基因内区论文_陈中标,李飞,李佩婷,邱晓媚,叶健斌

导读:本文包含了基因内区论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:基因,受体,信号,胰岛,腺瘤,转录,疫苗。

基因内区论文文献综述

陈中标,李飞,李佩婷,邱晓媚,叶健斌[1](2016)在《人Notch2受体胞内区基因N2ICD的原核表达、纯化和鉴定》一文中研究指出[目的]构建含Notch2胞内区基因N2ICD的原核重组质粒,并在E.coli中表达。[方法]根据Gen Bank上N2ICD基因序列设计引物,用PCR从真核重组质粒p CMV-Tag4/N2ICD中扩增目的基因,克隆至携带GST标签的pGEX-4T-1原核表达载体中并转化E.coli BL21。异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,收集菌体经反复冻融、溶菌酶破菌、超声破碎后,通过SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的表达形式,表达产物经谷胱甘肽琼脂糖树脂glutathione sepharose 4B纯化并经Western Blot鉴定。[结果]PCR获取了目的基因人N2ICD,并成功构建了重组表达质粒pGEX-4T-1/N2ICD,目的基因在E.coli中成功表达并以部分可溶性形式表达在上清中,纯化后经Western Blot鉴定表达产物分子量在110 k Da。[结论]重组N2ICD在E.coli中成功获得可溶性表达,为研究Notch2受体在细胞信号转导中的作用奠定了基础。(本文来源于《生物技术》期刊2016年04期)

陈中标,叶健斌,梁来妹,杨宜,宁立军[2](2016)在《人Notch受体胞内区基因N2ICD克隆及真核表达》一文中研究指出目的构建真核重组质粒N2ICD/p CMV-Tag4并转染HEK 293T细胞进行表达。方法根据GenBank上Notch2的NICD序列设计引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法从人宫颈癌细胞Hela细胞扩增人Notch2受体胞内区基因(N2ICD),酶切和测序鉴定后克隆至携带FLAG标签的真核表达载体pCMV-Tag4并进行瞬时和稳定转染HEK 293T细胞,荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋白印迹(WB)检测目的蛋白的表达。结果通过RT-PCR克隆获得人N2ICD基因并成功构建重组质粒N2ICD/pCMV-Tag4,目的蛋白N2ICD在HEK 293T细胞中获得表达。结论成功构建稳定表达N2ICD的HEK 293T细胞株,为进一步探讨Notch2受体的功能奠定基础。(本文来源于《中国公共卫生》期刊2016年03期)

孙芳,李玉霞,毛艳,凌焱,张小男[3](2012)在《人Notch受体胞内区基因N2ICD和N3ICD克隆及真核表达体系的构建》一文中研究指出Notch信号通路与多种肿瘤的发生发展密切相关。对该通路中各受体功能的深入研究能够为揭示其致癌作用奠定基础。本研究采用RT-PCR的方法从人宫颈癌细胞系HeLa细胞的cDNA中克隆人Notch2和Notch3受体胞内区基因(N2ICD和N3ICD基因),并构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体N2ICD/pEGFP和N3ICD/pEGFP,将序列正确的重组质粒转染HeLa细胞,显微镜下可见明显的绿色荧光,并定位在细胞核内。Western blotting检测目的蛋白成功融合表达,并能够提高其下游靶基因Hes1的转录活性。(本文来源于《生物技术通报》期刊2012年07期)

车昌燕,张国华,刘力[4](2009)在《人IL-23R胞内区基因的克隆与原核表达》一文中研究指出目的克隆人IL-23R(hIL-23R)胞内区基因,并在大肠杆菌中表达融合蛋白。方法通过PCR获得hIL-23R基因的胞内区片段,克隆至载体pGEX-4T-1中,构建重组原核表达质粒pGEX-4T-1-hIL-23R(I),转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Westernblot进行鉴定。结果hIL-23R胞内区基因的PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析可见约760bp的目的片段。重组原核表达质粒经双酶切及测序证明构建正确。表达的融合蛋白相对分子质量约为55000,在低温(20℃)、低IPTG浓度(0.5mmol/L)诱导条件下能以可溶形式表达,可溶性蛋白的表达量约占菌体可溶性蛋白总量的16.1%,且可被兔抗GST多克隆抗体识别。结论已成功克隆了hIL-23R胞内区基因,并在大肠杆菌中表达了可溶性的GST融合蛋白。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2009年06期)

刘志伟,胡族琼,赵卫,张文炳,龙北国[5](2007)在《SARS冠状病毒M基因膜内区的克隆、表达与鉴定》一文中研究指出目的对SARS冠状病毒M蛋白膜内部分(Mc蛋白)的基因(Mc区)进行克隆、表达及鉴定。方法采用PCR技术从SARS-CoV GD322株M基因全长片段上扩增得到Mc区,克隆至pGEM-T载体。利用引物上的EcoRI/XhoI酶切位点切下Mc区插入至pET-32a(+)表达载体,转化原核表达系统BL21,表达His-融合蛋白,利用SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定。结果扩增的Mc区长度为360bp,重组子经PCR,双酶切和测序鉴定,获得pET-32a(+)/Mc原核表达菌株并可进行高效表达,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot验证为相对分子质量约43000的融合蛋白,与预期理论值相符。结论实现了Mc蛋白的高效表达,为进一步研究SARS冠状病毒Mc蛋白的生物学作用奠定了基础。(本文来源于《热带医学杂志》期刊2007年03期)

季旻珺,刘煜,胡姝颖,张媛媛,朱翔[6](2006)在《胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区与IgGFc段融合基因疫苗的构建及鉴定》一文中研究指出目的:构建及鉴定胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区(mIA-2i)和IgGFc嵌合蛋白的真核表达载体pEGFP-N2/mIA-2i-mIgGFc。方法:实验于2004-09/2005-07在南京医科大学病原生物学系完成。①采用反转录-聚合酶链反应方法从ICR小鼠的脑组织和脾脏中分别扩增胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区(mIA-2i)和IgGFc段(mIgGFc),并引入相应的酶切位点(XhoⅠ/BamHⅠ和BamHⅠ/EcoRI)。②分别将扩增后的片段克隆入pUCm-T质粒,通过XhoⅠ/BamHⅠ双酶切和连接后,获得pUCm-T/mIA-2i-mIgGFc重组质粒。③经过XhoⅠ/EcoRI双酶切后,将融合基因mIA-2i-mIgGFc克隆入真核表达载体pEGFP-N2。通过酶切、聚合酶链反应及插入片段序列测定对重组质粒pEGFP-N2/mIA-2i-mIgGFc进行鉴定。结果:①从ICR鼠的脑组织和脾脏中反转录-聚合酶链反应获得胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区和IgGFc段。②通过基因工程操作,获得重组克隆质粒pUCm-T/mIA-2i和pUCm-T/mIgGFc,并经酶切鉴定克隆成功。③获得重组克隆质粒pUCm-T/mIA-2i-mIgGFc,经聚合酶链反应和双位点酶切鉴定重组成功。④获得重组质粒pEGFP-N2/mIA-2i-mIgGFc和pEGFP-N2/mIA-2i,经聚合酶链反应、酶切及测序鉴定证实特异性片断插入真核表达载体成功。结论:pEGFP-N2/mIA-2i-mIgGFc真核表达载体的构建,为利用胰岛细胞瘤相关蛋白2基因疫苗预防非肥胖性糖尿病小鼠发生自身免疫性糖尿病的研究奠定了基础。(本文来源于《中国临床康复》期刊2006年20期)

陈志卫[7](2003)在《遗传规划的基因内区改进及其在单机调度中的应用》一文中研究指出遗传规划(Genetic programming,GP)是一种新型的搜索寻优技术,它仿效生物界的遗传和进化,根据优胜劣汰的原则,借助复制、交换、突变等操作,逐步逼近最优解。 本文首先介绍了遗传规划的基本算法和理论,系统总结了国内外的研究现状,并指出了遗传规划的发展动向。结合符号回归和公式发现对遗传规划的收敛性和基因内区等进行了研究,分析了伪收敛现象产生的原因,并提出了一些抑制方法。论述了基因内区对遗传规划收敛性和收敛速度的影响,通过实例测试论述了复制和交换等遗传操作对基因内区的作用,提出了改进的交换方法—单亲交换方法,并设计了具体实现方法。 生产调度正成为进化计算方法的一个主要应用领域。本文研究了采用遗传规划求解单机拖期调度问题的方法,目前有两种研究方法:一是通过遗传规划理论组合调度规则作为表示排列问题的间接方法。二是采用传统的遗传规划理论作为求解单机拖期调度问题的规则。遗传规划求解生产调度问题虽然还很初步,有待深入研究,但这方面的研究扩大了遗传规划的应用范围。(本文来源于《浙江工业大学》期刊2003-05-01)

卢少华,云庆夏,夏安邦[8](2003)在《影响遗传规划基因内区的因素分析》一文中研究指出通过众多的试验和分析 ,证实遗传规划的个体中存在基因内区 ,它对进化的收敛既有积极作用也有消极作用 .文中通过对有关遗传操作方法和参数的研究 ,定性地分析了它们对基因内区的影响 ,并指出抑制基因内区消极作用的途径 .(本文来源于《系统工程理论与实践》期刊2003年02期)

云庆夏,卢少华[9](2002)在《遗传规划中的基因内区研究》一文中研究指出利用试验证实遗传规划的个体中存在基因内区。它们是冗余的表达式 ,附加在算法树上 ,使个体变得臃肿 ,但对实际的输出结果没有影响。它对进化的收敛既有积极作用 ,也有消极作用。通过对遗传操作方法和参数的研究 ,揭示出基因内区发生的规律 ,并提出扬长避短的途径。(本文来源于《控制与决策》期刊2002年06期)

王佑民,黄志明,曹筱佩,程桦,傅祖植[10](2001)在《含长细胞内区大鼠瘦素受体基因片段的cDNA克隆》一文中研究指出肥胖症的分子发病机制多年来一直不清楚 ,1994年瘦素基因和 1995年瘦素受体 (OBR)基因的成功克隆〔1,2〕,使肥胖症的分子发病机制研究进入了新的时代。目前已知瘦素具有降低食欲、增加能量消耗、减轻体重作用 ,并参与糖、脂肪的代谢调节 ;OBR在体(本文来源于《中华内分泌代谢杂志》期刊2001年04期)

基因内区论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的构建真核重组质粒N2ICD/p CMV-Tag4并转染HEK 293T细胞进行表达。方法根据GenBank上Notch2的NICD序列设计引物,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法从人宫颈癌细胞Hela细胞扩增人Notch2受体胞内区基因(N2ICD),酶切和测序鉴定后克隆至携带FLAG标签的真核表达载体pCMV-Tag4并进行瞬时和稳定转染HEK 293T细胞,荧光定量PCR(Q-PCR)和蛋白印迹(WB)检测目的蛋白的表达。结果通过RT-PCR克隆获得人N2ICD基因并成功构建重组质粒N2ICD/pCMV-Tag4,目的蛋白N2ICD在HEK 293T细胞中获得表达。结论成功构建稳定表达N2ICD的HEK 293T细胞株,为进一步探讨Notch2受体的功能奠定基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

基因内区论文参考文献

[1].陈中标,李飞,李佩婷,邱晓媚,叶健斌.人Notch2受体胞内区基因N2ICD的原核表达、纯化和鉴定[J].生物技术.2016

[2].陈中标,叶健斌,梁来妹,杨宜,宁立军.人Notch受体胞内区基因N2ICD克隆及真核表达[J].中国公共卫生.2016

[3].孙芳,李玉霞,毛艳,凌焱,张小男.人Notch受体胞内区基因N2ICD和N3ICD克隆及真核表达体系的构建[J].生物技术通报.2012

[4].车昌燕,张国华,刘力.人IL-23R胞内区基因的克隆与原核表达[J].中国生物制品学杂志.2009

[5].刘志伟,胡族琼,赵卫,张文炳,龙北国.SARS冠状病毒M基因膜内区的克隆、表达与鉴定[J].热带医学杂志.2007

[6].季旻珺,刘煜,胡姝颖,张媛媛,朱翔.胰岛细胞瘤相关蛋白2胞内区与IgGFc段融合基因疫苗的构建及鉴定[J].中国临床康复.2006

[7].陈志卫.遗传规划的基因内区改进及其在单机调度中的应用[D].浙江工业大学.2003

[8].卢少华,云庆夏,夏安邦.影响遗传规划基因内区的因素分析[J].系统工程理论与实践.2003

[9].云庆夏,卢少华.遗传规划中的基因内区研究[J].控制与决策.2002

[10].王佑民,黄志明,曹筱佩,程桦,傅祖植.含长细胞内区大鼠瘦素受体基因片段的cDNA克隆[J].中华内分泌代谢杂志.2001

论文知识图

晶芯分枝杆菌菌种鉴定微阵列芯片的探...大豆疫霉细胞质苏氨酰-tRNA合成酶PCR...个月pt108b斑马鱼延视网膜前部-后部...转录组测序技术流程交换概率对基因内区的影响复制概率对基因内区的影响

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

基因内区论文_陈中标,李飞,李佩婷,邱晓媚,叶健斌
下载Doc文档

猜你喜欢