导读:本文包含了非洲爪蟾卵母细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,非洲,受体,乙酰胆碱,成熟,门控,体外。
非洲爪蟾卵母细胞论文文献综述
叶炎生,刘晓黎,刘买利,李从刚[1]（2014）在《非洲爪蟾卵母细胞内蛋白质的~(19)F NMR研究》一文中研究指出细胞内蛋白质的核磁共振技术(Protein In-cell NMR)能在原子分辨水平提供细胞内蛋白质的构象和功能信息,并已应用到非洲爪蟾卵母细胞系[1-3]。该细胞系是大量生物学研究常用到的动物细胞模型。然而因为细胞内环境极为复杂以及常规核磁方法本身存在的局限性,爪蟾卵母细胞内蛋白质的研究依然很少被报道。在此,我们将19F NMR应用于非洲爪蟾卵母细胞内蛋白质(包括GB1,泛素,钙调蛋白以及无结构蛋白α突出核蛋白)的研究。我们发现卵母细胞内蛋白质的19F信号线宽与相应蛋白在大肠杆菌细胞内的线宽相比较为接近或窄化(图1)[4,5]。与此同时,我们观测到钙调蛋白在细胞内发生了构象变化(从Ca2+结合到Apo态的改变,图2)。因此,我们认为19F NMR将是个很有应用前景的研究技术以用于非洲爪蟾卵母细胞内蛋白质的研究。(本文来源于《第十八届全国波谱学学术年会论文集》期刊2014-10-10）
曹闪,楼钦钦,魏无际,秦占芬[2]（2014）在《孕酮诱导非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)试验方法的优化及干扰物质筛查》一文中研究指出非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)是生物学上研究卵细胞成熟过程及其机制的良好模型。由于GVBD受激素的调控,曾有研究将孕酮诱导的非洲爪蟾GVBD试验用于内分泌干扰物的筛查。通过预注射人体绒毛膜促性腺激素(HCG)提高非洲爪蟾卵母细胞对孕酮的敏感性、缩小个体差异,缩短试验时间等优化GVBD试验方法;并选用甲氧氯作为阳性参照物对优化的方法进行验证,最后用此方法研究了米非司酮、来曲唑、咪鲜胺3种化学物质对孕酮诱导GVBD的影响。结果发现,甲氧氯对GVBD的发生具有明显抑制作用,随着剂量的增加抑制作用增强,显示优化方法的可靠性。米非司酮作为孕酮受体拮抗剂,没有表现出抑制GVBD的效应,证明孕酮诱导爪蟾GVBD并非完全由孕酮受体(PR)介导。同时,来曲唑和咪鲜胺对孕酮诱导爪蟾GVBD没有影响,显示此两种物质在孕酮诱导GVBD过程中不具有内分泌干扰作用。(本文来源于《生态毒理学报》期刊2014年01期）
于津鹏,朱晓鹏,邴晖,长孙东亭,罗素兰[3]（2013）在《α7乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞上的表达》一文中研究指出α7烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)是脑胆碱能神经系统中的一个重要部分,并且它与副交感神经系统末端的胆碱能抗炎通路相互联系。脑中的α7 nAChRs的作用涉及中枢神经系统的认知功能,故其激动剂和拮抗剂可用于多个认知功能障碍和炎症相关疾病的治疗,以及疾病机理的研究。其小分子激动剂能穿过血脑屏障且适用于多种认知功能障碍的治疗,如阿尔兹海默病和精神分裂症;其拮抗剂是激动剂的一个异构物家族,以芋螺毒素和金环蛇毒素为主要代表。因而,α7nAChRs已成为筛选与之相关的疾病治疗药物的重要靶点。虽然α7 nAChRs的特异性药物还没有进行临床试验,但近期的研究数据已显示出这一类药物具有很好的应用前景。实验采取体外转录的方法,将α7 nAChRs的基因在体外转录合成cRNA,并通过显微注射法注入非洲爪蟾卵母细胞(蛙卵),诱导培养使α7受体在细胞膜上表达,并运用双电极电压钳技术对表达的受体进行检测。结果显示,α7 nAChRs在蛙卵体内成功表达,并记录到了与ACh浓度呈正相关的内向电流,而且在蛙卵细胞内表达的α7受体模型与天然受体具有相同的结构和功能,可以用于筛选特异性作用于α7 nAChRs的药物或先导化合物。成功地建立了用于药物筛选的α7 nAChRs表达模型。(本文来源于《第十一届中国生物毒素研究及医药应用年会论文摘要集》期刊2013-10-17）
沈立姿,于津鹏,房立丛,朱晓鹏,胡远艳[4]（2013）在《肌肉型乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞中的表达》一文中研究指出建立肌肉型乙酰胆碱受体(胎儿型α1β1δγ和成年型α1β1δε)在非洲爪蟾卵母细胞中的表达模型,用于以这两种受体为靶点的药物筛选。将肌肉型乙酰胆碱受体的各个亚基基因在体外转录获得各自的cRNA,显微注射到非洲爪蟾卵母细胞中,利用双电极电压钳技术检测其表达情况,并确定不同浓度的乙酰胆碱对胎儿型α1β1δγ和成年型α1β1δε受体电流表达情况的影响。在卵母细胞中成功表达两种肌肉型乙酰胆碱受体;当乙酰胆碱浓度为1μmol/L时,α1β1δγ和α1β1δε受体电流很小,不能用于后续的检测试验,当浓度为5μmol/L时,完全激活α1β1δγ受体的开放电流达到最大6025 nA,当浓度为20μmol/L时,完全激活α1β1δε受体的开放电流达到最大2 742 nA,只注射ddH2O的对照组细胞则没有任何电流产生。该受体模型的成功建立,为筛选作用于肌肉型乙酰胆碱受体的药物提供了实验模型。(本文来源于《药物生物技术》期刊2013年04期）
张伦,高舒,彭志晴,侯丽颖,吴坤[5]（2013）在《芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及其作用机制》一文中研究指出目的:探讨不同浓度的芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制。方法:将健康的非洲爪蟾卵母细胞移入含不同浓度(0、20、80、160和500μmol/L)的芹菜素培养液中培养,另设阳性对照(孕酮5μg/mL)组。每隔1h观察生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)发生情况、并记录发生GVBD的细胞数目;同时用10%的叁氯乙酸固定,观察细胞核的变化;采用荧光染色法在激光共聚焦显微镜下观察细胞染色体的变化。收集上述各浓度芹菜素处理8h后的卵母细胞,采用Western blot法检测卵母细胞成熟相关蛋白p-Erk1、Mos和CyclinB2的表达。结果:与阴性对照组相比,当芹菜素浓度为80~500μmol/L且作用时间在4~8h时,卵母细胞GVBD发生率均明显升高(P均<0.05)。在80~500μmol/L芹菜素处理细胞8h后,p-Erk1、Mos和CyclinB2蛋白表达量明显高于阴性对照组(P<0.05)。结论:芹菜素在卵母细胞体外培养过程中促进了第1次减数分裂的开启,其机制可能与MPF和MAPK信号通路的活化有关。(本文来源于《癌变·畸变·突变》期刊2013年04期）
房立丛,沈立姿,于津鹏,朱晓鹏,胡远艳[6]（2013）在《受体在非洲爪蟾卵母细胞上表达方法的优化》一文中研究指出通过改变非洲爪蟾卵母细胞的消化时间、消化次数、消化用酶量等,优化乙酰胆碱受体的表达条件。结果显示,采用两步消化法,在经过0.5 mg/mL的胶原酶消化50-70 min之后得到的非洲爪蟾卵母细胞的状态较好,利于受体的表达;同时优化了受体在非洲爪蟾卵母细胞上的表达条件。试验所获得的优化表达条件对建立非洲爪蟾卵母细胞受体表达体系具有重要意义。(本文来源于《生物技术通报》期刊2013年06期）
范宗兴[7]（2013）在《非洲爪蟾卵母细胞抽提物诱导和牛体细胞重编程及其对核移植胚胎生产效率影响》一文中研究指出体细胞核移植已有近20年的发展历史，但其总效率仍然很低。目前认为是高度分化的体细胞在卵母细胞质中重编程不完全，表观遗传修饰异常所致。本研究采用非洲爪蟾卵母细胞抽提物诱导和牛胎儿成纤维细胞重编程，使其恢复到一个较低的分化状态；并以发生重编程的细胞为核供体进行体细胞核移植，研究其对总效率的影响。1.爪蟾卵母细胞抽提物的提取通过超数排卵获得爪蟾卵母细胞，10000rpm离心获得M期爪蟾卵母细胞抽提物，蛋白含量分析显示，叁次提取的抽提物蛋白浓度均为25-35μg/μL。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示，叁次提取抽提物所包含蛋白种类一致，成功建立爪蟾卵母细胞抽提物提取体系。2.抽提物诱导供体细胞的重编程本研究采集40日龄和牛胎儿的皮肤组织，采用组织块贴壁法建立和牛胎儿成纤维细胞系。通过绘制细胞生长曲线和分析染色体核型，结果显示该细胞系在3-6d细胞处于对数生长期，染色体倍型正常（2n=60）说明细胞系具有良好的生长状态。应用细胞膜透化剂digitonin对获得的和牛胎儿成纤维细胞进行通透处理，筛选出透化剂最适浓度为7μg/mL，PI染色显示透化效率为55%。然后将非洲爪蟾卵母细胞抽提物与经过通透处理的和牛胎儿成纤维细胞共孵育1h，孵育完毕后用含Ca2+培养基封闭细胞并继续培养，24h后免疫荧光染色发现，与未处理细胞相比，其组蛋白H3K9乙酰化程度降低；培养6-7d后细胞聚集形成“克隆簇”，且碱性磷酸酶染色呈阳性，免疫荧光染色和western blot分析均检测到“克隆簇”细胞表达Oct4蛋白；同时检测到多能性标志基因Oct4和Nanog基因在其中的表达，但Sox2基因未见表达；qPCR结果显示，抽提物处理后分别培养4、5、6d的细胞中，Oct4、Nanog基因表达量依次呈上升趋势。3.体细胞克隆胚胎的制备采用点击去核法与无透明带融合法相结合制备克隆胚胎。以常规和牛胎儿成纤维细胞为核供体，比较离子霉素+6-DMAP和A23187+6-DMAP两种激活方法对克隆胚胎体外发育率的影响，结果说明，两者在分裂率和囊胚率均无显着差异（92.16%1.76vs92.28%2.14；23.21%1.63vs24.18%4.18）。分别以抽提物处理和非处理细胞作为核供体，比较两种细胞对核移植效率的影响，结果两种细胞在融合率（92.83%1.11vs96.04%1.52）、卵裂率（89.64%7.49vs89.783.65）和囊胚率（24.06%6.91vs23.12%6.80）均无显着差异。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2013-06-01）
高舒,黄晓莉,任晓梅,陈俭静,赵栋[8]（2012）在《叶酸对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制》一文中研究指出目的探讨叶酸(folic acid,FA)对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制。方法将健康卵母细胞移入含不同浓度FA(分别为125μmol/L、250μmol/L、500μmol/L和1 000μmol/L)的ND96培养液中体外培养,同时设立阴性对照组和孕酮阳性对照组。加FA后每隔1 h观察1次细胞生发泡破裂(germinal vesicle break-down,GVBD),记录发生GVBD的卵母细胞数量,计算GVBD率,同时用10%叁氯乙酸溶液固定后,切开进行确认。观察6 h后收集各组卵母细胞,采用蛋白免疫印迹实验(Western Blotting)检测CyclinB2,Mos,p-ERK1/ERK1蛋白的表达。结果除FA 125μmol/L、250μmol/L、500μmol/L、1 000μmol/L组2 h时与空白对照组GVBD率之间差异无统计学意义,其余各记录点的GVBD率与空白对照组间差异均有统计学意义(均有P<0.05);Western Blotting分析显示,FA和孕酮处理后卵母细胞的p-ERK1,CyclinB2,Mos蛋白表达水平明显升高。结论 FA可促进爪蟾卵母细胞体外成熟过程中GVBD发生,提示FA对爪蟾卵母细胞的成熟具有促进作用,其作用机制可能与干扰成熟促进因子和丝裂原活化蛋白激酶有关。(本文来源于《中华疾病控制杂志》期刊2012年08期）
王栋,王书惠,白吉祥[9]（2012）在《敌百虫对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响》一文中研究指出本文观测敌百虫(TCF)对非洲蟾蜍卵母细胞体外成熟过程中生发泡破裂(GVBD)的影响,对TCF生殖毒性机制进行初步探讨。用不同剂量TCF预处理卵母细胞,用孕酮刺激卵母细胞后4、8小时观察卵母细胞动物极出现白斑(white spot)情况,并用叁氯乙酸固定卵母细胞后切开确认是否发生GVBD。结果显示不同剂量的敌百虫对卵母细胞的GVBD有影响。(本文来源于《中国科技投资》期刊2012年21期）
于海鹏,李宝珠,房立丛,沈立姿,朱晓鹏[10]（2012）在《乙酰胆碱受体α4β2亚型在非洲爪蟾卵母细胞中的表达》一文中研究指出通过建立乙酰胆碱受体α4β2亚型(α4β2 nAChR)在非洲爪蟾卵母细胞中的表达模型,以便以α4β2 nAChR为作用靶点进行药物筛选。将乙酰胆碱受体亚基基因α4、β2体外转录获得的cRNA,通过显微注射的方法注入非洲爪蟾卵母细胞,并对该受体的表达情况进行检测。结果显示,乙酰胆碱受体α4β2亚型在蛙卵细胞中获得了有效表达,记录到典型的ACh配体门控的离子通道内向电流。(本文来源于《生物技术通报》期刊2012年04期）
非洲爪蟾卵母细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)是生物学上研究卵细胞成熟过程及其机制的良好模型。由于GVBD受激素的调控,曾有研究将孕酮诱导的非洲爪蟾GVBD试验用于内分泌干扰物的筛查。通过预注射人体绒毛膜促性腺激素(HCG)提高非洲爪蟾卵母细胞对孕酮的敏感性、缩小个体差异,缩短试验时间等优化GVBD试验方法;并选用甲氧氯作为阳性参照物对优化的方法进行验证,最后用此方法研究了米非司酮、来曲唑、咪鲜胺3种化学物质对孕酮诱导GVBD的影响。结果发现,甲氧氯对GVBD的发生具有明显抑制作用,随着剂量的增加抑制作用增强,显示优化方法的可靠性。米非司酮作为孕酮受体拮抗剂,没有表现出抑制GVBD的效应,证明孕酮诱导爪蟾GVBD并非完全由孕酮受体(PR)介导。同时,来曲唑和咪鲜胺对孕酮诱导爪蟾GVBD没有影响,显示此两种物质在孕酮诱导GVBD过程中不具有内分泌干扰作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
非洲爪蟾卵母细胞论文参考文献
[1].叶炎生,刘晓黎,刘买利,李从刚.非洲爪蟾卵母细胞内蛋白质的~(19)FNMR研究[C].第十八届全国波谱学学术年会论文集.2014
[2].曹闪,楼钦钦,魏无际,秦占芬.孕酮诱导非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)试验方法的优化及干扰物质筛查[J].生态毒理学报.2014
[3].于津鹏,朱晓鹏,邴晖,长孙东亭,罗素兰.α7乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞上的表达[C].第十一届中国生物毒素研究及医药应用年会论文摘要集.2013
[4].沈立姿,于津鹏,房立丛,朱晓鹏,胡远艳.肌肉型乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞中的表达[J].药物生物技术.2013
[5].张伦,高舒,彭志晴,侯丽颖,吴坤.芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及其作用机制[J].癌变·畸变·突变.2013
[6].房立丛,沈立姿,于津鹏,朱晓鹏,胡远艳.受体在非洲爪蟾卵母细胞上表达方法的优化[J].生物技术通报.2013
[7].范宗兴.非洲爪蟾卵母细胞抽提物诱导和牛体细胞重编程及其对核移植胚胎生产效率影响[D].中国农业科学院.2013
[8].高舒,黄晓莉,任晓梅,陈俭静,赵栋.叶酸对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制[J].中华疾病控制杂志.2012
[9].王栋,王书惠,白吉祥.敌百虫对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响[J].中国科技投资.2012
[10].于海鹏,李宝珠,房立丛,沈立姿,朱晓鹏.乙酰胆碱受体α4β2亚型在非洲爪蟾卵母细胞中的表达[J].生物技术通报.2012
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