敲低细胞色素C氧化酶亚基4(COX4)通过增加CXCR4表达促进人肝癌细胞侵袭和迁移

论文摘要

目的探讨细胞色素C氧化酶亚基4 （COX4）表达下调对肝癌侵袭的影响及其机制。方法免疫组织化学染色法检测肝癌及癌旁组织中COX4的表达,结合临床病理资料分析肝癌组织中COX4表达水平与肝癌临床病理指标的相关性。利用小干涉RNA（siRNA）敲低SNU-739及SNU-368肝癌细胞COX4的水平, TranswellTM检测细胞的侵袭能力,免疫荧光细胞化学染色检测肝癌细胞CXC趋化因子受体4（CXCR4）表达, Western blot法检测癌细胞CXCR4蛋白水平, Mitosox染色检测线粒体活性氧（ROS）水平。利用还原剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）降低细胞内ROS水平, Western blot法检测肝癌细胞CXCR4蛋白水平的改变。利用AMD3100抑制CXCR4作用, TranswellTM法检测敲低COX4后肝癌细胞的侵袭能力。结果与癌旁组织相比,肝癌组织中COX4表达水平显著降低, COX4低表达与肝癌TNM分期晚,分化程度差显著正相关, COX4表达水平越低的患者预后越差,复发率越高。敲低肝癌细胞COX4水平后,肝癌SNU-739细胞及SNU-368细胞的侵袭能力显著增强,同时细胞内线粒体ROS水平及细胞CXCR4水平均显著升高。还原剂NAC可显著降低COX4干涉所诱导的CXCR4表达上调。抑制剂AMD3100可显著抑制COX4干涉所介导的侵袭能力增强。结论敲低COX4水平上调线粒体ROS水平增强CXCR4表达促进肝癌细胞的侵袭。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 免疫组织化学染色法检测肝癌组织COX4的表达并分析与临床病理指标的关系
•     1.2.2 Western blot法检测培养的不同肝癌细胞中COX4的蛋白水平
•     1.2.3 利用siRNA技术敲低肝癌细胞COX4的表达
•     1.2.4 Western blot法检测肝癌细胞COX4的干涉效果
•     1.2.5 TranswellTM实验检测敲低COX4后肝癌细胞的侵袭能力的改变
•     1.2.6 Western blot法检测干涉肝癌细胞COX4后CXCR4含量
•     1.2.7 免疫荧光细胞化学染色检测肝癌细胞COX4、 CXCR4的表达
•     1.2.8 TranswellTM实验检测肝癌细胞侵袭能力的改变
•     1.2.9 MitoSOX探针检测COX4敲低后肝癌细胞线粒体ROS水平的改变
•     1.2.10 Western blot法检测敲低COX4, 使用还原剂NAC抑制线粒体ROS后CXCR4水平的改变
•     1.2.11 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 肝癌组织中COX4表达下调且与肝癌的预后相关
•   2.2 敲低肝癌细胞COX4的表达可显著增强肝癌细胞的侵袭能力
•   2.3 敲低COX4后促进肝癌细胞CXCR4的表达
•   2.4 阻断CXCR4作用后, 抑制肝癌细胞侵袭转移
•   2.5 敲低COX4增强线粒体ROS 生成诱导CXCR4表达
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 袁冲,吴丹,何元方,周幸春,张静,杨帆

关键词: 肝癌,细胞色素氧化酶亚基,活性氧,趋化因子受体,细胞侵袭

来源: 细胞与分子免疫学杂志 2019年10期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 延安大学医学院,空军军医大学基础医学院教学实验中心,空军军医大学基础医学院病理学教研室,陕西省人民医院

基金: 陕西省自然科学基金(2018JM7033)

分类号: R735.7

DOI: 10.13423/j.cnki.cjcmi.008925

页码: 918-925

总页数: 8

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