海洋来源真菌Aspergillus sp.L1抗MRSA活性次级代谢产物的研究

论文摘要

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）目前已经成为医院院内感染的重要病原菌之一,也成为了严重威胁人类生命健康的多重耐药性病原菌,世界各处都有MRSA感染的出现,且该菌可以在动物、人之间传播。耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）,也是医院院内感染的重要病原菌。由于MRSA和MRSE菌株具有多重耐药性,在临床上很难根治,故寻找新型的结构新颖、活性显著和抗药机制独特的具有抗MRSA、MRSE活性的化合物显得十分迫切。抗MRSA与抗MRSE天然产物的研究也成为了一个重要的课题。微生物具有物种丰富,代谢途径多样等特点,其次生代谢产物已成为前体药物的重要来源,随着研究深入,陆生微生物次生代谢产物的出新率在降低,重复率在增加,人们开始把目光转移到海洋上,海洋来源微生物已经成为一个新的重要的天然产物分离源,目前已经有多种新的海洋微生物来源的天然产物被发现。本实验从我国大亚湾海底沉积物中分离得到10株真菌,采用MRSA和MRSE菌株作为指示菌进行了活性筛选,最终发现了一株具有较强活性的菌株。编号L1,对L1进行了菌种鉴定,表明该菌为烟曲霉属真菌（Aspergillus sp）。对菌株L1进行大发酵,以抗MRSA、MRSE活性为指标,通过正相硅胶柱、Sephadex LH20、大孔吸附树脂、HPLC等手段进行分离。最终分离鉴定得到5个化合物,编号为H3-1（Xanthocillin X monomethylether.）、H3-2（6’,8’-dimethoxy xanthocillin X monomethylether.）、H3-3（xanthocillin X dimethylether）、H4-1（皮甾酮类化合物）、H3G4-1（xanthocillin analogue BU-4707）。其中H3-1、H3-2、H3-3、H3G4-1均显示出抗MRSA活性。其MIC值分别为3.13μg/ml,25μg/ml,0.78μg/ml,0.39μg/ml。上述4个化合物还具有抗MRSE活性,其MIC值分别为:3.13μg/ml,6.25μg/ml,3.13μg/ml,1.57μg/m。针对化合物H4-1进行了培养基单因素的优化,包括碳源、氮源、无机盐离子条件,确定了最佳碳源、氮源、无机盐离子种类以及最适浓度。本论文对筛选后的海洋来源真菌的次生代谢产物进行了研究,共从中分离鉴定出5个化合物,其中四个化合物具有抗MRSA和抗MRSE活性,为新药的开发提供菌种以及化合物资源。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
•   1.1 前言
•   1.2 海洋来源真菌次生代谢产物的研究概况
•     1.2.1 聚酮类化合物
•     1.2.2 生物碱类化合物
•     1.2.3 萜类化合物
•     1.2.4 甾体类化合物
•   1.3 抗MRSA天然产物的研究进展
•     1.3.1 环肽类化合物
•     1.3.2 生物碱类化合物
•     1.3.3 其他类化合物
•   1.4 研究内容
• 第2章 材料与方法
•   2.1 实验仪器、材料与试剂
•     2.1.1 实验仪器
•     2.1.2 实验材料与试剂
•     2.1.3 培养基配置
•     2.1.4 试剂配制
•   2.2 实验方法与实验流程
•     2.2.1 目标菌株筛选
•     2.2.2 目标菌株的鉴定
•   2.3 菌株的发酵培养
•   2.4 发酵产物的提取和分离
•   2.5 结构鉴定
•   2.6 单体化合物抑菌活性测定
• 第3章 实验结果
•   3.1 十株真菌发酵提取物的抑菌活性分析
•   3.2 发酵产物的分离
•   3.3 化合物结构解析
•     3.3.1 化合物H3-1
•     3.3.2 化合物H3-2
•     3.3.3 化合物H3-3
•     3.3.4 化合物H4-4
•     3.3.5 化合物H3G4-4
•   3.4 单体化合物抗菌活性测定
•   3.5 培养基优化
•     3.5.1 含量测定标注曲线的建立
•     3.5.2 碳源、氮源、无机盐种类对H4-1 的产量的影响
•     3.5.3 单因素最适浓度探究
• 第4章 实验结论
• 第5章 实验展望
• 参考文献
• 附录
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 林澈翔

导师: 王立岩,姜兴涛

关键词: 微生物,海洋真菌,次生代谢产物,抗菌活性

来源: 深圳大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 深圳大学

分类号: Q939.9

DOI: 10.27321/d.cnki.gszdu.2019.000544

总页数: 60

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