Ⅲ型分泌系统2转录因子YqeI对禽致病性大肠杆菌生物被膜调控机制的研究

论文摘要

生物被膜是导致细菌产生耐药性的主要原因之一,本文通过探究Ⅲ型分泌系统2(ETT2)转录调节因子YqeI对禽致病性大肠杆菌生物被膜形成的影响及其影响机制,为探究ETT2对禽致病性大肠杆菌致病机制的影响提供研究基础。利用Red同源重组的方法构建yqeI基因缺失株,并通过检测野生株与缺失株生物被膜形成能力、结合转录组学测序及荧光定量检测生物被膜基因表达量等,探究转录调节因子YqeI对禽致病性大肠杆菌生物被膜形成能力的影响。结果显示成功构建了yqeI基因缺失株,且yqeI的缺失并不影响生长曲线,但生物被膜形成能力显著下降,且相关生物被膜基因转录量显著下调。禽致病性大肠杆菌ETT2转录调节因子YqeI显著影响了禽致病性大肠杆菌生物被膜形成能力,为从ETT2及yqeI的角度发掘潜在的调控网络提供依据。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 禽致病性大肠杆菌中yqeI与E. coli O157:H7序列比对
•   1.3 AE81 yqeI缺失株AE81△YqeI及其回复株AE81-C-YqeI的构建
•   1.4 AE81、AE81△YqeI缺失株和AE81-C-YqeI回复株生长曲线的测定
•   1.5 AE81、AE81△YqeI缺失株和AE81-C-YqeI回复株生物被膜成膜能力的检测
•   1.6 AE81、AE81△YqeI缺失株和AE81-C-YqeI回复株生物被膜扫描电镜的观察
•   1.7 AE81和AE81△YqeI缺失株转录组学测序
•     1.7.1 建库测序流程
•     1.7.2 信息分析流程
•   1.8 荧光定量PCR检测生物被膜相关基因转录量
• 2 结 果
•   2.1 YqeI在禽致病性大肠杆菌与E. coli O157:H7中序列比对及功能预测
•   2.2 禽致病性大肠杆菌AE81△YqeI缺失株和AE81-C-YqeI回复株的鉴定
•   2.3 AE81、AE81△YqeI缺失株和AE81-C-YqeI回复株生长曲线的测定
•   2.4 AE81、AE81△YqeI缺失株和AE81-C-YqeI回复株生物被膜成膜能力
•   2.5 AE81、AE81△YqeI缺失株和AE81-C-YqeI回复株生物被膜扫描电镜观察
•   2.6 转录组学差异基因分析
•   2.7 生物被膜相关基因转录量
• 3 讨 论
• 4 结 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 肖亚婷,傅丹丹,MUHAMMAD AKMAL RAHEEM,薛媚,谷一,涂健,宋祥军,邵颖,祁克宗

关键词: 禽致病性大肠杆菌,型分泌系统,转录因子,生物被膜

来源: 畜牧兽医学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 安徽农业大学兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室

基金: 国家自然科学基金(31772707,31972644),安徽农业大学2019年度研究生创新基金(2019ysj-32)

分类号: S852.612

页码: 2488-2497

总页数: 10

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