导读:本文包含了热激蛋白基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,基因,高温,分子,抗药性,特异性,带鱼。
热激蛋白基因论文文献综述
刘丽丽,王晓雯,朱建亚,张蓉,朱华[1]（2019）在《虎皮鱼热激蛋白PtHsp70基因序列与低温表达分析》一文中研究指出通过同源克隆和cDNA末端快速克隆技术扩增获得狭温热带鱼类虎皮鱼热激蛋白70(PtHsp70)基因的cDNA序列,BLAST比对分析基因序列同源性,预测其编码氨基酸序列和结构,实时荧光定量PCR技术分析虎皮鱼PtHsp70基因组织特异性表达谱和低温胁迫下PtHsp70基因的表达模式。研究结果表明,PtHsp70基因cDNA序列全长2317 bp,其中5′非编码区120 bp,3′非编码区266 bp,编码区1932 bp,对应的开放阅读框为121～2052 bp,预测编码643个氨基酸。PtHsp70基因mRNA在成年虎皮鱼不同组织中表达水平依次为肝脏>肌肉>鳃>脑,其中肝脏PtHsp70基因本底表达水平显着高于其他组织(P<0.01),表明其在肝脏中具有重要的生物学功能。而随温度降低,肝脏PtHsp70基因表达水平呈先降后升的趋势,表明肝脏PtHsp70基因参与虎皮鱼应对低温胁迫的过程;随温度降低,虎皮鱼脑、鳃和肌肉组织PtHsp70基因mRNA水平显着上调(P<0.01),说明低温胁迫诱导PtHsp70基因mRNA表达。本研究克隆并鉴定了PtHsp70基因序列和组织表达谱,分析了低温胁迫下PtHsp70基因表达模式,研究结果显示,狭温热带鱼类虎皮鱼的PtHsp70基因具有组织特异性和温度诱导型表达特征。研究发现,PtHsp70基因在响应低温胁迫过程中具有重要作用,具有作为虎皮鱼低温胁迫分子标志物的潜能。(本文来源于《水产科学》期刊2019年06期）
霍志家,周晓榕,谭瑶,庞保平,单艳敏[2]（2019）在《温度胁迫下沙葱萤叶甲小热激蛋白基因GdHsp20.6的克隆及表达分析（英文）》一文中研究指出为明确小热激蛋白在沙葱萤叶甲Galeruca daurica应对温度胁迫中的作用,采用PCR方法克隆沙葱萤叶甲小热激蛋白基因Hsp20(GdHsp20.6)完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,应用在线软件对GdHsp20.6基因进行生物信息学分析,通过原核表达技术诱导表达及纯化其编码蛋白,并通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术分析不同温度胁迫下GdHsp20.6基因的表达量。结果显示,GdHsp20.6基因ORF序列长度为543 bp,编码180个氨基酸,预测分子量为20.6 kD,无跨膜区和信号肽。GdHsp20.6氨基酸序列有高度保守的α-结构域。GdHsp20.6氨基酸序列与其它鞘翅目昆虫的Hsp20氨基酸序列有较高的一致性,其中与花绒寄甲Dastarcus helophoroides的Hsp20.99氨基酸序列的一致性最高,为63%。GdHsp20.6基因在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)细胞系中成功表达,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导后GdHsp20.6蛋白成功表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western-blot分析表明融合蛋白大小与预测大小一致,并纯化获得了纯度较高的目的蛋白GdHsp20.6。低温(-10～5℃)和高温(35～40℃)处理1 h以及处理后25℃恢复30 min均能诱导GdHsp20.6基因表达上调,并且0℃处理30～120 min也能诱导GdHsp20.6基因表达上调。表明GdHsp20.6基因在沙葱萤叶甲应对低温和高温胁迫中可能起着重要作用。(本文来源于《植物保护学报》期刊2019年04期）
胡艳平,周扬,杨春,廖道龙,朱白婢[3]（2019）在《南瓜热激蛋白相关基因CmHSP70-5的克隆和高温胁迫下的表达分析》一文中研究指出基于南瓜基因组序列,采用PCR的方法从南瓜cDNA中克隆1个热激蛋白相关基因,命名为CmHSP70-5,采用生物信息学方法分析该基因编码的蛋白与其同源蛋白的系统发育关系,利用荧光定量PCR研究南瓜幼苗在高温胁迫下CmHSP70-5基因的表达量。结果表明:CmHSP70-5基因全长1 953 bp,其编码的CmHSP70-5蛋白与拟南芥AtHSP70-5的亲缘关系最近。未经高温处理时CmHSP70-5基因在根中的表达量要显着高于茎和叶。在高温胁迫下,根、茎、叶中CmHSP70-5基因均呈现上调表达,均在处理后3 h表达量达到最大,说明CmHSP70-5基因的表达与南瓜高温胁迫有关。(本文来源于《中国蔬菜》期刊2019年08期）
郭虹霞,王创云,赵丽,王陆军,张丽光[4]（2019）在《水稻中2个小分子热激蛋白基因启动子的序列分析及功能鉴定》一文中研究指出小分子热激蛋白(small heat shock proteins, sHSP),作为一种分子伴侣,在植物逆境胁迫响应中发挥着重要的作用。本研究克隆了水稻中2个编码小分子热激蛋白的基因 Os16.9A和 Os16.9B, Os16.9A和 Os16.9B编码的150个氨基酸,相似性高达99%。 Os16.9A和 Os16.9B的转录方向相反,2个基因的起始密码之间的距离为2.6 kb,它们的启动子均含有CAAT-box、TATA-box、GATA-box以及与热激等胁迫应答有关的顺式作用元件HSE和ACGT aterd1; Os16.9A的启动子还包含响应冷、干旱应答的顺式作用元件LTRE,这些顺式作用元件呈不对称分布,推测这2个基因间的序列具有双向启动子的功能,且这2个基因可能受胁迫诱导表达。该研究将为进一步研究水稻 Os16.9A和 Os16.9B基因的表达调控及其功能提供参考。(本文来源于《西北农业学报》期刊2019年07期）
药欣荣,高巍,张金霞,常明昌,黄晨阳[5]（2019）在《高温胁迫下糙皮侧耳胞内钙离子对热激蛋白基因表达的调控》一文中研究指出以糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株CCMSSC00389为材料,研究高温胁迫(40℃、120 min)下钙离子的响应及其对热激蛋白的调控。在高温胁迫条件下,在培养基中添加胞内钙离子螯合剂、胞外钙离子螯合剂、钙调蛋白抑制剂、质膜钙通道抑制剂、叁磷酸肌醇受体拮抗剂,利用钙离子特异性荧光探针检测菌丝体胞内钙离子含量,采用荧光定量PCR检测热激蛋白的基因表达量。结果表明,高温胁迫促进胞内钙离子浓度升高,增加Hsp60、Grp78、Hsp90、Hsp104等4种热激蛋白的基因表达量;培养基中添加钙离子螯合剂或抑制剂会降低胞内钙离子浓度,抑制这些热激蛋白的基因表达。研究结果表明高温胁迫会诱导糙皮侧耳胞内钙离子浓度升高,参与信号转导,从而调控热激蛋白的表达来缓解高温胁迫引起的伤害。(本文来源于《食用菌学报》期刊2019年02期）
杨雅萍[6]（2019）在《叁色堇小分子热激蛋白基因克隆及表达分析》一文中研究指出叁色堇(Viola tricolor)花色丰富、花期长且耐寒,为世界知名的花坛花卉。但叁色堇忌酷热,较难适应我国夏季高温气候条件,导致夏季育苗难、观赏期缩短。发掘耐热基因对了解其热响应机制具有重要意义。热激蛋白(HSP)是热响应蛋白的重要组成部分,小分子热激蛋白(sHSP)是热激蛋白家族最重要的蛋白之一。本试验以叁色堇耐热自交系DFM-16在42℃热激处理1 h、2 h的转录组数据为背景,为了研究热胁迫下不同材料在不同时间段的表达情况,对叁色堇小分子热激蛋白基因家族进行定量及序列分析,为进一步了解叁色堇小分子热激蛋白基因的结构及功能对其进行克隆及表达载体构建。研究结果如下:1.基于叁色堇热胁迫转录组分析结果,筛选出15个sHSP基因。采用实时荧光定量PCR分别对15个sHSP基因在2份材料42℃处理1 h,2 h,6 h,12 h表达情况进行了分析。结果表明,15个sHSP基因均受热胁迫诱导,为叁色堇热响应基因。耐热材料DFM-16在热激下的转录水平和对照相比表达最高峰主要集中在1 h和12 h,12 h仍然无明显回落趋势。热敏材料08H在热激下的转录水平和对照相比表达最高峰主要集中在6 h大多数基因在12 h有明显回落。因此DFM-16在热激下sHSP基因的转录更迅速大量累积需要时间短,且持续表达水平比在08H中更持久,因此我们可以推测DFM-16相对于08H更耐热,可能是受小分子热激蛋白转录水平的影响。同一个基因在不同品种中表达模式相同的只有VtHSP17-2和VtHSP22-1其余13个基因在不同叁色堇材料中的表达模式均不相同,说明叁色堇小分子热激蛋白家族基因在不同植物材料中的表达有很高的特异性,这与之前在其他物种上的研究一致。生物信息学分析表明,11个可以检索到完整的开放阅读框(ORF),属于亲水蛋白非分泌蛋白,具多个磷酸化位点。6个叁色堇sHSP基因(VtHSP17.6、VtHSP17-1、VtHSP17-2、VtHSP17.8、VtHSP17.9-1、VtHSP17.9-2)属于细胞质家族,3个(VtHSP24、VtHSP26.3、VtHSP26.4-2)属于叶绿体家族,2个(VtHSP13、VtHSP26.4-1)属于线粒体家族。2.利用RACE技术,从耐热自交系DFM-16中克隆到了3个sHSP基因(VtHSP18、VtHSP13.2和VtHSP17.5),从热敏材料08H中克隆到1个sHSP基因(H-VtHSP17.6)。VtHSP17.5、H-VtHSP17.6为同源基因相似率为94.56%,没有在08H中克隆到VtHSP18和VtHSP13.2以及其同源序列,可能由于启动子的突变或者转录因子无法诱导,导致这两个基因在08H中没有表达或者表达量很低,因此我们推测VtHSP18和VtHSP13.2在热响应机制中有重要作用。4个蛋白均为亲水性非分泌蛋白蛋白,含有多个磷酸化位点。sHSP基因家族的系统发育分析结果显示叁色堇VtHSP13.2属细胞质Ⅶ(CⅦ)亚类;VtHSP18属细胞质Ⅰ亚类(CⅠ);VtHSP17.5、H-VtHSP17.6叶绿体家族(CP)。根据功能进化树结果推测VtHSP18、VtHSP17.5、H-VtHSP17.6也具有响应高温胁迫的功能,可以提高植物的耐热性;VtHSP13.2具有多重诱导,除提高植物耐高温能力外,还可以提高植物耐低温及盐碱能力。3.利用pJIBIA163-1300载体,通过双酶切法构建VtHSP18超量表达载体,为进一步研究叁色堇小热激蛋白VtHSP18证奠定了基础。(本文来源于《河南科技学院》期刊2019-06-01）
牛杨莉[7]（2019）在《叁色堇热激蛋白70（VtHSP70）基因克隆及热胁迫下应答分析》一文中研究指出叁色堇为堇菜科堇菜属多年生草本观赏花卉,但多数叁色堇品种不耐高温,严重制约了叁色堇的应用,所以研究叁色堇的抗热机制对于叁色堇的应用及耐热新品种选育具有重要意义。本研究基于叁色堇热激转录组数据库,筛选了16个高温条件下表达显着差异的VtHSP70基因。本研究以耐热叁色堇材料DFM-16和热敏材料08H为研究对象,研究内容如下:(1)对16个VtHSP70基因的DNA片段进行PCR验证,获得14个与转录组结果吻合的基因。采用real-time PCR技术分析了DFM-16和08H两个材料中14个VtHSP70基因在室温条件下和42℃热激1 h、2 h、6 h、12 h的表达水平。结果显示:随着热胁迫时间增长,8个基因(VtHSP70-2、VtHSP70-4、VtHSP70-5、VtHSP70-8、VtHSP70-11、VtHSP70-14、VtHSP70-15、VtHSP70-16)的表达水平在耐热叁色堇材料DFM-16中一直高于热敏材料08H,其中,VtHSP70-16基因在08H材料中不受高温诱导,但在DFM-16材料中热胁迫下表达水平显着增高;4个基因(VtHSP70-3、VtHSP70-6、VtHSP70-9、VtHSP70-13)在08H材料中短暂地高于DFM-16材料。从热胁迫后基因诱导表达的程度来看,VtHSP70-6基因在两份材料中热激处理2 h时的表达量达到最高,但DFM-16中达到对照的6554.2倍,08H材料达到对照的4513.0倍,VtHSP70-15基因在08H材料中热激处理1 h时的表达量仅为对照的0.36倍,DFM-16材料中为对照的17.75倍,表明VtHSP70基因的表达水平与叁色堇的耐热性呈正相关。(2)通过RACE技术对14个VtHSP70基因进行了全长序列克隆,最终获得了3个基因的全长,分别为VtHSP70-4,VtHSP70-8和VtHSP70-16。其中DFM-16和08H中的VtHSP70-8基因全长,序列长度分别为2275 bp和2346 bp;08H材料中VtHSP70-4基因全长,序列长度为1749 bp;以及DFM-16和08H材料中的VtHSP70-16基因全长,序列长度均为2042 bp。生物信息学分析结果显示:3个基因预测编码的蛋白均为亲水性蛋白;3个基因推测的氨基酸序列比对相似性为74.24%,表明VtHSP70基因高度保守。(3)对VtHSP70-16基因的cDNA和gDNA进行PCR扩增,序列分析显示,两种材料中的VtHSP70-16 cDNA序列长度和开放阅读框长度相同,编码649个氨基酸,氨基酸序列相似性为98.61%。推测的氨基酸序列均含有一段胞质HSP70的特征序列EEVD,系统进化树分析结果也证明VtHSP70-16定位于细胞质中。此外,两个材料中的VtHSP70-16 gDNA结构也相似,都包含一个内含子,但内含子序列有9 bp碱基差异。(4)采用基因组步移法克隆了两个材料中VtHSP70-16基因的启动子序列,序列分析显示,两种材料中的VtHSP70启动子序列差异较大,相似性为34.20%,元件预测分析表明DFM-16材料中的增强元件比08H材料多21个,说明VtHSP70基因启动子在叁色堇耐热性中起重要作用。(本文来源于《河南科技学院》期刊2019-06-01）
姜建军,黄立飞,黎柳锋,陈红松,王凤英[8]（2019）在《瓜实蝇热激蛋白Hsp90基因克隆及表达分析》一文中研究指出【目的】热激蛋白基因Hsps在生物体抗逆性过程中具有重要的作用,本文旨在通过阐释瓜实蝇Bactrocera cucurbitae (Coquillett)热激蛋白基因Hsp90在其对环境温度适应性及抗药性过程中的功能作用,为瓜实蝇综合治理提供理论基础。【方法】采用RACE-PCR技术克隆瓜实蝇的Hsp90基因cDNA序列,利用生物信息学工具分析序列特征,并通过实时定量PCR技术分析高温胁迫、阿维菌素诱导和抗性及敏感品系中该基因的表达情况。【结果】克隆获得的瓜实蝇Hsp90基因cDNA全长2 654 bp,命名为Bc-Hsp90,GenBank登录号为KP864677,含2 145 bp的开放阅读框,编码715个氨基酸蛋白,具有HSP90蛋白家族共有模式和1个基序标签,C-末端具有MEEVD基序,属于胞质型热激蛋白。系统发育分析显示,Bc-Hsp90基因高度保守。不同高温(32-40℃)胁迫处理1 h和2 h后,瓜实蝇成虫体内Bc-Hsp90的相对表达量均显着高于对照组(26℃),并在38℃和40℃表达量最高;阿维菌素长期筛选的RS品系,Bc-Hsp90表达量是对照SS品系的2.13倍,但RS品系以LC90剂量诱导后,Bc-Hsp_(90)表达量显着下调,随着恢复时间延长其表达量逐渐升高,96 h后恢复到对照水平。【结论】推测Bc-Hsp90在瓜实蝇耐热性和抗阿维菌素过程中可能起着重要作用。(本文来源于《应用昆虫学报》期刊2019年03期）
张雅晰,李鑫,屈新月,唐志菲,魏佳兴[9]（2019）在《结缕草热激蛋白基因ZjHSP19.5植物表达载体构建及转化》一文中研究指出以结缕草(Zoysia japonica Steud)cDNA为模板,利用PCR扩增ZjHSP19.5基因,并插入到PGEM-T Easy Vector上构建成克隆载体ZjHSP19.5-T。利用限制性内切酶BamHI分别对克隆载体ZjHSP19.5-T和植物表达载体PZH01进行单酶切,得到目的基因和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下将两者进行定向连接,经琼脂糖凝胶电泳检测、酶切鉴定,获得植物表达载体P-ZjHSP19.5。利用农杆菌介导法将重组植物表达载体P-ZjHSP19.5转化至匍匐翦股颖,为进一步研究ZjHSP19.5的功能和培育匍匐翦股颖抗热新品系打下基础。(本文来源于《河北农业大学学报》期刊2019年03期）
陈龙,谭瑶,周晓榕,庞保平,单艳敏[10]（2019）在《沙葱萤叶甲热激蛋白基因GdHsp10a的克隆、分子特征与表达分析》一文中研究指出为明确热激蛋白HSP10在沙葱萤叶甲Galeruca daurica生长发育过程中的作用,采用RTPCR及RACE技术克隆沙葱萤叶甲Hsp10基因cDNA的全长序列,采用生物信息学方法分析其序列特征,并利用qPCR技术对该基因在沙葱萤叶甲不同发育阶段、成虫羽化后不同时期以及不同温度下的表达谱进行分析。结果表明,克隆获得1条新的沙葱萤叶甲Hsp10基因,命名为GdHsp10a,GenBank登录号为MG460308,cDNA序列全长为526 bp,开放阅读框为333 bp,编码蛋白含110个氨基酸,预测分子量为11.97 kD,等电点为9.74;无信号肽及跨膜结构。同源比对及系统进化分析表明,GdHSP10a与光肩星天牛Anoplophora glabripennis HSP10亲缘关系最近,氨基酸序列一致性为53.15%。qPCR结果表明,GdHsp10a在沙葱萤叶甲各发育阶段均有表达,其中在卵期和成虫期的表达量显着高于幼虫期、预蛹期及蛹期;成虫羽化后不同时期表达量差异显着,25 d时表达量最高,其次为100、10和7 d时的表达量;温度对GdHsp10a表达量有显着影响,30℃下表达量最高,35℃下表达量次之,15、20、25及40℃下表达量最低且无显着差异。表明GdHsp10a可能在沙葱萤叶甲生长发育及成虫越夏中起着多重作用。(本文来源于《植物保护学报》期刊2019年02期）
热激蛋白基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为明确小热激蛋白在沙葱萤叶甲Galeruca daurica应对温度胁迫中的作用,采用PCR方法克隆沙葱萤叶甲小热激蛋白基因Hsp20(GdHsp20.6)完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,应用在线软件对GdHsp20.6基因进行生物信息学分析,通过原核表达技术诱导表达及纯化其编码蛋白,并通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术分析不同温度胁迫下GdHsp20.6基因的表达量。结果显示,GdHsp20.6基因ORF序列长度为543 bp,编码180个氨基酸,预测分子量为20.6 kD,无跨膜区和信号肽。GdHsp20.6氨基酸序列有高度保守的α-结构域。GdHsp20.6氨基酸序列与其它鞘翅目昆虫的Hsp20氨基酸序列有较高的一致性,其中与花绒寄甲Dastarcus helophoroides的Hsp20.99氨基酸序列的一致性最高,为63%。GdHsp20.6基因在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)细胞系中成功表达,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导后GdHsp20.6蛋白成功表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western-blot分析表明融合蛋白大小与预测大小一致,并纯化获得了纯度较高的目的蛋白GdHsp20.6。低温(-10～5℃)和高温(35～40℃)处理1 h以及处理后25℃恢复30 min均能诱导GdHsp20.6基因表达上调,并且0℃处理30～120 min也能诱导GdHsp20.6基因表达上调。表明GdHsp20.6基因在沙葱萤叶甲应对低温和高温胁迫中可能起着重要作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
热激蛋白基因论文参考文献
[1].刘丽丽,王晓雯,朱建亚,张蓉,朱华.虎皮鱼热激蛋白PtHsp70基因序列与低温表达分析[J].水产科学.2019
[2].霍志家,周晓榕,谭瑶,庞保平,单艳敏.温度胁迫下沙葱萤叶甲小热激蛋白基因GdHsp20.6的克隆及表达分析（英文）[J].植物保护学报.2019
[3].胡艳平,周扬,杨春,廖道龙,朱白婢.南瓜热激蛋白相关基因CmHSP70-5的克隆和高温胁迫下的表达分析[J].中国蔬菜.2019
[4].郭虹霞,王创云,赵丽,王陆军,张丽光.水稻中2个小分子热激蛋白基因启动子的序列分析及功能鉴定[J].西北农业学报.2019
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[6].杨雅萍.叁色堇小分子热激蛋白基因克隆及表达分析[D].河南科技学院.2019
[7].牛杨莉.叁色堇热激蛋白70（VtHSP70）基因克隆及热胁迫下应答分析[D].河南科技学院.2019
[8].姜建军,黄立飞,黎柳锋,陈红松,王凤英.瓜实蝇热激蛋白Hsp90基因克隆及表达分析[J].应用昆虫学报.2019
[9].张雅晰,李鑫,屈新月,唐志菲,魏佳兴.结缕草热激蛋白基因ZjHSP19.5植物表达载体构建及转化[J].河北农业大学学报.2019
[10].陈龙,谭瑶,周晓榕,庞保平,单艳敏.沙葱萤叶甲热激蛋白基因GdHsp10a的克隆、分子特征与表达分析[J].植物保护学报.2019
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