导读:本文包含了基因枪转化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:小麦,基因枪,农杆菌,转化效率
基因枪转化论文文献综述
石磊,刘会云,陈海强,王轲,杜丽璞[1]（2018）在《农杆菌和再生相关基因辅助基因枪转化小麦幼胚效果初探》一文中研究指出【研究背景】转基因技术是实现作物性状定向改良,缩短育种年限的重要技术手段。然而,由于小麦基因组庞大和遗传组成的复杂性,小麦转基因育种一直落后于其他主要粮食作物。目前在小麦遗传转化实践中,主要应用农杆菌介导法进行外源基因的导入,一些实验室也利用基因枪转化法。基因枪法具有操作简便,不受受体基因型和外植体生理状态影响等优点,但存在受体细胞损伤较大、转化效率较低等缺点。农杆菌转化模式植物的效率较高,其中的原因之一是农杆菌侵染植物细胞后在转入T-DNA的同时将VirB、VirD、VirE等效应子蛋白分泌到植物细胞中,与T-DNA形成复合体,协助T-DNA在细胞质中的运输和向基因组上的整合。【材料与方法】基于农杆菌转化的这一特性,我们将农杆菌侵染与基因枪轰击方法组合应用,试图实现小麦遗传转化体系的优化。以Fielder预培养4-6d的幼胚为受体材料,将pAH006载体上包含bar基因表达框和GUS基因表达框的T-DNA区酶切、回收,利用基因枪将T-DNA和携带再生相关基因TaCB1的质粒DNA轰击幼胚愈伤组织。轰击后的愈伤组织立即用农杆菌C58C1侵染5min(基因枪轰击+农杆菌侵染处理),然后共培养2d,恢复培养5 d后在含PPT的培养基上筛选抗性愈伤组织,随后分化抗性再生植株。同时,设置基因枪轰击不进行农杆菌侵染的对照处理。【结果与分析】结果发现,基因枪轰击+农杆菌侵染虽然能够产生抗性愈伤组织和绿芽点,但没有获得再生植株,转化效率为0。相反,单独基因枪轰击获得了较多抗性愈伤组织和阳性植株,转化效率2.22-13.89%,平均转化率6.48%。【结论】结果表明,基因枪轰击+农杆菌侵染处理不能提高转化效率,基因枪转化中利用再生相关基因TaCB1辅助显着提高了线性T-DNA表达框转化小麦幼胚的效率。(本文来源于《2018中国作物学会学术年会论文摘要集》期刊2018-10-14）
张晓芬,王国云,杜和山,陈斌,温长龙[2]（2018）在《基因枪法介导的辣椒花药遗传转化技术研究》一文中研究指出为建立基因枪法介导的辣椒遗传转化体系,以小孢子胚胎发生率较高的辣椒品种L5的花药为受体,利用基因枪法将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入L5花药小孢子中,并进行花药培养诱导小孢子胚胎发生,探讨基因枪法转化辣椒花药小孢子的适宜参数。结果表明,辣椒小孢子处于单核靠边期的花药在9℃下暗培养4 d时为最佳受体;CaMV35S启动子能启动GFP基因在辣椒花药培养的小孢子胚胎中表达;基因枪各轰击参数对小孢子胚胎发生有显着影响(P<0.05),随着基因枪轰击次数和轰击压力的增加以及轰击距离的减小,小孢子胚胎发生数量逐渐减少;最适的轰击参数为基因枪轰击2次、轰击压力1 350 psi和轰击距离9 cm,此时获得的转化胚胎数量最多;在最适的轰击参数下辣椒花药小孢子的平均转化效率为4.2%;体式荧光显微镜下共检测到14个转化胚胎。本研究结果为进一步建立基因枪介导的辣椒花药稳定遗传转化体系提供了一定的理论基础和技术支撑。(本文来源于《核农学报》期刊2018年11期）
陈禹先,毕丛斌,佟少明,侯和胜[3]（2018）在《微藻高效基因枪转化方法的建立》一文中研究指出基因枪法是外源基因导入微藻细胞的重要手段。然而,发展至今,微藻细胞基因枪转化效率一直偏低(10~50个转化子/μg DNA),高价低效的转化方法阻碍了基于高通量转化子的基因功能分析。为了提高基因枪的转化效率,本研究以叁角褐指藻为材料,从抗生素选择培养基的改良,微载体的选择、制备、包埋、点膜和轰击参数的优化,以及受体细胞的处理等方面进行了系统研究。结果显示,采用50%海水盐度f/2培养基可以提高博来霉素的效价,f/2固体培养基中2216E营养物质的加入能缩短1/3的平板筛选时间。微载体制备应选择对金(钨)粉没有吸附作用的离心管,制备量/管应少于3.5 mg。微载体轰击量每次大约为0.75 mg,过量将会造成一个轰击死亡圈,过少将导致轰击成本上升。当轰击间距A为6.35 mm,间距B为11 mm,间距C为6 cm时,可以获得最多的转化细胞。109个受体细胞铺成较厚的多细胞层能显着提高转化效率。经过上述优化与改进,本研究将现有文献报道的转化效率提高了4.7~30倍,达到295±60个转化子/μg DNA。该方法除适用于叁角褐指藻外,也可广泛应用于其他微藻(杜氏盐藻、小球藻)的基因枪转化研究,可以为微藻基因工程研究提供快速,高效和可靠的操作技术。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2018年07期）
唐学玲[4]（2018）在《基因枪介导的小麦抗赤霉病相关RNAi片段的转化及其后代鉴定》一文中研究指出小麦是主要粮食作物,赤霉病是小麦的重要病害,不仅大幅降低小麦产量,还严重影响小麦品质。由于小麦抗赤霉病种质资源匮乏,植物中没有免疫或高抗赤霉病的材料,所以通过常规育种方法培育抗赤霉病小麦新品种的难度较大。因此,利用转基因技术,将非植物源的抗病基因导入小麦,筛选、鉴定整合这类抗病基因的小麦材料,将为培育抗赤霉病小麦新品种提供新种质。本研究通过基因枪介导法,以Pmi/甘露糖为筛选体系,将RNAi基因赤霉菌麦角固醇合成Cyp51基因、几丁质合酶(Chitin synthase,Chs)Chs3b基因、葡聚糖合酶(Glucan synthase,Gls)Gls基因、细胞分裂Myo基因以及与毒素合成相关的8mR7和8mR12-47基因,组成不同组合,共转化不同小麦品种,经PCR鉴定转基因小麦材料8份;还繁殖和鉴定实验室前期研究中筛选的部分转基因小麦株系8份。主要结果如下:1.转基因小麦的筛选与鉴定(1)将Cyp51BAC和Gls基因RNAi片段及筛选标记基因Pmi,共转化小麦品种襄麦76,筛选获得1株T_0代植株,编号为XⅡ。T_1~T_4代的鉴定表明,XⅡ株系同时含有cyp51BAC、gls2-gls6和Pmi基因,现已经纯合。(2)将RNAi片段Gls2-t-Gls6、chs3b-t-AS2-AS3和Pmi基因共转化襄麦76,筛选获得24株T_0代植株,其中6株含有叁个基因,13株含Gls2-t-Gls6和Pmi基因,5株仅含Gls2-t-Gls6基因。T_1~T_3代的鉴定表明,12个T_0代株系的后代分离较大,至T_3代时仍在分离。其余12个T_0代株系在T_1代未检测到外源基因。(3)将RNAi片段chs3b-AS5-t-AS5、chs3b-AS3-t-AS3和Pmi共转化郑麦9023和襄麦76,筛选获得11株T_0代植株,其中2株来自郑麦9023为受体的遗传转化,含有Pmi和chs3b-AS3-t-AS3基因,T_2代仍有分离。其余9株是来自襄麦76为受体的转基因材料,其中5株含有Pmi和chs3b-AS3-t-AS3基因,在T_1~T_3代仍在分离;4株仅含标记基因。(4)将含不同启动子RNAi片段Myo2-AS6、Pmi标记基因共转化襄麦76,筛选获得5株T_0代植株,其中4株的T_3代仍有严重分离,1株在T_3代已经纯合。(5)将不同启动子的RNAi片段8mR7、标记基因Pmi共转化襄麦76和郑麦9023,筛选获得16株T_0代植株,其中15株来自襄麦76为受体的遗传转化,1株来自郑麦9023为受体,它们的T_2代仍在分离。(6)将不同启动子的RNAi片段8mR12-47和标记基因Pmi共转化襄麦76,筛选获得3株T_0代植株,T_2代已趋于纯合。(7)将不同启动子的RNAi片段chs3b-5*2 Pmi共转化襄麦76,筛选获得1株T_0代植株,自交后代均含有chs3b-5*2和Pmi基因,T_2代已经纯合。(8)将cyp51基因的RNAi片段及D4E、Opt1和AFP叁个抗菌肽基因及Pmi共转化扬麦158,筛选获得4株T_0代植株,所有T_1代植株均为阳性,含有部分或全部外源基因,这些材料已经纯合。2.实验室前期获得的部分转基因小麦材料的繁殖及鉴定(1)含chs3bAS2-AS3、chs3bAS5-AS1 RNAi片段转基因(受体:襄麦76)株系JB、JV、M、J、Z,这5个株系仍未纯合。(2)含不同启动子的chs3b5*2转基因株系(受体:襄麦76)3B,T_1代仅获得2株同时含chs3b-5*2和Pmi基因的阳性植株,以及2株仅含Pmi的植株。(3)含不同启动子的8mR12-47转基因株系8R(受体:扬麦158),T_1代仍在分离。(4)含pmi-ZmGC、ACE、Ech42的转基因株系YZ(受体:扬麦158),筛选获得4株T_1代植株,它们含有全部外源基因,YZ株系T_1代未发生分离。(本文来源于《华中农业大学》期刊2018-06-01）
王军,付爱根,徐敏,王玉华[5]（2018）在《基因枪法在遗传转化中的研究进展》一文中研究指出随着遗传转化技术的革新和研究范围的扩大,作为转基因技术中坚力量的基因枪转化方法也有了较大的进步和新的应用领域,在动、植物中均有广泛应用。在植物转化中,尤其在农作物的抗虫、抗逆及品质改良方面取得较大的成就。在动物转化中也取得了较大的突破,其中免疫、疫苗及基因治疗等方面均得到快速发展。本综述介绍了基因枪法发展的历史过程、国内外现状以及最新的技术应用,并对其影响转化效率的因素、存在的问题以及未来发展方向进行了分析。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2018年01期）
刘迪,施桂姣,肖乃衍,Khalil,Farghama,许跃语[6]（2017）在《甘蔗花青素转录因子基因ScRS克隆与基因枪转化研究》一文中研究指出花青素不仅是天然色素,而且具有保健功能。花青素转录因子基因对于调控花青素的合成具有关键作用。本研究根据玉米花青素转录因子基因RS序列设计引物,利用同源克隆技术,得到甘蔗花青素转录因子基因ScRS的全长序列;在ScRS序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点,构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScRS,包被微粒载体通过基因枪对甘蔗愈伤组织进行轰击,转化的愈伤组织明显呈紫红色;将紫红色愈伤组织分化培养获得再生甘蔗植株,经PCR检测,获得转ScRS基因阳性植株,初步证实利用克隆的基因转化甘蔗可以使愈伤组织显色。研究结果对于建立新型的遗传转化可视化示踪体系和培育高花青素甘蔗品种具有重要意义。(本文来源于《热带作物学报》期刊2017年07期）
陈长明,赵祥明,雷建军,曹必好,陈国菊[7]（2016）在《基因枪法和农杆菌介导的Bt抗虫基因转化芥蓝》一文中研究指出以芥蓝品种小香菇为试材,分别采用基因枪法和农杆菌介导转化法将Bt抗虫基因Cry2Aa2转化到芥蓝中,并对两种转化方法进行了优化和比较。结果表明:基因枪法在轰击距离为6cm、轰击次数为1次时转化效率最高,为0.43%;农杆菌介导转化法以带子叶下胚轴为外植体、预培养2d、侵染10min、共培养2d、抑菌培养5d后转入筛选培养基为最佳参数,转化效率为0.37%。经PCR和PCR-Southern鉴定,基因枪法和农杆菌介导转化法均成功将目的基因导入芥蓝基因组中。经抗虫性表型鉴定,T_0代转基因芥蓝植株对甘蓝夜蛾幼虫的抗性高于非转基因植株。(本文来源于《中国蔬菜》期刊2016年08期）
贾琳琳[8]（2016）在《基因枪介导的抗赤霉病相关RNAi基因转化小麦的研究》一文中研究指出小麦是世界叁大重要粮食作物之一,小麦产业在农业生产中举足轻重,小麦赤霉病是由禾谷镰刀菌引起的全球性真菌病害,发病范围广,不仅可造成不可估量的经济损失,还影响小麦品质,人畜摄食残留毒素积累的麦粒,严重危害健康。利用基因工程技术,辅助传统赤霉病抗性育种,可拓宽抗赤霉病种质资源,有效加速育种进程。本研究利用基因枪介导的转基因技术,将外源抗赤霉病基因转入小麦品种中,为小麦赤霉病抗性改良提供材料,并为开展相关抗性机理研究奠定基础。本研究通过基因枪介导法,将来自禾谷镰刀菌的RNAi构建体转入小麦品种襄麦76中,包括几丁质合成酶基因(Chs3b、Chs7)、葡聚糖合成酶基因(gls2、gls3、gls5)、甾醇14α-去甲基化酶基因(CYP51)的RNAi构建体。经鉴定获得不同基因组合的材料,同时繁殖与鉴定实验室前期研究所获得的抗赤霉病转基因小麦材料,主要结果如下:1.转几丁质合成酶基因7RNA1(dubiubi-Chs7As3As4)小麦株系的获得与赤霉病抗性鉴定。以PMI/甘露糖为筛选体系,获得来自不同愈伤的阳性转基因植株2株,编号JA7、JA8,To代植株自交子代的PCR鉴定表明,2个单株所含目的基因均能稳定遗传,至T3代趋于纯合;T3代植株温室单花接种赤霉病菌的鉴定结果表明,JA7转基因株系与未转化的襄麦76对照相比赤霉病抗性显着提高;T4代JA7转基因株系温室及大田单花接种结果与T3代结果基本一致,JA8株系部分植株的株高、穗长、穗粒数与非转基因植株相比均有所增加,但穗粒重没有显着差异。2.转几丁质合成酶基因 3 RNAi(dubicmps-chs3b-As2-chs3b-As3、dubi35s-chs3b-As5-chs3b-Asl)、甾醇14a-去甲基化酶基因的RNAi构建体(dubi35ss-CYP51BAC-DONS)小麦株系的筛选与鉴定,获得T0代植株1株,鉴定含有所有转化的基因,对其自交形成的T1、T2代植株的PCR鉴定表明,该株系的dubi35ss-CYP51BAC-DONS基因在T2代丢失,转基因仍处在分离比较大的状态,目前没有出现目的基因与筛选标记基因分离的植株。3.转几丁质合成酶基因RNAi构建体(Chs3b)、葡聚糖合成酶基因的RNAi构建体(gls)小麦株系的筛选与鉴定,共获得2个不同组合的转基因株系,1)RNAi构建体 dubicmps-chs3b-As2-chs3b-As3、dubi35s-chs3b-As5-As1、和 dubiubi-gls3-gls6共转化襄麦76,经PMI/甘露糖筛选体系和PCR鉴定,获得4株T0代转基因植株,编号为LA1至LA4,它们分别来自3个愈伤,对其自交形成T1代的PCR检测结果显示:所有株系只含有转化基因dubicmps-chs3b-As2-chs3b-As3,T2代PCR鉴定结果表明,转基因已经纯合。2)RNAi构建体dubi35s-6*chs3b5-2和dubiubi-gls3-gls6共转化襄麦76,获得1株阳性转基因植株,编号为:PG1,PCR鉴定表明含有2个转化基因,目前世代数为T0代。4.转葡聚糖合成酶基因的 RNAi 构建体(dubiubi-gls2-gls6、dubiubi-gls3-gls6)小麦株系的筛选与鉴定,同上方法筛选与鉴定,获得来自2个不同愈伤的2株转基因单株,编号为LG1、LG2,均含有所有转化基因,现为T1代,T1代株系目的基因PCR鉴定结果分析,所含目的基因没有发生分离,在T1代已趋于纯合,且同时含有2个目的基因,与非转基因植株相比,转基因株系长势优良,分蘖较多,籽粒饱满,农艺性状优良。5.转抗病相关基因材料的繁殖和赤霉病抗性鉴定。1)转蛋白激酶基因RNAi构建体(dubiubi-PkcAs3-Chs7As4)、乳铁蛋白基因Amt-Blf小麦株系的繁殖与鉴定,转化受体为襄麦76,T4代温室单花接种赤霉病菌及T5代大田单花接种结果均显示,与非转基因植株相比,RA1、RA3b转基因株系的赤霉病抗性显着提高,抗性表现稳定。2)转几丁质酶基因Lem2-UEch42、抗菌肽基因Ubi-AFP2小麦株系的繁殖与赤霉病抗性鉴定,转化受体为小麦品种扬麦158,T4代温室单花接种结果表明,WB22株系与对照相比抗性显着提高,与上一代抗性鉴定结果一致,说明转入的基因赋予的赤霉病抗性能稳定遗传。3)转几丁质合成酶RNAi构建体(dubiubi-Chs7As3As4)小麦株系的繁殖与鉴定,对其自交形成T4代温室单花接种赤霉菌结果表明,DA3、DA4转基因株系与非转基因对照相比赤霉病抗性显着提高。(本文来源于《华中农业大学》期刊2016-06-01）
宋琳琳[9]（2016）在《基因枪和农杆菌介导MiR396基因对小麦品种的遗传转化》一文中研究指出小麦是世界上最重要的粮食作物之一,与水稻等其它作物相比,其分子生物学研究相对困难与滞后。然近几年在产量提高,品质改善,抗逆性增强等方面的研究都取得一定进展。microRNA是真核生物体内普遍存在的一类非编码小分子RNA,它们通过碱基互补配对的方式介导靶mRNA的降解或是阻遏靶mRNA的翻译来参与基因的调控,从而影响植物的生长和发育。MiRNA也以不同的方式参与植物生物和非生物胁迫的逆境响应。前人研究表明miR396不仅影响植物的叶长、分蘖数、节间长、花粉量等农艺性状,还与植物抗旱、耐盐密切相关。也有研究表明miR396与植物的春化作用有关,对于一些需经过低温春化才能开花的植物在miR396基因的作用下不经过此过程就能开花。为创制优异的小麦育种新材料,提高小麦品种遗传改良之效率,获得不需经过低温春化就能开花的小麦植株。本研究利用基因枪和农杆菌介导的遗传转化法将来源于水稻的miR396基因转入不同小麦品种中,以期获得农艺性状或抗逆性优良的转基因株系,使miR396这一优良基因资源得到有效利用。主要研究结果如下:(1)基因枪法介导miR396转基因小麦植株的获得与鉴定以华麦2566、华麦2152、陇春23、科农199和郑麦9023为受体材料,用基因枪法将miR396基因转化到以上小麦品种中。最终获得39株小麦再生植株,其中包含6株华麦2566,18株科农199,15株陇春23。经过PCR初步检测,共获得7株阳性植株,其中有5株来源于科农199,2株来源于陇春23。其他小麦品种的转化材料中均未检测到阳性株系。(2)农杆菌介导miR396转基因小麦植株的获得与鉴定以华麦2566、科农199、陇春23、硬粒小麦品种LDN为受体材料,用农杆菌介导法将miR396基因转入以上小麦品种中,一共获得11株再生植株,但仅得到2株来源于硬粒品种LDN的阳性株系,这可能是阳性植株的花粉育性受到影响所致,现未获得转基因后代种子。同时观察发现阳性植株分蘖数显着减少,其育性及分蘖表型是否与miR396的导入有关还有待进一步研究。(本文来源于《华中农业大学》期刊2016-06-01）
李志亮,吴忠义,杨清,张希太,叶嘉[10]（2016）在《基因枪转化法对抗旱基因导入玉米的研究》一文中研究指出全球水资源短缺,干旱已是玉米生产发展的主要限制因素。通过培育抗旱能力提高的转P5CS基因玉米株系,为玉米抗旱遗传育种提供新材料。利用基因工程策略构建植物表达载体p BPC-P5CS-F129A,用基因枪法对玉米自交系京501幼胚愈伤组织进行遗传转化,在选择培养基中加入10 mg/L的草丁膦进行筛选,对草丁膦抗性再生植株进行了PCR检测和Northern blot鉴定,对转P5CS基因玉米植株进行了抗旱性分析。结果表明,与对照相比,转基因植株的抗旱能力得到提高。干旱胁迫下,转P5CS基因玉米植株的脯氨酸含量比对照高,而丙二醛含量比对照低。(本文来源于《生物技术通报》期刊2016年05期）
基因枪转化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为建立基因枪法介导的辣椒遗传转化体系,以小孢子胚胎发生率较高的辣椒品种L5的花药为受体,利用基因枪法将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入L5花药小孢子中,并进行花药培养诱导小孢子胚胎发生,探讨基因枪法转化辣椒花药小孢子的适宜参数。结果表明,辣椒小孢子处于单核靠边期的花药在9℃下暗培养4 d时为最佳受体;CaMV35S启动子能启动GFP基因在辣椒花药培养的小孢子胚胎中表达;基因枪各轰击参数对小孢子胚胎发生有显着影响(P<0.05),随着基因枪轰击次数和轰击压力的增加以及轰击距离的减小,小孢子胚胎发生数量逐渐减少;最适的轰击参数为基因枪轰击2次、轰击压力1 350 psi和轰击距离9 cm,此时获得的转化胚胎数量最多;在最适的轰击参数下辣椒花药小孢子的平均转化效率为4.2%;体式荧光显微镜下共检测到14个转化胚胎。本研究结果为进一步建立基因枪介导的辣椒花药稳定遗传转化体系提供了一定的理论基础和技术支撑。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因枪转化论文参考文献
[1].石磊,刘会云,陈海强,王轲,杜丽璞.农杆菌和再生相关基因辅助基因枪转化小麦幼胚效果初探[C].2018中国作物学会学术年会论文摘要集.2018
[2].张晓芬,王国云,杜和山,陈斌,温长龙.基因枪法介导的辣椒花药遗传转化技术研究[J].核农学报.2018
[3].陈禹先,毕丛斌,佟少明,侯和胜.微藻高效基因枪转化方法的建立[J].中国生物化学与分子生物学报.2018
[4].唐学玲.基因枪介导的小麦抗赤霉病相关RNAi片段的转化及其后代鉴定[D].华中农业大学.2018
[5].王军,付爱根,徐敏,王玉华.基因枪法在遗传转化中的研究进展[J].基因组学与应用生物学.2018
[6].刘迪,施桂姣,肖乃衍,Khalil,Farghama,许跃语.甘蔗花青素转录因子基因ScRS克隆与基因枪转化研究[J].热带作物学报.2017
[7].陈长明,赵祥明,雷建军,曹必好,陈国菊.基因枪法和农杆菌介导的Bt抗虫基因转化芥蓝[J].中国蔬菜.2016
[8].贾琳琳.基因枪介导的抗赤霉病相关RNAi基因转化小麦的研究[D].华中农业大学.2016
[9].宋琳琳.基因枪和农杆菌介导MiR396基因对小麦品种的遗传转化[D].华中农业大学.2016
[10].李志亮,吴忠义,杨清,张希太,叶嘉.基因枪转化法对抗旱基因导入玉米的研究[J].生物技术通报.2016