猪腹膜间皮细胞的培养鉴定及副猪嗜血杆菌感染模型的构建

猪腹膜间皮细胞的培养鉴定及副猪嗜血杆菌感染模型的构建

论文摘要

[目的]体外分离培养猪腹膜间皮细胞,建立副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞的体外模型,研究副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞后引起的细胞炎症反应,筛选副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞的最佳感染时间和最佳感染比。[方法]从猪腹膜中分离猪腹膜间皮细胞,进行体外培养和鉴定。间皮细胞经传代培养,使用梯度浓度的副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞,于不同时间点收集细胞上清液,提取间皮细胞的RNA。采用ELISA法测定细胞培养上清液中炎性因子(IL-6、TNF-α和IL-1β)的含量;Q-RT PCR法测定细胞炎性因子(IL-6、TNF-α和IL-1β)的mRNA表达情况。[结果]体外培养的猪腹膜间皮细胞,经免疫组化鉴定确认抗波形蛋白抗体(Vim)、抗细胞角蛋白抗体(PCK)呈阳性,抗白细胞CD45抗体(CD45)、抗第Ⅷ因子相关抗体(F8)呈阴性,确认为猪腹膜间皮细胞。副猪嗜血杆菌感染能极显著上调炎性因子的mRNA表达水平,不同感染时间与不同感染比对猪腹膜间皮细胞的刺激反应不同,在6-20h之间随时间和感染比增加呈上升趋势。[结论]确定了副猪嗜血杆菌感染猪腹膜间皮细胞的最佳感染时间和最佳感染比,为研究副猪嗜血杆菌致腹膜炎症的作用机制提供了模型。

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文章来源

类型: 国内会议

作者: 徐健峰,赵文华,刘宇,邱银生

关键词: 猪腹膜间皮细胞,副猪嗜血杆菌,炎性因子

来源: 中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会 2019-10-13

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 武汉轻工大学动物科学与营养工程学院

分类号: S852.61

DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.034430

页码: 46-47

总页数: 2

文件大小: 148k

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