导读:本文包含了钙离子载体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:Ca~(2+)激活,卵胞质内单精子显微注射(ICSI),受精失败,精子畸形
钙离子载体论文文献综述
宋文妍,刘敏瑞,金海霞,姚桂东,石森林[1]（2018）在《钙离子载体A23817对卵胞质内单精子显微注射受精失败者卵母细胞的激活作用》一文中研究指出目的探讨Ca~(2+)载体A23817对卵胞质内单精子显微注射(ICSI)受精失败后卵母细胞的激活效果。方法回顾性分析2016年1月—2018年1月期间因第1周期ICSI受精失败于本中心行第2周期Ca~(2+)载体A23817辅助激活的53个ICSI周期的患者临床资料。根据男方精液质量分4组:A组,重度少弱精子症或梗阻性无精子症;B组,圆头精子症;C组,其他类型严重精子畸形;D组,其他因素。采用自身前后对照研究,将所有患者第1周期行常规ICSI的卵母细胞设为对照亚组,将第2周期行Ca~(2+)辅助激活ICSI的卵母细胞设为人工卵母细胞激活(AOA)亚组。再分别比较各组间实验室指标、妊娠结局,以及各AOA亚组的激活率。结果 (1)A、B、C组各AOA亚组的正常受精率(分别为36.9%、66.7%、58.2%)均显着高于相应的对照组(12.7%、0.0%、17.6%;P均为0.000),D组的AOA亚组和对照亚组间差异无统计学意义(P>0.05);(2)C组的AOA亚组种植率显着高于对照亚组(P=0.02),A组、D组的AOA亚组和对照亚组间种植率差异无统计学意义。B组研究亚组胚胎移植后部分成功着床并发生临床妊娠,而其对照亚组无胚胎可进行移植;(3)各组的AOA亚组间激活率差异有统计学意义(P=0.00),其中以B组(86.7%)的激活率最高。结论对于精源性因素导致的ICSI受精失败可行Ca~(2+)载体A23817辅助激活,以改善ICSI后的受精情况,并能改善精子畸形患者的周期结局。(本文来源于《中华生殖与避孕杂志》期刊2018年07期）
王可,龚雪媛,龚恒佩,周炳文,钟晓明[2]（2018）在《肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶干扰慢病毒表达载体构建及稳定转染PC 12细胞株的建立》一文中研究指出目的构建肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶(SERCA)基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞系。方法人工设计、合成针对SERCA基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与p Gag/Pol、pRev、p VSV-G共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染PC 12细胞,建立稳定细胞株;应用RT-PCR和Western blot技术检测PC 12稳定细胞中SERCA基因和蛋白表达情况,并与对照组进行比较。结果成功构建了针对SERCA基因的RNAi慢病毒表达载体,病毒滴度为3×108U·m L-1;建立稳定转染的PC 12细胞株。有效干扰验证显示,sh SERCA能明显降低SERCA的mRNA及蛋白水平(P<0.01)。结论成功构建SERCA基因的sh SERCA慢病毒表达载体,建立稳定干扰SERCA表达的PC 12细胞株。(本文来源于《中国药学杂志》期刊2018年12期）
李雅楠,闫宇,王铭,刘芳,肖永红[3]（2018）在《钙离子载体A23187对转化生长因子β1刺激的肝星状细胞增殖、周期及凋亡蛋白caspase-3表达的影响》一文中研究指出目的研究钙离子载体A23187对转化生长因子β_1(TGF-β_1)刺激的肝星状细胞增殖、周期及凋亡蛋白caspase-3表达的影响。方法将液氮保存下的肝星状细胞株,于37℃、50mL/L CO_2孵箱中进行复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:空白组、TGF-β_1(5ng/mL)组、TGF-β_1+低、中、高剂量钙离子载体A23187组,即5ng/mL TGF-β_1刺激24h,再分别加入1、2、4μmol/L不同剂量钙离子载体A23187作用24h后,用MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白免疫印记测定凋亡蛋白caspase-3表达。结果不同浓度钙离子载体A23187均能显着抑制细胞增殖(P<0.05),且随着剂量的增加,细胞的相对增殖率(RGR)降低,低、中、高剂量组分别为85.93%、61.71%、48.43%,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);不同处理组G1期细胞比例、S+G2期细胞比例差异均有统计学意义(P<0.05),钙离子载体A23187剂量越大,G1期细胞比例越高,S+G2期细胞比例越低(P<0.05)。随着钙离子A23187浓度的增加,细胞内caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论钙离子载体A23187可能通过阻滞大鼠肝星状细胞由G1期进入S期和G2期,抑制细胞增殖,同时上调凋亡蛋白caspase-3的表达。(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2018年01期）
万雷,黄宏兴,黄红,柴生颋,张志海[4]（2016）在《沉默DKK1、Sost重组腺病毒载体的构建及其对MG63细胞增殖、ALP活性和钙离子浓度影响研究》一文中研究指出目的构建Wnt信号通路抑制因子Dickkopf1(DKK1)、骨硬化蛋白Sclerostin(Sost)基因沉默重组腺病毒载体,观察其对MG63细胞增殖、碱性磷酸酶(ALP)活性和钙离子浓度影响作用。方法设计出特异性针对DKK1、Sost和无关对照序列(Scr),构建DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体,用q PCR法和蛋白印记(Western blot)法选出沉默效率最好的扩增DKK1、Sost沉默重组腺病毒载体,并用荧光显微镜观察计算病毒滴度。MG63细胞被分成空白对照组、沉默DKK1(Ad-sh DKK1)组、沉默Sost(Ad-sh Sost)组、沉默DKK1+Sost(Ad-sh DKK1+Ad-sh Sost)组4组,分别用优选出的沉默效率最好的sh DKK1和sh Sost腺病毒载体转染MG63细胞,采用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT)检测观察细胞增殖、考马斯亮蓝蛋白定量法测定ALP活性、流式分析法测定钙离子浓度。结果 1DKK1 p Ad-sh DKK1-1和Sost p Ad-GFP-shRNA-2沉默效率最高;2与空白对照组对比,沉默DKK1组、沉默Sost组、沉默DKK1+Sost组的细胞光吸收值(OD)、ALP活性测定值均升高,而钙离子浓度均降低,以沉默DKK1+Sost组变化最明显,组间比较具有统计学差异(P<0.01和P<0.05)。结论 DKK1、Sost沉默可促进MG63细胞增殖、提高ALP活性,降低钙离子浓度,尤以二者同时沉默时的作用最强。(本文来源于《中国骨质疏松杂志》期刊2016年11期）
荆哲,刘峰舟,刘燕,陈永清[5]（2016）在《构建线粒体钙离子摄入蛋白1慢病毒表达载体及在H9C2细胞中的应用》一文中研究指出背景:线粒体钙离子摄入蛋白1(mitochondrial calcium uptake 1,MICU1)是维持细胞线粒体钙稳态的重要分子,MICU1对线粒体钙稳态的调节可能在糖尿病心肌病的发生及发展中起着重要作用,但目前机制尚不明确。目的:构建MICU1基因的慢病毒表达载体,产毒感染H9C2细胞,评价MICU1基因在H9C2细胞中的表达效果,为后续在细胞水平研究糖尿病心肌病的发生及发展建立平台。方法:PCR提取H9C2细胞MICU1基因,SpeⅠ、EcoRⅠ双酶切后,将MICU1基因片段插入慢病毒载体pR RLsin.CMV.e FP中,构建慢病毒表达质粒pR RLsin.CMV.MICU1-e FP。使用pC MVDR8.91、pC MV-VSVG共转染于293T细胞中包装产毒,用于感染H9C2细胞。通过RT-PCR及Western blot检测感染后H9C2细胞中MICU1 m RNA及蛋白的表达。共聚焦显微镜检测Rhod-2染色H9C2细胞后线粒体钙水平。结果与结论:(1)MICU1基因成功插入pR RLsin.CMV.e FP慢病毒表达质粒;(2)转染pR RLsin.CMV.MICU1-e FP慢病毒表达质粒后,可见293T细胞表达绿色荧光蛋白,并且MICU1的蛋白表达明显升高;(3)病毒液感染H9C2细胞后,MICU1的蛋白及m RNA水平较未感染组及空质粒包装组明显升高;(4)Rhod-2染色后观察发现,MICU1能够明显增强线粒体钙水平;(5)结果表明,pR RLsin.CMV.MICU1-e FP慢病毒能够高效感染H9C2细胞,为构建永生化细胞系奠定基础。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2016年37期）
曾滔,段小鹿,杨州,麦新,刘旸[6]（2016）在《钙离子通道蛋白TRPV5小激活RNA慢病毒载体及其稳定转染细胞株的构建》一文中研究指出目的:构建钙离子通道蛋白TRPV5小激活RNA(SaRNA)慢病毒载体,建立稳定激活TRPV5表达的大鼠肾小管上皮细胞株(NRK细胞株)。方法:针对大鼠TRPV5基因的启动子区域,设计并合成5条特异性SaRNA序列,通过脂质体转染和Western blot筛选出激活效应最强的SaRNA序列,连入慢病毒表达载体中构建重组质粒LV3-TRPV5-SaRNA,对重组质粒进行测序鉴定后进行慢病毒包装;利用生产的慢病毒颗粒感染NRK细胞,经嘌呤霉素筛选得到阳性克隆后进行扩增培养,通过RT-PCR和Western blot检测扩增后的阳性克隆细胞中TRPV5的mRNA和蛋白表达水平。结果:Western blot的检测结果显示SaRNA-320可以明显激活即上调TRPV5的表达水平;测序结果显示目的序列SaRNA-320正确插入LV3表达载体中;SaRNA-320慢病毒颗粒稳定感染的NRK细胞中TRPV5的mRNA和蛋白表达水平均明显升高。结论:成功构建了大鼠TRPV5基因的SaRNA慢病毒重组载体并获得TRPV5稳定过表达的NRK细胞株,为进一步利用小激活RNA技术以及研究钙离子通道在含钙结石的病因及防治中的作用及机制提供了扎实的实验基础。(本文来源于《临床泌尿外科杂志》期刊2016年03期）
杨慧军,李梅,马水英,李城,范媛媛[7]（2015）在《钙离子载体A23187联合卵细胞胞质内单精子注射治疗圆头精子症2例并文献复习》一文中研究指出目的:探讨圆头精子症的病因、圆头精子的受精能力,以及人工激活技术在圆头精子症患者卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗中的应用价值。方法:回顾性分析2例圆头精子症ICSI治疗病例,患者配偶的卵子经ICSI处理后,随机分为2组,其中1组卵子接受钙离子载体A23187激活处理,另外1组不接受任何处理。结合国内外文献对圆头精子症的发病原因、受精能力和治疗方案进行复习和讨论。结果:A23187激活处理组均获得优质胚胎,而常规处理对照组的卵子则未受精、未卵裂、无优质胚胎、无囊胚形成。2例患者均移植A23187激活组的优质胚胎,获得妊娠并分娩健康婴儿。结论:A23187可以用于圆头精子症患者的ICSI治疗,并获得较好的临床结局,但还应密切关注A23187的安全性问题。(本文来源于《中华男科学杂志》期刊2015年04期）
李和平,邹琦,商兰,刘伟石[8]（2014）在《钙离子载体诱发马鹿精子顶体反应效果》一文中研究指出以马鹿(Cervus elaphus)为试验动物,采用上浮法诱导马鹿精子体外获能,以钙离子载体(A23187)诱导马鹿精子顶体反应,进而摸索钙离子载体(A23187)诱发其顶体反应的适宜体系。结果表明:0.01~100.00μmol/L的A23187可提高获能马鹿精子的顶体反应率;其中适宜的A23187浓度为0.10μmol/L,反应的时间为5 min,顶体反应率为(74.00±2.62)%。A23187能促进获能马鹿精子的顶体反应,但不能显着(P>0.05)促进未获能马鹿精子的顶体反应。(本文来源于《东北林业大学学报》期刊2014年01期）
庄宝祥[9]（2013）在《钙离子载体A23187对人红白血病细胞株K562超微结构的影响》一文中研究指出目的观察钙离子载体A23187对人红白血病细胞株K562超微结构的影响,为白血病的治疗提供新思路。方法体外培养K562细胞,密度增至(1~2)×105/L时随机分为观察组和对照组(容积均为5 mL),观察组取2 mmol/L细胞溶液加入A23187溶液7.5μL,至最终浓度为3μmol/L;对照组加入等体积生理盐水。细胞培养到第10、20和30 min时,依次取两组细胞溶液离心、制备超薄切片,H-7500型透射电镜下观察其超微结构。结果对照组K562细胞超微结构无明显改变;观察组K562细胞线粒体呈现空泡样改变和基质深染。结论钙离子载体A23187在体外可能通过改变人红白血病细胞株K562细胞超微结构诱导其凋亡,此为白血病的临床治疗提供了一种新思路。(本文来源于《山东医药》期刊2013年47期）
郭小桥,余波澜,周华,司沙沙,曹定娅[10]（2013）在《钙离子载体A23187诱发的精子顶体反应率、顶体酶总活性与精液参数及体外受精结局的关系研究》一文中研究指出目的研究钙离子载体A23187诱发精子顶体反应率、顶体酶总活性与精液参数及体外受精(IVF)结局的关系,初步探讨钙离子载体A23187诱发精子顶体反应、顶体酶总活性预测男性生育力及IVF结局的价值,比较这两种检验方法的临床应用价值。方法应用钙离子载体A23187在体外诱发精子顶体反应,采用改良Kennedy法检测精子顶体酶总活性。研究IVF-ET治疗150周期患者及各亚组中男方的精子顶体反应率、顶体酶总活性与正常形态精子百分率、精子浓度、活动率及体外受精率的关系。分析IVF妊娠组与非妊娠组的顶体反应率、顶体酶总活性的差别是否有统计学意义,应用ROC曲线拟定顶体反应率、顶体酶总活性预测IVF妊娠结局的阈值。结果 150例样本中,精子顶体反应率与精子浓度、前向运动精子百分数、正常形态精子百分数、IVF受精率之间无相关性,r分别为:0.120,0.018,0.084,0.054,P均>0.05;顶体反应率与畸形精子指数呈负相关,r=-0.183,P=0.025。顶体酶总活性与精子浓度、前向运动精子百分数、正常形态精子百分数呈正相关,r分别为:0.172,0.306,0.222,P均<0.05;顶体酶总活性与畸形精子指数、IVF受精率无相关性,r分别为-0.027,0.039,P均>0.05。精液正常组(85例)、畸精症组(44例)、弱精症组(6例)的顶体反应率与IVF受精率无相关性,r分别为:-0.039,0.185,-0.725,P均>0.05。精液正常组、畸精症组、弱精症组的顶体酶总活性与IVF受精率无相关性,r分别为:0.057,-0.156,-0.319,P均>0.05。妊娠组的顶体反应率为(23.65±16.60)%,比未妊娠组的[(17.96±11.00)%]高,P=0.024,差别有统计学意义;妊娠组的顶体酶总活性为(78.84±38.52)μIU/106,比未妊娠组的([64.72±31.67)μIU/106]的高,P=0.031,差别有统计学意义。顶体反应率预测IVF妊娠结局的阈值为17.85%,灵敏度为0.550,特异度为0.549;顶体酶总活性预测IVF妊娠结局的阈值为59.84 IU/106精子,灵敏度为0.662,特异度为0.570。结论钙离子载体A23187诱发的精子顶体反应预测男性生育力及IVF结局的价值低;精子顶体酶总活性可能是预测男性生育力的良好指标之一,但预测IVF结局的价值低;钙离子载体A23187诱发的精子顶体反应的临床应用价值并不比顶体酶总活性的高。(本文来源于《中华临床医师杂志(电子版)》期刊2013年18期）
钙离子载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶(SERCA)基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞系。方法人工设计、合成针对SERCA基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与p Gag/Pol、pRev、p VSV-G共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染PC 12细胞,建立稳定细胞株;应用RT-PCR和Western blot技术检测PC 12稳定细胞中SERCA基因和蛋白表达情况,并与对照组进行比较。结果成功构建了针对SERCA基因的RNAi慢病毒表达载体,病毒滴度为3×108U·m L-1;建立稳定转染的PC 12细胞株。有效干扰验证显示,sh SERCA能明显降低SERCA的mRNA及蛋白水平(P<0.01)。结论成功构建SERCA基因的sh SERCA慢病毒表达载体,建立稳定干扰SERCA表达的PC 12细胞株。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钙离子载体论文参考文献
[1].宋文妍,刘敏瑞,金海霞,姚桂东,石森林.钙离子载体A23817对卵胞质内单精子显微注射受精失败者卵母细胞的激活作用[J].中华生殖与避孕杂志.2018
[2].王可,龚雪媛,龚恒佩,周炳文,钟晓明.肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶干扰慢病毒表达载体构建及稳定转染PC12细胞株的建立[J].中国药学杂志.2018
[3].李雅楠,闫宇,王铭,刘芳,肖永红.钙离子载体A23187对转化生长因子β1刺激的肝星状细胞增殖、周期及凋亡蛋白caspase-3表达的影响[J].西安交通大学学报(医学版).2018
[4].万雷,黄宏兴,黄红,柴生颋,张志海.沉默DKK1、Sost重组腺病毒载体的构建及其对MG63细胞增殖、ALP活性和钙离子浓度影响研究[J].中国骨质疏松杂志.2016
[5].荆哲,刘峰舟,刘燕,陈永清.构建线粒体钙离子摄入蛋白1慢病毒表达载体及在H9C2细胞中的应用[J].中国组织工程研究.2016
[6].曾滔,段小鹿,杨州,麦新,刘旸.钙离子通道蛋白TRPV5小激活RNA慢病毒载体及其稳定转染细胞株的构建[J].临床泌尿外科杂志.2016
[7].杨慧军,李梅,马水英,李城,范媛媛.钙离子载体A23187联合卵细胞胞质内单精子注射治疗圆头精子症2例并文献复习[J].中华男科学杂志.2015
[8].李和平,邹琦,商兰,刘伟石.钙离子载体诱发马鹿精子顶体反应效果[J].东北林业大学学报.2014
[9].庄宝祥.钙离子载体A23187对人红白血病细胞株K562超微结构的影响[J].山东医药.2013
[10].郭小桥,余波澜,周华,司沙沙,曹定娅.钙离子载体A23187诱发的精子顶体反应率、顶体酶总活性与精液参数及体外受精结局的关系研究[J].中华临床医师杂志(电子版).2013
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