去血清饥饿条件下肌卫星细胞增殖及自噬蛋白LC3、Beclin1的表达

论文摘要

背景:自噬可促进低氧环境下肌卫星细胞的存活,然而基于自噬有明显的时效性,不同时间的自噬水平与肌卫星细胞增殖能力间的关系如何未见探讨。目的:探讨不同时间去血清饥饿对大鼠肌卫星细胞增殖能力及自噬微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3）及Beclin1表达的变化。方法:原代分离培养雄性SD大鼠（广州中医药大学动物实验中心提供,体质量约120 g）多裂肌卫星细胞,取第3代细胞,培养至对数生长期后,分别设置正常血清组（体积分数10%胎牛血清）、空白血清（仅含培养基,无胎牛血清）6 h组、空白血清12 h组、空白血清24 h组,CCK-8检测各组细胞的增殖情况,并采用Western-blot法和RT-PCR法检测LC3及Beclin1蛋白及基因的表达。结果与结论:（1）细胞增殖能力:空白血清诱导12 h后细胞增殖能力较正常血清组及诱导6 h时下降（P <0.01）,诱导24h后细胞增殖能力较诱导12h下降（P<0.05）;（2）LC3及Beclin1蛋白及基因的表达:空白血清诱导6 h后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及Beclin1蛋白及基因的表达较正常血清组明显升高（P <0.05）,诱导12 h及诱导24 h后LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达较诱导6 h时明显升高（P <0.01）,Beclin1的表达较诱导6 h时升高（P <0.05）,LC3及Beclin1基因的表达较6 h均升高（P <0.05）;（3）结果证实,去血清饥饿可以诱导肌卫星细胞发生自噬,自噬在去血清早期（12 h内）可保护细胞的增殖能力,12 h后细胞可出现过度自噬,不利于细胞的增殖。

论文目录

• 文章快速阅读:
• 文题释义:
• 0引言Introduction
• 1 材料和方法Materials and methods
•   1.1 设计
•   1.2 时间及地点
•   1.3 材料
•     1.3.1 实验用主要试剂
•     1.3.2实验用主要仪器
•   1.4 实验方法
•     1.4.1 细胞培养及干预
•     1.4.2 CCK-8检测各组细胞增殖情况
•     1.4.3 Western-blot法检测各组细胞LC3及Beclin1蛋白的表达
•     1.4.4 RT-PCR检测各组细胞LC3
•   1.5 主要观察指标
•   1.6 统计学分析
• 2 结果Results
•   2.1 各组细胞的增殖变化
•   2.2 各组细胞LC3Ⅰ、LC3Ⅱ以及Beclin1蛋白的表达变化
•   2.3 各组细胞LC3及Beclin1 mRNA表达
• 3 讨论Discussion

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘通,于佳妮,刘悦,陈欢,邝伟川,王小寅,张淑静,江烨,邱晓佳,文希

关键词: 骨骼,自噬,组织工程,去血清,饥饿,肌卫星细胞,增殖,大鼠,去血清饥饿条件,过度自噬,肌卫星细胞自噬

来源: 中国组织工程研究 2019年11期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 广东省第二中医院针灸康复科,广东省中医院康复科,南京医科大学第一附属医院针灸科,北京中医药大学中医学院

基金: 国家自然科学基金青年基金(81704179),项目负责人:刘通,国家自然科学基金青年基金(81503641),项目负责人:陈欢~~

分类号: R329.2

页码: 1657-1661

总页数: 5

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