导读:本文包含了发育时空特异性表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:特异性,胚胎,转录,原位,磨牙,因子,大鼠。
发育时空特异性表达论文文献综述
孙白羽[1](2016)在《大鼠切牙发育过程中YAP/TAZ时空特异性表达研究》一文中研究指出目的:观察大鼠下颌切牙发育过程中HIPPO信号通路同源核心效应蛋白YAP及TAZ的时空特异性表达,分析Hippo-YAP/TAZ信号通路在大鼠切牙发育过程中的作用及YAP、TAZ两蛋白作用差异。材料和方法:分别取胚胎(E)14.5、E16.5、E18.5天大鼠胚胎头颅标本及出生后(PN)0、PN3及PN7、PN14、PN21、PN28天大鼠下颌骨标本,4℃条件下4%多聚甲醛(PH=7.2)固定24小时、10%EDTA(PH=7.2)脱钙两周、梯度酒精脱水及石蜡包埋后行矢状面5μm石蜡连续切片。采用苏木素-伊红(HE)染色从形态学上观察切牙发育状况,采用免疫组织化学染色从蛋白水平上检测YAP、TAZ表达强度及时空特异性。结果:胚胎E14.5天,切牙进入成釉器蕾状期,YAP和TAZ在牙上皮及间充质皆有表达。E16.5天时,进入成釉器帽状期,YAP在前庭板,牙囊,成釉器,牙乳头皆有表达,且在牙上皮表达量明显高于间充质;在成釉器中,YAP在内釉上皮,外釉上皮及星网状层中皆有表达,而在釉结处YAP表达降低,此时TAZ在外釉上皮有明显表达,内釉上皮表达集中于釉结区域,临近内釉上皮的星网状层细胞有少量表达。E18.5天即切牙发育钟状期,切牙颈环结构形成,此时YAP于成釉器内广泛表达,在内釉上皮层表达广泛。而颊侧颈环区域YAP表达量低于舌侧颈环。TAZ在上皮及间充质皆有表达且均强于YAP,在内釉上皮层,外釉上皮层,中间层和星网状层皆有广泛表达,颊舌两侧颈环区域表达强度基本一致。新生大鼠PN0至PN7天时,牙齿尚未萌出,成牙本质细胞和成釉细胞均有YAP表达,颈环处亦有YAP阳性表达,于颈环过渡细胞表达量最高,而在牙乳头和牙囊表达较少。此时TAZ在成釉器、牙乳头及牙囊皆有表达,颈环过渡细胞处阳性亦较强。PN7天至PN28天,牙齿萌出后YAP表达于颈环处阳性较强,牙周膜,牙槽骨及牙髓组织中也可见少量阳性表达,而TAZ表达量相对减少,在颈环、牙髓、牙周膜牙槽骨处有少量表达。结论:HIPPO信号通路下游同源核心效应蛋白YAP及TAZ蛋白在大鼠下颌切发育中呈现特异性表达,推测HIPPO-YAP/TAZ信号通路在牙齿发育过程中发挥重要调节功能;YAP与TAZ相比较表达与定位有相似之处也有明显的差异,二者在调控牙齿发育过程中可能发挥不同的调节功能。(本文来源于《2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会论文汇编》期刊2016-11-04)
张冰[2](2016)在《Yap/Taz在大鼠磨牙发育及颌骨缺损再生过程中的时空特异性表达》一文中研究指出Yap (Yes-associated protein)是重要的转录共激活因子,位于Hippo信号通路下游,首次于1995年在果蝇体内发现。有研究报道Yap在多种组织器官中均存在表达,例肠、肝脏及神经管等。Taz (transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)是一个14-3-3结合蛋白,含有一个保守的WW结构域。Taz为Hippo信号通路下游另一个重要的转录因子,是Yap的旁系同源蛋白。经典的Hippo信号通路控制组织器官的大小主要是通过调控细胞的增殖以及凋亡来实现。文献研究证实Yap/Taz在调控器官大小、干细胞自我更新、增殖及分化等方面都发挥作用。近年来有关Yap在牙胚早期发育及小鼠切牙发育中的相关报道,但对于Yap在大鼠磨牙发育过程中的研究尚未见相关报道,此外,Taz作为Yap的同源蛋白,是否参与牙齿的发育尚无研究,由此我们推测Yap/Taz可能在大鼠磨牙发育中具有特异性的表达。颅颌面骨与牙体组织的发育都源于神经嵴,在基因的表达上可能存在一定的相似性,颌骨是颅面部重要的解剖结构之一,研究发现Taz与Runx2相互作用可以提高Runx2的转录活性,促进成骨细胞的分化,在骨形成过程中发挥重要的作用,由此我们推测Taz与Runx2可能参与颌骨的修复再生过程。基于我们的推测,本研究分为两部分,第一部分以Sprague Dawley大鼠为实验动物,通过免疫组化染色及实时荧光定量PCR观察Yap/Taz在大鼠下颌第一磨牙发育过程中的时空特异性表达及检测Yap/Taz相对表达量的变化情况;第二部分构建Sprague Dawley大鼠颌骨缺损模型,通过免疫组化染色及蛋白免疫印迹检测Taz及Runx2在大鼠颌骨缺损再生过程中的表达变化情况,为探究Yap/Taz在牙齿发育及颌骨组织再生中的作用提供理论依据。第一部分Yap/Taz在大鼠下颌第一磨牙发育过程中的时空特异性表达目的:建立Sprague Dawley大鼠牙齿发育模型,观察Yap/Taz在下颌第一磨牙发育中的时空特异性表达。方法:10周龄Sprague Dawley大鼠雌雄1:1合笼,次日检栓,阴栓出现的当天中午即为受孕0.5天。获取胚胎14.5(E14.5)、16.5和18.5天及新出生(PN0)、出生后3、7、14、21和28天牙齿发育标本,通过常规固定、脱钙、脱水及石蜡包埋后,利用苏木素-伊红染色(HE染色)观察大鼠磨牙的发育形态及利用免疫组织化学染色观察Yap/Taz的时空特异性表达。此外,通过实时荧光定量PCR技术从基因水平检测Yap/Taz在出生后(PN0、PN4、PN7、PN10)大鼠牙齿发育中相对表达量的变化。结果:(1)免疫组织化学染色结果:在E14.5和E16.5天,Yap/Taz在口腔上皮和间充质中呈阳性表达,在E18.5天,Yap/Taz表达于牙乳头和整个成釉器。随着牙胚发育,在PN0、PN3、PN7天,免疫组化染色观察在成釉细胞、中间层及成牙本质细胞中均有Yap/Taz的表达,同时,在PN7天,阳性的Yap/Taz表达于上皮根鞘,在PN3、PN7、PN14天,未矿化的釉质基质中存在Yap的表达。在PN21及PN28天,Yap/Taz在尚存在分泌功能的成牙本质细胞中弱表达,然而Taz在血管内皮细胞及牙周膜和牙槽骨等牙周组织中表达较为明显。(2)实时荧光定量PCR结果:通过实时荧光定量PCR检测PN0、PN4、PN7及PN10天下颌第一磨牙牙胚中Yap/Taz相对表达量的变化情况。结果显示Yap与Taz有相似的表达趋势,PN0天,Yap/Taz的表达量相对较低,随着牙胚发育至PN4及PN7天,Yap/Taz表达显着升高,PN10天,Yap/Taz表达又出现下降趋势。PN4及PN7天,Yap/Taz的表达量相近,均明显高于PN0及PN10天。结论:(1) Yap/Taz在大鼠下颌第一磨牙发育过程中呈特异性表达与定位。(2) Yap/Taz可能参与成釉细胞及成牙本质细胞的分化,釉质的矿化、牙冠和牙根的形成以及牙周组织发育。第二部分Taz在大鼠颌骨缺损再生过程中的初步研究目的:构建Sprague Dawley大鼠颌骨缺损模型,初步探究Taz在颌骨缺损再生过程中的作用。方法:从山东大学实验动物中心购买8周龄雄性Sprague Dawley大鼠20只,于大鼠两侧下颌骨约第一、第二磨牙颊侧构建颌骨缺损模型,分别于术后3、7、14及21天取材,通过免疫组化染色观察Taz及Runx2在颌骨缺损再生过程中的表达与定位,通过蛋白免疫印迹(Western blotting)检测颌骨缺损再生过程蛋白表达水平的变化。结果:(1)免疫组织化学染色结果:在颌骨愈合的第3天,免疫组化染色显示生物膜处附着少量成纤维细胞存在Taz及Runx2的阳性表达,周围的肌纤维中可见明显的Taz及Runx2阳性着色,此外,在牙槽骨中的血管内皮细胞也存在明显阳性表达;第7天,Taz在迁移至肉芽组织中的成纤维细胞以及血管内皮细胞中呈阳性表达;第14天,骨小梁呈现不规则的排列,胶原纤维在新生骨组织处为编织状且排列无序。与早期愈合阶段相比,第21天新生骨组织面积明显变大,且骨质相对致密,免疫组化染色可见在14及21天毛细血管内皮细胞、类骨质样组织部位有Taz与Runx2的阳性表达,此外Taz在骨陷窝处可见明显的阳性表达。(2)蛋白免疫印迹结果:在大鼠颌骨缺损修复过程中,Taz及Runx2均有表达。以GAPDH为内参,将Taz与Runx2进行标准化分析发现随着愈合时间延长,二者的表达量呈现相对升高的趋势。结论:(1)Taz及Runx2在大鼠颌骨缺损再生过程中呈特异性表达。(2)Taz及Runx2可能在大鼠颌骨缺损再生过程中发挥重要的调控作用。(本文来源于《山东大学》期刊2016-05-15)
张冰,唐翠竹,刘亭松,程媛媛,张云鹏[3](2014)在《Yap蛋白在大鼠牙齿发育中时空特异性表达的研究》一文中研究指出目的:通过研究不同发育阶段Wistar大鼠的下颌骨标本,观察Hippo信号通路中Yap蛋白在大鼠下颌第一磨牙及切牙不同阶段的时空特异性表达,为揭示Yap蛋白在大鼠牙周组织发育中的作用奠定基础。材料与方法:(一)材料:常规手术器械、4%多聚甲醛、10%EDTA(乙二胺四乙酸二钠)、Yap抗体(Cell Signaling Technology公司)、SABC二抗试剂盒(中杉公司)等。(二)方法:选取成年Wistar大鼠雄雌1:2交配,次日检栓,当天上午即为受孕0天。分别取胎龄14.5、16.5、18.5天大鼠胚胎头颅及出生后1、2、3、4周龄大鼠下颌骨,常规组织固定(4%多聚甲醛)、脱钙(10%EDTA)、脱水(梯度酒精)(本文来源于《2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛论文汇编》期刊2014-10-24)
胡艳,刘宏祥,徐文娟,单艳菊,束婧婷[4](2014)在《鸭胚胎发育早期MSTN A mRNA的时空表达特异性分析》一文中研究指出在哺乳动物上发现,肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)通过动态地调节骨骼肌前体细胞增殖与分化的稳态,调控发育期间的肌纤维数量,来抑制出生前肌肉的发育。前期研究发现鸭胚胎中后期肌肉生长抑制素(MSTN)的表达趋势和肌纤维数量形成高峰同步,推测MSTN可能与水禽胚胎期胸腿肌异步发育密切相关。在鸭胚胎发育早期,MSTN的时空表达顺序尚未见报道。本试验选(本文来源于《全国动物生理生化第七届全国代表大会暨第十叁次学术交流会论文摘要汇编》期刊2014-07-28)
胡艳,刘宏祥,徐文娟,单艳菊,束婧婷[5](2014)在《鸭胚胎发育早期MSTN A mRNA的时空表达特异性分析》一文中研究指出在哺乳动物上发现,肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)通过动态地调节骨骼肌前体细胞增殖与分化的稳态,调控发育期间的肌纤维数量,来抑制出生前肌肉的发育。前期研究发现鸭胚胎中后期肌肉生长抑制素(MSTN)的表达趋势和肌纤维数量形成高峰同步,推测MSTN可能与水禽胚胎期胸腿肌异步发育密切相关。在鸭胚胎发育早期,MSTN的时空表达顺序尚未见报道。本试验选(本文来源于《全国动物生理生化第七届全国代表大会暨第十叁次学术交流会论文摘要汇编》期刊2014-07-28)
郭红延,徐蓬,郭希民,杨成,王常勇[6](2005)在《大鼠牙胚发育早期核心结合因子1表达的时空特异性》一文中研究指出目的:探讨采用成骨细胞特异性转录因子核心结合因子1cDNA探针对大鼠不同时期牙胚进行原位杂交实验,以及其在牙胚发育过程中的表达。方法:实验于2003-05/08在北京军事医学科学院组织工程研究中心实验室完成。取SD孕期大鼠12只,利用核心结合因子1cDNA克隆产物,自行制备核心结合因子1cDNA探针,并对同笼后11d(蕾状期)、14d(帽状期)、17d(钟状早期)及出生后1d和9d(钟状晚期)4个时期的大鼠牙胚进行原位杂交实验,观察核心结合因子1在大鼠牙胚不同时期中的表达。结果:①大鼠牙胚蕾状期原位杂交可见明显阳性表达结果,其表达部位主要集中于牙胚及牙蕾顶部邻近的外胚间充质。②帽状期及钟状早期牙乳头、成牙本质细胞及成釉细胞均呈阳性表达。③钟状晚期表现于成牙本质细胞的表达明显下调,而成釉细胞呈阳性表达。结论:核心结合因子1在牙胚不同时期的表达有时空特异性,在大鼠牙胚发育早期即蕾状期的强阳性表达,表明核心结合因子1参与了牙胚的早期发育。(本文来源于《中国临床康复》期刊2005年26期)
发育时空特异性表达论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
Yap (Yes-associated protein)是重要的转录共激活因子,位于Hippo信号通路下游,首次于1995年在果蝇体内发现。有研究报道Yap在多种组织器官中均存在表达,例肠、肝脏及神经管等。Taz (transcriptional coactivator with PDZ-binding motif)是一个14-3-3结合蛋白,含有一个保守的WW结构域。Taz为Hippo信号通路下游另一个重要的转录因子,是Yap的旁系同源蛋白。经典的Hippo信号通路控制组织器官的大小主要是通过调控细胞的增殖以及凋亡来实现。文献研究证实Yap/Taz在调控器官大小、干细胞自我更新、增殖及分化等方面都发挥作用。近年来有关Yap在牙胚早期发育及小鼠切牙发育中的相关报道,但对于Yap在大鼠磨牙发育过程中的研究尚未见相关报道,此外,Taz作为Yap的同源蛋白,是否参与牙齿的发育尚无研究,由此我们推测Yap/Taz可能在大鼠磨牙发育中具有特异性的表达。颅颌面骨与牙体组织的发育都源于神经嵴,在基因的表达上可能存在一定的相似性,颌骨是颅面部重要的解剖结构之一,研究发现Taz与Runx2相互作用可以提高Runx2的转录活性,促进成骨细胞的分化,在骨形成过程中发挥重要的作用,由此我们推测Taz与Runx2可能参与颌骨的修复再生过程。基于我们的推测,本研究分为两部分,第一部分以Sprague Dawley大鼠为实验动物,通过免疫组化染色及实时荧光定量PCR观察Yap/Taz在大鼠下颌第一磨牙发育过程中的时空特异性表达及检测Yap/Taz相对表达量的变化情况;第二部分构建Sprague Dawley大鼠颌骨缺损模型,通过免疫组化染色及蛋白免疫印迹检测Taz及Runx2在大鼠颌骨缺损再生过程中的表达变化情况,为探究Yap/Taz在牙齿发育及颌骨组织再生中的作用提供理论依据。第一部分Yap/Taz在大鼠下颌第一磨牙发育过程中的时空特异性表达目的:建立Sprague Dawley大鼠牙齿发育模型,观察Yap/Taz在下颌第一磨牙发育中的时空特异性表达。方法:10周龄Sprague Dawley大鼠雌雄1:1合笼,次日检栓,阴栓出现的当天中午即为受孕0.5天。获取胚胎14.5(E14.5)、16.5和18.5天及新出生(PN0)、出生后3、7、14、21和28天牙齿发育标本,通过常规固定、脱钙、脱水及石蜡包埋后,利用苏木素-伊红染色(HE染色)观察大鼠磨牙的发育形态及利用免疫组织化学染色观察Yap/Taz的时空特异性表达。此外,通过实时荧光定量PCR技术从基因水平检测Yap/Taz在出生后(PN0、PN4、PN7、PN10)大鼠牙齿发育中相对表达量的变化。结果:(1)免疫组织化学染色结果:在E14.5和E16.5天,Yap/Taz在口腔上皮和间充质中呈阳性表达,在E18.5天,Yap/Taz表达于牙乳头和整个成釉器。随着牙胚发育,在PN0、PN3、PN7天,免疫组化染色观察在成釉细胞、中间层及成牙本质细胞中均有Yap/Taz的表达,同时,在PN7天,阳性的Yap/Taz表达于上皮根鞘,在PN3、PN7、PN14天,未矿化的釉质基质中存在Yap的表达。在PN21及PN28天,Yap/Taz在尚存在分泌功能的成牙本质细胞中弱表达,然而Taz在血管内皮细胞及牙周膜和牙槽骨等牙周组织中表达较为明显。(2)实时荧光定量PCR结果:通过实时荧光定量PCR检测PN0、PN4、PN7及PN10天下颌第一磨牙牙胚中Yap/Taz相对表达量的变化情况。结果显示Yap与Taz有相似的表达趋势,PN0天,Yap/Taz的表达量相对较低,随着牙胚发育至PN4及PN7天,Yap/Taz表达显着升高,PN10天,Yap/Taz表达又出现下降趋势。PN4及PN7天,Yap/Taz的表达量相近,均明显高于PN0及PN10天。结论:(1) Yap/Taz在大鼠下颌第一磨牙发育过程中呈特异性表达与定位。(2) Yap/Taz可能参与成釉细胞及成牙本质细胞的分化,釉质的矿化、牙冠和牙根的形成以及牙周组织发育。第二部分Taz在大鼠颌骨缺损再生过程中的初步研究目的:构建Sprague Dawley大鼠颌骨缺损模型,初步探究Taz在颌骨缺损再生过程中的作用。方法:从山东大学实验动物中心购买8周龄雄性Sprague Dawley大鼠20只,于大鼠两侧下颌骨约第一、第二磨牙颊侧构建颌骨缺损模型,分别于术后3、7、14及21天取材,通过免疫组化染色观察Taz及Runx2在颌骨缺损再生过程中的表达与定位,通过蛋白免疫印迹(Western blotting)检测颌骨缺损再生过程蛋白表达水平的变化。结果:(1)免疫组织化学染色结果:在颌骨愈合的第3天,免疫组化染色显示生物膜处附着少量成纤维细胞存在Taz及Runx2的阳性表达,周围的肌纤维中可见明显的Taz及Runx2阳性着色,此外,在牙槽骨中的血管内皮细胞也存在明显阳性表达;第7天,Taz在迁移至肉芽组织中的成纤维细胞以及血管内皮细胞中呈阳性表达;第14天,骨小梁呈现不规则的排列,胶原纤维在新生骨组织处为编织状且排列无序。与早期愈合阶段相比,第21天新生骨组织面积明显变大,且骨质相对致密,免疫组化染色可见在14及21天毛细血管内皮细胞、类骨质样组织部位有Taz与Runx2的阳性表达,此外Taz在骨陷窝处可见明显的阳性表达。(2)蛋白免疫印迹结果:在大鼠颌骨缺损修复过程中,Taz及Runx2均有表达。以GAPDH为内参,将Taz与Runx2进行标准化分析发现随着愈合时间延长,二者的表达量呈现相对升高的趋势。结论:(1)Taz及Runx2在大鼠颌骨缺损再生过程中呈特异性表达。(2)Taz及Runx2可能在大鼠颌骨缺损再生过程中发挥重要的调控作用。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
发育时空特异性表达论文参考文献
[1].孙白羽.大鼠切牙发育过程中YAP/TAZ时空特异性表达研究[C].2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会论文汇编.2016
[2].张冰.Yap/Taz在大鼠磨牙发育及颌骨缺损再生过程中的时空特异性表达[D].山东大学.2016
[3].张冰,唐翠竹,刘亭松,程媛媛,张云鹏.Yap蛋白在大鼠牙齿发育中时空特异性表达的研究[C].2014全国口腔生物医学学术年会暨“西湖国际”口腔医学高峰论坛论文汇编.2014
[4].胡艳,刘宏祥,徐文娟,单艳菊,束婧婷.鸭胚胎发育早期MSTNAmRNA的时空表达特异性分析[C].全国动物生理生化第七届全国代表大会暨第十叁次学术交流会论文摘要汇编.2014
[5].胡艳,刘宏祥,徐文娟,单艳菊,束婧婷.鸭胚胎发育早期MSTNAmRNA的时空表达特异性分析[C].全国动物生理生化第七届全国代表大会暨第十叁次学术交流会论文摘要汇编.2014
[6].郭红延,徐蓬,郭希民,杨成,王常勇.大鼠牙胚发育早期核心结合因子1表达的时空特异性[J].中国临床康复.2005