GPA双阴性细胞占(15.8±0.21)%,其中红系爆发集落形成单位(BFU-E)占(0.98±0.21)%,红系祖细胞克隆形成单位(CFU-E)占(8.13±1.42)%;④红系终末分化情况:随着细胞培养天数的增加,GPA表达也逐渐增加,培养至第17天时,接近90%的细胞表达GPA,表明造血干细胞定向红系分化较为成功;⑤随着培养天数的增加,无核红细胞越来越多,至第19天80%以上均为无核红细胞;⑥结果表明,采用叁阶段21 d悬浮培养体系,体外诱导来自废弃白膜层的外周血造血干细胞向成熟红细胞分化,可以生产成熟红细胞,且能达到较高脱核率。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年29期)

范曜天,孙劼,夏光亮,赵芳芳,孙华[7](2019)在《添加槐花、香蕉花和杭白菊对体外诱导人工瘤胃酸中毒缓解效果的研究》一文中研究指出本试验旨在研究添加槐花、香蕉花和杭白菊对体外诱导人工瘤胃酸中毒的缓解效果,为实际生产中缓解瘤胃酸中毒的应用提供理论依据。试验采用体外批次培养法,分别在高非纤维性碳水化合物底物[非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维(NFC/NDF)为2.30]和常规底物(NFC/NDF为1.19)中添加槐花、香蕉花和杭白菊,研究其对于瘤胃发酵参数的影响。试验采用单因素设计,试验分4组,每组设置3个重复。3种植物的添加量均为10 mg/mL,对照组不添加植物干粉,分别于发酵后的3、6、9、12 h,采集发酵液用于各发酵参数的测定。结果表明:1)常规底物中,香蕉花组各发酵阶段的体外发酵液pH均高于对照组(P>0.05);高非纤维性碳水化合物底物中,对照组各发酵阶段的体外发酵液pH显着高于杭白菊组(P<0.05)。2)常规底物中,发酵3、6 h时,香蕉花组的体外发酵液乳酸浓度显着高于对照组(P<0.05);发酵12 h时,槐花组、香蕉花组和杭白菊组的体外发酵液乳酸浓度均显着低于对照组(P<0.05)。高非纤维性碳水化合物底物中,发酵3、6 h时,香蕉花组的体外发酵液乳酸浓度显着高于对照组(P<0.05);发酵12 h时,杭白菊组的体外发酵液乳酸浓度显着低于对照组(P<0.05)。3)发酵12 h时,各组的体外发酵液氨态氮浓度无显着差异(P>0.05),但发酵过程中存在差异。4)常规底物中,发酵12 h时,槐花组和杭白菊组的体外发酵液总挥发性脂肪酸浓度和丙酸比例显着高于对照组和香蕉花组(P<0.05),乙酸和丁酸比例显着低于对照组和香蕉花组(P<0.05)。高非纤维性碳水化合物底物中,发酵12 h时,杭白菊组的体外发酵液总挥发性脂肪酸浓度显着高于对照组和香蕉花组(P<0.05),乙酸、丙酸、丁酸比例与对照组无显着差异(P>0.05)。由此可见,杭白菊能缓解瘤胃乳酸累积,而香蕉花则具有调控瘤胃pH相对衡定的能力,因此香蕉花和杭白菊在缓解瘤胃酸中毒方面有潜在价值。(本文来源于《动物营养学报》期刊2019年10期)

李桂秋,魏影,余治健,陈俊文,钟婉莹[8](2019)在《新型四环素药物Eravacycline体外诱导金黄色葡萄球菌耐药16S rRNA基因突变位点分析》一文中研究指出目的:研究Eravacycline体外诱导金黄色葡萄球菌耐药菌株的核糖体30S亚基16S rRNA基因和核糖体蛋白变异特点,阐明金黄色葡萄球菌Eravacycline耐药机制。方法:选择3株金黄色葡萄球菌株,采用Eravacycline不同压力浓度下逐渐诱导Eravacycline耐药金黄色葡萄球菌耐药菌株,挑取诱导菌株单克隆,采用琼脂平板稀释法测定母株及诱导系列的Tigecycline和Eravacycline的MIC值;通过PCR扩增其5个拷贝的16S rRNA基因(RR1-RR5)和30S核糖体蛋白基因,将诱导的Eravacycline耐药株扩增产物测序后与母株序列比较,获得该基因片段突变位点。结果:经过体外Eravacycline不同浓度梯度多步诱导共挑取6株Eravacycline耐药菌株,这些菌株的Tigecycline和Eravacycline的MIC值范围分别为8~16μg/mL和32~64μg/mL。16S rRNA基因PCR测序分析提示该基因的主要突变位点分别为RR1(T170G)、RR2(A1124G,G77A)、RR3(C810T)、RR4(G185A,G1036A),30S亚基核糖体蛋白S3蛋白没有突变,30S亚基核糖体蛋白S10基因多个位点突变。结论:金黄色葡萄球菌Eravacycline诱导耐药后可导致Tigecycline和Eravacycline的交叉耐药及16S rRNA基因和30S亚基核糖体蛋白S10位点突变。(本文来源于《中国医学创新》期刊2019年18期)

王晨宇,张曼玲,姜海滨,金永,赵丽华[9](2019)在《猪naive-like胚胎干细胞向神经细胞体外诱导分化》一文中研究指出目的:将猪naive-like胚胎干细胞体外定向诱导分化为神经细胞,为猪多能干细胞诱导神经分化方法的建立提供参考。方法:利用小分子化合物β-巯基乙醇、B-27、肝素等组成的神经诱导培养液,采用直接分化法,分化得到神经样细胞,对其进行神经特异性基因表达鉴定,同时检测分化后的细胞是否已经丧失多能性。结果:分化所得到的神经细胞具有明显的神经细胞结构特征,RT-PCR和免疫荧光结果显示分化后的神经细胞表达多种神经细胞特异性基因,qPCR结果显示分化后多能因子的表达显着降低,神经特异性基因表达显着升高,免疫荧光结果经统计分析后显示,低分子量神经微丝蛋白(light neurofilament protein,NF-L)阳性细胞率可达79%。结论:成功实现了体外直接诱导猪naive-like胚胎干细胞向神经细胞分化,为神经系统疾病修复与治疗研究奠定了基础。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2019年06期)

梁群,邢金梅,何学斌[10](2019)在《缬草萜内酯对体外诱导肝星状细胞增殖及氧化应激反应的影响》一文中研究指出目的探讨缬草萜内酯A、B、C对体外诱导肝星状细胞(HSC)增殖及氧化应激反应的影响。方法 HSC与次氮基叁醋酸铁(FeNTA)共同培养产生氧化应激后,四甲基唑蓝(MTT)法检测不同质量浓度(50、100、200、300、400μg/mL)缬草萜内酯对HSC增殖的影响,ELISA法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果缬草萜内酯A、B、C对HSC增殖有不同程度的抑制作用,并且也有抗氧化应激活性(50μg/mL缬草萜内酯A、B除外),同时与模型组比较MDA水平显着降低(P<0.05,P<0.01),SOD活性显着升高(P<0.05,P<0.01)。结论缬草萜内酯对肝纤维化形成有一定抑制作用,其机制可能与抑制HSC增殖、抗氧化作用有关。(本文来源于《中成药》期刊2019年05期)

体外诱导论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的研究体外生长分化因子5(GDF-5)对脂肪干细胞向软骨细胞分化能力的影响。方法选择40只4周龄雌性SD大鼠,体质量约50 g。采用酶消化-密度梯度离心法提取脂肪干细胞,行体外培养,并通过流式细胞术鉴定脂肪干细胞。体外培养的脂肪干细胞分3组,即对照组、矿化组和GDF-5诱导组。不同试剂培养2周后分别进行免疫组织化学、甲苯胺蓝及免疫荧光染色。结果原代细胞经过接种沉降贴壁大量增殖后,按一定方向性排列呈旋涡状或束状,传代后细胞增殖迅速,生长稳定。细胞接种经Ⅱ型胶原免疫组织化学染色:GDF-5诱导组棕黄色阳性表达的细胞数量多;矿化组弱阳性,染色细胞数量少;对照组呈阴性表达。细胞甲苯胺蓝染色示:GDF-5诱导组蓝染阳性,细胞胞浆及其周围有紫红色异常染色;矿化组染色淡,染色细胞少;对照组阴性,细胞几乎均失染。结论 GDF-5能够在体外增强脂肪干细胞的软骨化。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

体外诱导论文参考文献

[1].张权,陈恋,常铖,张亚奇,肖翠红.两种不同的体外诱导人脐带间充质干细胞成软骨细胞方法的比较[J].中国细胞生物学学报.2019

[2].张觅,刘洋,谭俊峰,刘立冰,严磊.GDF-5在体外诱导脂肪干细胞向软骨细胞转化实验研究[J].生物医学工程与临床.2019

[3].刘洋,吕洋,王浩宇,李娇,任君旭.1,25-维生素-D_3体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的最适浓度[J].解剖学报.2019

[4].甘富斌,扎西卓玛,吴庆侠,白玛次仁,李家奎.LPS体外诱导牦牛子宫内膜炎症模型的建立[J].高原农业.2019

[5].刘振东,王瑞,杨建东,王静成.胶质细胞源性神经营养因子体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞的分化[J].中国组织工程研究.2019

[6].王姣杰,安慧娟,单泓,韩小改,别立莉.体外诱导外周血造血干细胞分化为成熟红细胞[J].中国组织工程研究.2019

[7].范曜天,孙劼,夏光亮,赵芳芳,孙华.添加槐花、香蕉花和杭白菊对体外诱导人工瘤胃酸中毒缓解效果的研究[J].动物营养学报.2019

[8].李桂秋,魏影,余治健,陈俊文,钟婉莹.新型四环素药物Eravacycline体外诱导金黄色葡萄球菌耐药16SrRNA基因突变位点分析[J].中国医学创新.2019

[9].王晨宇,张曼玲,姜海滨,金永,赵丽华.猪naive-like胚胎干细胞向神经细胞体外诱导分化[J].南京医科大学学报(自然科学版).2019

[10].梁群,邢金梅,何学斌.缬草萜内酯对体外诱导肝星状细胞增殖及氧化应激反应的影响[J].中成药.2019

论文知识图

向神经样细胞分化的过程需要激...人生长期毛囊毛球部的HE染色所示毛囊结...对各种靶细胞的免疫抑制作用实验用兔脂肪干细胞和PLGA/CS支架(a...肿瘤微环境诱导MDSC表达B7-H3一2固定浓度泰乐菌素诱导下(第1一40天)...

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体外诱导论文_张权,陈恋,常铖,张亚奇,肖翠红
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