干酪乳杆菌胞外多糖诱导小鼠骨髓来源树突细胞成熟以及分泌IL-6、TGF-β和IL-23

干酪乳杆菌胞外多糖诱导小鼠骨髓来源树突细胞成熟以及分泌IL-6、TGF-β和IL-23

论文摘要

为研究干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)促进体外培养的小鼠未成熟骨髓来源树突细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)成熟的作用,分析不同剂量的EPS对BMDCs分泌细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-6、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和IL-23的影响,并检测EPS对BMDCs抗原提呈能力的影响。首先从干酪乳杆菌中分离纯化出EPS,并检测EPS的纯度;把从BALB/c小鼠体内分离出的骨髓细胞分化为BMDCs,未成熟BMDCs分别与磷酸盐缓冲液、不同剂量EPS和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)体外培养,采用流式细胞法检测了BMDCs成熟表面标记物MHC II和CD86的表达,酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法分析了IL-6、TGF-β和IL-23的表达量,CCK-8法检测了BMDCs与小鼠脾淋巴细胞的混合培养体系中淋巴细胞的增殖率。结果表明:分离出EPS的纯度约为95%;EPS能够上调BMDCs表面MHC II和CD86的表达量;EPS可以显著促进BMDCs分泌IL-6、TGF-β和IL-23(P<0.05),但促进水平低于LPS;EPS可以明显促进BMDCs刺激异基因淋巴细胞的增殖。综上所述,在体外实验中,干酪乳杆菌EPS能够促进BALB/c小鼠BMDCs的成熟,诱导BMDCs分泌与辅助性T17细胞分化和增殖相关的细胞因子IL-6、TGF-β和IL-23,并且可以增强BMDCs的抗原提呈能力。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 动物、材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 L.casei EPS的制备
  •     1.3.2 L.casei EPS中糖含量的检测
  •     1.3.3 骨髓来源树突细胞的诱导
  •     1.3.4 BMDCs的鉴定
  •     1.3.5 EPS处理的BMDCs表面标记物CD86和MHC II的检测
  •     1.3.6 EPS处理的BMDCs分泌IL-6、TGF-β和IL-23的检测
  •     1.3.7 EPS对淋巴细胞增殖影响的测定
  •   1.4 数据统计与分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 多糖纯度的测定分析
  •   2.2 诱导出BMDCs的鉴定
  •   2.3 EPS对BMDCs成熟的影响
  •     2.3.1 EPS对BMDCs表达MHC II的影响
  •     2.3.2 EPS对BMDCs表达CD86的影响
  •   2.4 EPS对DCs分泌与Th17细胞分化增殖相关的细胞因子的影响
  •   2.5 EPS影响BMDCs对异基因淋巴细胞增殖的刺激作用
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 任琦琦,任皓威,杨翠翠,刘宁

    关键词: 干酪乳杆菌,胞外多糖,树突细胞,成熟,细胞因子,分泌,抗原提呈

    来源: 食品科学 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学,轻工业手工业

    单位: 东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室

    基金: 教育部创新团队基金项目(IRT-0959-202),哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(2011RFXXN042)

    分类号: TS201.3

    页码: 175-182

    总页数: 8

    文件大小: 1271K

    下载量: 152

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