兰量园1郭超2杨斌3
(1广西医科大学08级研2班广西南宁530021)
(2广西医科大学09级研6班广西南宁530021)
(3广西医科大学药学院广西南宁530021)
【中图分类号】R697.3【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）7-0123-02
【摘要】目的探讨三金片对慢性非细菌性前列腺炎的治疗作用及机制。方法将0.1ml1%角叉菜胶注入SD雄性大鼠前列腺左侧造成非细菌性前列腺炎大鼠模型，以注射生理盐水为假手术组，前列康片为阳性药物，观察三金片(高、中、低剂量组)对模型大鼠前列腺/体重系数比、前列腺中SOD、MDA、ACP的含量及前列腺组织形态的影响。结果三金片具有减轻前列腺组织的炎症反应，减少纤维化程度，减少增生，提高SOD活力值，降低组织中ACP含量的作用。结论三金片对前列腺炎的治疗作用可能与其改善氧化应激状态、降低ACP等因素相关。
【关键词】慢性非细菌性前列腺炎SODMDAACP
慢性非细菌性前列腺炎（Chronicnon-bacterialprostatitis，CNP）是泌尿系统常见病、多发病，其发病机制复杂。目前认为主要发病的机制有：微生物感染、自身免疫、物理和化学因素、前列腺内尿液返流、精神心理因素、氧化应激和锌的作用[1]。三金片系桂林三金集团研制生产的中药制剂，主要成分有海金沙、金樱根、金刚刺等，有抗菌，抗炎，消肿，清热，利尿，镇痛，抗氧自由基、提高机体免疫力等药理作用，在中医上具有清热解毒、利湿通淋、补虚益肾等功效。目前在临床上已经使用三金片作为治疗CNP的药物，疗效显著，但其具体作用机制尚无报道，本课题即以该药治疗CNP的机制作为切入点进行研究。
1实验材料
1.1实验动物
健康雄性SPFSD大鼠60只，体重200～300g，广西医科大学实验动物中心提供，生产许可证：SCXK桂2006－0005。
1.2药品与试剂
三金片，购自桂林三金药业股份有限公司，批号：0911018；普乐安片（前列康），浙江康恩贝制药股份有限公司，批号：090733；角叉菜胶，购自sigma公司；丙二醛（MDA）测定试剂盒，购自南京建成生物工程研究所，批号：20100804；超氧化物歧化酶（SOD）测试盒，购自南京建成生物工程研究所，批号：20100809；酸性磷酸酶（ACP）测定试剂盒，购自南京建成生物工程研究所，批号：20100811。
1.3主要仪器
雷勃ThermoMultiskanAscent酶标仪
2实验方法
2.1大鼠慢性非细菌性前列腺炎模型的建立
随机抽取10只SD大鼠作为生理盐水对照组，其余50只为实验组。10％水合氯醛麻醉大鼠，切开腹腔，轻轻挑起膀胱，暴露附于膀胱颈外的前列腺，实验组大鼠从左侧腹叶注入1%角叉菜胶生理盐水溶液0.1ml，生理盐水（NS）对照组注入生理盐水0.1ml，缝合腹壁肌肉皮肤，放回鼠笼，自由饮食。
2.2分组与给药
实验组在造模成功后随机分为模型对照组、前列康（阳性对照）组、三金片高剂量组、三金片中剂量组、三金片低剂量组5组。造模7天后给药。三金片高、中、低剂量组给药剂量分别为1.05g/100g、0.525g/100g、0.2625g/100g，为人用剂量的5、10、20倍。前列康组给药剂量为0.09g/100g，为人用剂量的10倍。生理盐水对照组和模型对照组给予相同剂量的蒸馏水。以上各组均灌胃给药，每日1次。分别于给药第1、7、14d称大鼠体重。
2.3各组大鼠前列腺/体重系数比
给药14d后处死大鼠，称体重；取前列腺组织，称重。计算各组大鼠前列腺/体重比值。
2.4大鼠前列腺组织病理形态学观察
给药14d后处死大鼠，取左侧前列腺，10%福尔马林固定后常规HE染色。
2.5大鼠血清中SOD、MDA、ACP的测定
给药14d后乙醚麻醉大鼠，心脏取血，离心，取血清，按照试剂盒说明书操作测定大鼠血清中SOD、MDA、ACP的含量。
2.6统计学处理
应用SPSS13.0软件进行统计分析，实验结果采用均数±标准差(χ-±S)表示，采用t检验进行分析。
3结果
3.1慢性非细菌性前列腺炎大鼠前列腺/体重系数比较。
实验数据显示，模型组脏器系数与生理盐水对照组有明显区别，说明模型组大鼠前列腺有增生，造模成功。三金高、低剂量组与模型组系数比有统计学差别，中剂量组无差别。这说明三金片对前列腺增生有抑制作用，疗效没有剂量依赖性。
3.2模型大鼠前列腺组织的病理改变
病理观察显示，模型组大鼠前列腺组织表现为慢性炎症的病理变化。正常组大鼠前列腺组织柔软、红润、有光泽，与周围组织无粘连，而模型组大鼠前列腺腺体普遍与周围组织粘连，腺体呈暗红色或棕黄色，质稍硬，或有明显的硬结。光镜下可见正常大鼠前列腺上皮细胞多为立方或柱状，腺腔形态不一，相对有规则，间质含少量平滑肌细胞或成纤维细胞，无炎症细胞浸润（见图1）。模型组大鼠前列腺上皮萎缩、脱落，或增生，腺上皮变为立方或扁平状，部分基底膜被破坏；纤维组织增生明显，大量炎性细胞浸润，多为淋巴细胞及单核细胞。部分腺体扩张，个别切片可见部分导管损毁(见图2)。而前列康组大鼠前列腺组织间质水肿程度减轻，淋巴细胞浸润相对减少（见图3）。三金片中剂量组大鼠前列腺组织间质水肿程度减轻，有散在淋巴细胞浸润，炎症减轻（见图4）。
图3前列康组大鼠前列腺(间质图4三金中剂量组大鼠前列腺(间质轻度水肿，淋巴细胞浸润)轻度水肿，散在淋巴细胞浸润)
3.3实验大鼠血清中SOD、MDA、ACP含量变化，结果见表2。
从结果可知，模型组SOD活力值相对于NS组显著下降（P<0.01），三金高、低剂量组SOD活力值虽有所提高，但与模型组比较无统计学差异；三金中剂量组对SOD活力有明显提升，与模型组比较有统计学意义（P<0.05）。三金片各剂量组对血清中MDA含量无明显影响，统计学上无差别。三金高剂量能明显降低前列腺大鼠血清中的ACP含量（P<0.05），中、低剂量对此无明显影响。
4讨论
目前，中医药治疗慢性前列腺炎的机制可从以下几个方面入手：抗感染、抗炎、抗纤维化、改善微循环；改善尿流动力学；免疫调节机制；调节前列腺微量元素Zn水平的作用[2]。近年来，病因研究中氧化应激学说受到人们的关注。前列腺炎病人体内可产生过多的ROS，损害细胞的功能，破坏细胞的内环境，攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化反应，并因此形成脂质过氧化物，如MDA等毒性产物[3]。而在许多抗氧化物质中，SOD起着重要的作用，它可以催化O—2形成H2O2的歧化反应，而H2O2在过氧化物酶的作用下，还原为无毒性的H2O，使人体内O—2•清除。
本文结果显示，模型组大鼠前列腺组织中MDA含量高于NS对照组，SOD含量明显低于NS对照组，而经三金片治疗后，CNP大鼠血清中SOD活力值增大，对MDA含量无明显影响。这提示三金片有一定的抗氧化作用，能提高体内抗氧化酶活性水平，但不能抑制脂质过氧化物MDA的生成。
酸性磷酸酶(AcidPhosphatase，ACP)是溶酶体的标志酶，血清中ACP约有2/3来自前列腺。血清中酸性磷酸酶水平可以部分显示前列腺的生理状态，因此常作为判定前列腺功能的指标。1989年，mukhopadhyay[4]证实ACP能够抑制NK细胞和中性粒细胞的功能。朱云凤等[5]认为ACP具有抑制巨噬细胞的吞噬功能和产生TNF—α的能力，且抑制T细胞产生IFN一γ。
在本次实验中，CNP大鼠血清ACP活性明显高于NS对照组，说明炎症使前列腺腺体细胞遭破坏后释放了大量ACP，使血清ACP活性增高。CNP大鼠经三金片治疗后，高剂量明显降低前列腺大鼠血清中ACP含量的作用（P<0.05），且组织炎症减轻，这可能是三金片能够对抗前列腺炎症的重要机理之一。
从病理切片结果可证明，三金片能够在一定程度上减轻炎症、阻止组织纤维化，抑制组织增生。
综上所述，三金片治疗前列腺炎的其机制可能与抗纤维化、抗炎、抗氧化、降低体内ACP含量有关。
参考文献
[1]屠凌岚，郑高利.慢性非细菌性前列腺炎机制及药物治疗研究进展)[J].浙江实用医学.2010(01).
[2]蒋毅.中医药治疗慢性前列腺炎机理研究进展[J].中华男科学.2003，9（5），385-388.
[3]NICKELJC，DOWNEYJ，JOHNSTONB，etal．Predictorsofpatientresponsetoantibiotictherapyforthechronicprostatitis／chronicpelvicpainsyndrome：aprospectivemulticenterclinicaltrial[J]．JUrol，2001，165：1539-1544．
[4]Mukhopadhyay，etal．Inhibitionofneutrophilandnaturalkillercellfunctionbyhumanseminalfluidacidphosphatase．CllnCheraAcre1989；182(1).31
[5]朱云凤，陈文洁，高惠宝，陈丽萍.人类精液中酸性磷酸酶的研究Ⅱ酸性磷酸酶对巨噬细胞的免疫抑制作用[J].男性学杂志.1992.6（3）.143-146.
[6]郭应禄，李宏军.前列腺炎[M].人民军医出版社，2007年3月第2版：100.