镍亲和层析论文_许艳,万敏,张培因,卫红飞,王丽颖

导读:本文包含了镍亲和层析论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:层析,组氨酸,白细胞,亲和,蛋白,论文,镍亲合。

镍亲和层析论文文献综述

许艳,万敏,张培因,卫红飞,王丽颖^[1]（2004）在《六聚组氨酸在重组蛋白中的位置对镍亲和层析的影响》一文中研究指出目的研究六聚组氨酸在重组蛋白中的位置对镍亲和层析的影响。方法采用PCR法扩增目的基因,克隆人pMD18-T载体后进行序列测定。构建原核表达载体pET28-His-Cpn10-IL4与pET28-Cpn10-His-IL-4,在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中表达两种在不同位置带有六聚组氨酸(His-tag)的重组白细胞介素4(rhIL-4)融合蛋白。用SDS-PAGE、Western印迹鉴定表达产物,采用镍亲和层析的方法纯化两种重组融合蛋白。结果Western印迹证实两种融合蛋白均可与抗组氨酸单克隆抗体特异性结合,但用镍亲和层析方法可以很好地分离纯化融合蛋白His-Cpn10-IL-4,却不能纯化融合蛋白Cpn10-His-IL-4。结论应用镍亲和层析的方法纯化融合蛋白时,His-tag在融合蛋白中的位置对蛋白质的纯化非常重要,His-tag可以在融合蛋白的N端和C端,但不能在中间。(本文来源于《医学分子生物学杂志》期刊2004年02期）