导读:本文包含了草鱼白细胞介素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:草鱼,白细胞,基因,炎症,机制,免疫调节,基因组。
草鱼白细胞介素论文文献综述
简晓玉[1]（2019）在《草鱼白细胞介素21的免疫功能鉴定及其作用机制研究》一文中研究指出哺乳动物白细胞介素21(interleukin-21,IL-21)是一种含四?螺旋簇结构的新型细胞因子,属于共用受体?链家族成员,主要由活化的CD4~+T细胞以及自然杀伤T(natural killer T,NKT)细胞产生,且在Th17细胞以及滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell,Tfh)类群中高表达。IL-21作为一种多效性的细胞因子,能够作用于不同的免疫细胞以及非免疫细胞,在固有和获得性免疫系统中均发挥重要作用。尽管哺乳动物IL-21的功能研究已较为透彻,但硬骨鱼IL-21的免疫调节功能还知甚少,仅有虹鳟IL-21的部分功能被报道。本研究拟探究草鱼IL-21的免疫学功能。为此,首先克隆获得草鱼IL-21(Grass carp IL-21,gcIL-21)的编码序列(Coding sequence,CDS),共450 bp,编码149个氨基酸。然后,构建原核表达系统并结合变复性方法获得重组草鱼IL-21蛋白(Recombinant gcIL-21,rgcIL-21),再利用此蛋白制备草鱼IL-21多克隆抗体并验证抗体特异性。之后,使用此抗体,以草鱼头肾白细胞(Head kidney leukocytes,HKLs)为模型,免疫印迹实验检测培养基上清中草鱼IL-21的蛋白表达量,结果表明热失活的嗜水气单胞菌能够明显促进HKLs分泌草鱼IL-21,提示草鱼IL-21可能参与调节炎症反应。随后,rgcIL-21的生物学活性被验证,结果显示rgcIL-21能够上调HKLs中草鱼IFN-γ和SCOC3的mRNA表达。进一步研究发现,rgcIL-21处理草鱼HKLs后,能够以时间和剂量依赖方式显着刺激草鱼IL-10的mRNA表达,并促进草鱼IL-10的蛋白分泌,提示草鱼IL-21可能通过诱导IL-10的产生发挥免疫抑制作用。相关机制研究发现,MAPK信号通路中的MEK和JNK信号通路部分参与了rgcIL-21对草鱼IL-10基因表达的调控,并且,rgcIL-21能够上调STAT3的磷酸化水平,激活STAT3信号通路。与rgcIL-21对IL-10的调控作用一致的是,rgcIL-21能够显着下调热失活的嗜水气单胞菌刺激的HKLs中促炎因子TNF-?和IL-1?的mRNA表达,进一步提示了草鱼IL-21的免疫抑制作用。与此同时,体内实验也表明腹腔注射rgcIL-21一天后能够提高感染了嗜水气单胞菌的草鱼的存活率,并减轻致病菌感染引起的病理反应。本研究首次鉴定了草鱼IL-21的免疫学功能,特别揭示了它在细菌感染的炎症过程中发挥的免疫抑制作用。(本文来源于《电子科技大学》期刊2019-04-01）
江红霞,凌洁彬,叶凯甲,李学军[2]（2019）在《铜和镉对草鱼肾脏中3种白细胞介素基因表达的影响》一文中研究指出为探讨水体铜(Cu)和镉(Cd)污染对草鱼免疫系统的影响,本研究利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)技术,分析在不同时间(2、4、6、8 d)及不同质量浓度的Cu~(2+)(0.10、0.20、0.40、0.60、0.80 mg/L)和Cd~(2+)(0.05、0.10、0.20、0.30、0.40 mg/L)暴露下,草鱼肾脏中3种白细胞介素——白细胞介素-1β、白细胞介素-8和白细胞介素-10基因表达量的变化。试验结果显示,高质量浓度和长时间的Cu~(2+)暴露(0.60、0.80 mg/L, 8 d)和Cd~(2+)暴露(0.20、0.30、0.40 mg/L, 8 d)下,草鱼肾脏中的白细胞介素-1β、白细胞介素-8和白细胞介素-10基因表达量与对照组相比显着增加(P<0.05);在0.80 mg/L Cu~(2+),0.30、0.40 mg/L Cd~(2+)暴露下的草鱼肾脏中白细胞介素-1β的基因表达量,以及在0.60、0.80 mg/L Cu~(2+)暴露下的草鱼肾脏中白细胞介素-8和白细胞介素-10的基因表达量,均随着暴露时间的增加而逐渐升高,且第8 d时的基因表达量均显着高于第2 d时(P<0.05)。本研究揭示了高质量浓度和长时间的Cu~(2+)、Cd~(2+)暴露会使草鱼肾脏产生炎症反应,为进一步深入研究重金属对鱼类的免疫毒性机制奠定了基础。(本文来源于《水产科学》期刊2019年02期）
吕梦圆,周红,汪新艳[3]（2018）在《草鱼白细胞介素-2的重组表达及功能鉴定》一文中研究指出白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)又被称为T细胞生长因子(T cell growth factor,TCGF),是IL-2家族中的一员。在哺乳动物中,IL-2能够促进T细胞的增殖和分化;不仅如此,它还是细胞毒性T淋巴细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞的生长因子和刺激因子,因而被用于黑色素瘤等癌症的治疗。鱼类il2基因早在2005年就从红鳍东方鲀中发现,但至今,有关鱼类Il-2功能的认识仍然相对匮乏。在本研究中,我们获得了草鱼Il-2全长编码序列,它编码一个含141个氨基酸的蛋白。生物信息学分析显示:该蛋白由含20个氨基酸的信号肽和121个氨基酸的成熟肽构成,可能含有3对二硫键。荧光实时定量PCR检测显示:草鱼il2 mRNA在胸腺和心脏中表达量最高,在鳃、头肾和肌肉中次之,在肠,脑,中肾,脾和皮肤中表达量较低。通过原核表达及变复性的方法,我们获得了重组草鱼Il-2蛋白(rgcIl-2)。体外实验发现:1)rgcIl-2可促进草鱼头肾白细胞(HKLs)的增殖,且它可显着上调HKLs中ifng及foxp3mRNA的表达。这说明在草鱼头肾中,Il-2可能参与T细胞的增殖和分化;2)在同一细胞模型中,rgcIl-2极显着上调穿孔素和颗粒酶的mRNA水平(近10倍),暗示Il-2可以刺激HKLs中的某类胞毒性细胞。进而,我们通过CFSE/PI双染结合流式细胞术分析发现:rgcIl-2刺激的HKLs对草鱼肾细胞株的杀伤作用相对未刺激组有显着提高,但具体刺激的胞毒细胞类型还需要深入研究确定。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集》期刊2018-10-25）
邱兴阳,尹里程,冯诗雨,周红[4]（2018）在《草鱼白细胞介素12受体的分离鉴定》一文中研究指出哺乳动物中,白细胞介素12(Interleukin 12, IL-12)主要由活化的巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞产生;其主要功能是促进T辅助细胞1(T helper cell 1,Th1)的分化和增殖,以及诱导T细胞或NK细胞分泌干扰素-gamma(Interferon-gamma,IFN-γ),进而在先天免疫和获得性免疫中发挥重要作用。IL-12是一种异源二聚体细胞因子,由p35和p40两个亚基通过链间二硫键连接构成,而IL-12受体(IL-12R)由IL-12Rβ1(识别IL-12 p40亚基)和IL-12Rβ2(识别IL-12 p35亚基)两个亚基构成。由于硬骨鱼在进化过程中发生过特有的基因组复制事件,导致多拷贝基因的存在。因此,相比哺乳动物而言,硬骨鱼细胞因子功能分化更为复杂而特殊。事实上,多数硬骨鱼IL-12的两个亚基(p35和p40)均由多基因编码,提示可能存在多种IL-12异构体。有趣的是,与之对应的受体也可能存在多基因编码。我们的研究表明草鱼IL-12p35亚基的受体IL-12Rβ2存在至少两个基因拷贝,一个是与哺乳动物具有保守邻位基因的IL-12Rβ2.a,另一个是单独存在于鱼类中的IL-12Rβ2.b,虽然两个基因的基因组定位不一样,但是从两者的结构域预测分析上来看,在胞外区都具有叁个Ⅲ型纤连蛋白(FN3)结构域,即较高的结构相似性。而草鱼IL-12p40亚基的受体IL-12Rβ1存在两种剪接体形式,其中一个为完整转录子;另外一个剪接体中12号外显子缺失,而12号外显子所对应编码的氨基酸序列可以形成Ⅲ型纤连蛋白(FN3)结构域,此结构域是结合配体和信号转导的基础,可能会影响与IL-12的结合。现在上述受体及其异构体的真核表达质粒都已构建,准备将其转染进草鱼肾成纤维细胞中验证其功能。开展草鱼IL-12受体异构体的研究,有利于揭示鱼类特有的多基因编码导致的细胞因子功能分化的机制。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集》期刊2018-10-25）
刘亚珍[5]（2016）在《草鱼白细胞介素8（gcIL-8）免疫功能的初步研究》一文中研究指出白细胞介素8(IL-8),又名CXC趋化因子8(CXCL8),在炎症和正常生理条件下能趋化特异性和非特异性的免疫细胞到达特定部位并激活免疫细胞,调控免疫反应。硬骨鱼中,IL-8对外周血淋巴细胞、头肾淋巴细胞和中性粒细胞等的趋化功能已经被验证,但是IL-8发挥免疫调节功能的机制仍不清楚。因此,本文通过研究草鱼IL-8介导的胞内信号通路以及IL-8与其它炎症因子的相互作用等初步探讨硬骨鱼IL-8免疫调节机制。首先,通过优化重组表达和纯化条件获得了高纯度的重组草鱼IL-8蛋白(rgcIL-8),然后用rgcIL-8处理草鱼头肾白细胞(HKL)发现,草鱼IL-8能够通过MAPK和NF?B信号通路诱导自身以及IL-1?和TNF-?等促炎因子基因的表达;草鱼IL-8抗体中和实验发现内源性IL-8部分参与IL-1?对其自身的调控,而草鱼IL-1?抗体中和实验则发现内源性IL-1?不参与IL-8对其自身和IL-1?基因的调控;同时,草鱼IL-8能够诱导HKLs中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)基因的表达和一氧化氮(NO)的产生。本研究证明草鱼IL-8通过MAPK和NF?B等信号通路调节促炎因子基因的表达,揭示了草鱼IL-8发挥免疫调节功能的胞内信号转导途径。IL-8和IL-1?相互作用的研究,为深入探讨草鱼IL-8的免疫调节功能奠定了基础。草鱼IL-8能够诱导NO的产生,填补了IL-8对NO的调节方面的空白。综上所述,本文的研究不仅完善了草鱼IL-8免疫功能,也为草鱼养殖病害的免疫防治提供了潜在的靶点。(本文来源于《电子科技大学》期刊2016-03-01）
卜云璇[6]（2015）在《草鱼白细胞介素1β的克隆及其在肠道炎症中的功能鉴定》一文中研究指出目的:白细胞介素-1β(IL-1β)是一种促炎细胞因子,主要由活化的单核细胞和巨噬细胞产生,可参与机体的多种生理及病理反应,在免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节等过程中发挥重要作用。草鱼是我国重要的淡水养殖经济鱼类,但其易遭受多种病原菌和病毒的危害,病原生物通常通过肠道进入草鱼体内,使其发生炎症乃至死亡,造成经济损失。本研究旨在通过克隆草鱼IL-1β基因,分析其基因结构,明确其在草鱼生理及病理条件下的各组织的表达水平,揭示该基因在肠道炎症发生过程中的可能作用。方法:运用RACE技术从草鱼中克隆IL-1β全长c DNA,通过p ET32a(+)原核表达系统表达IL-1β融合蛋白,并经镍柱纯化获得具有生物活性的蛋白。运用q PCR技术分别检测:(1)健康草鱼各组织的IL-1β转录水平;(2)用细菌内毒素(LPS)腹腔注射草鱼后4 h,12 h,24 h和48 h时各组织中IL-1β相对表达量。(3)肛灌不同剂量重组IL-1β活性蛋白后炎症发生过程中肠道组织内的IL-1β、IL-1R2和TNF-α基因相对表达水平。以割胶纯化的草鱼IL-1β重组蛋白为免疫原,制备草鱼IL-1β多克隆抗体,用琼脂双扩散法检测抗体的效价、Western blot验证其特异性。采用肛灌嗜水气单胞菌诱导草鱼产生肠道炎症,诱导12 h后肛灌20 ng/尾的草鱼IL-1β多克隆抗体(rgc IL-1βp Ab),用q PCR检测肠组织中IL-1β、IL-1R2和TNF-α基因在肠炎发生过程中的表达变化。采用免疫组化技术观察多抗处理3 d后草鱼肠道内天然IL-1β蛋白分泌特征。结果:草鱼IL-1?c DNA全长为1260 bp,包含一个813 bp的开放阅读框,编码长度为270个氨基酸的多肽,预测的分子量为30.1 k Da,氨基酸序列具有IL-1家族特征性序列,但缺乏哺乳动物中保守的典型IL-1?转换酶裂解位点。草鱼IL-1?基因组DNA长2863 bp,由7个外显子和6个内含子构成。系统进化树分析结果显示,草鱼和其他鲤科鱼类的IL-1?归为单独的一支。健康草鱼肌肉、肝脏、肠道、皮肤、鳍、心脏、脑、体肾、头肾、鳃和脾脏等11种组织中均有IL-1?表达,脾脏、鳃、头肾和体肾中其转录水平相较其他组织高,经LPS刺激鱼体后,IL-1β转录水平在肌肉、肝脏、肠道、皮肤、体肾、头肾和鳃中显著上调;其中,肌肉、皮肤、鳍和脾脏四种组织的IL-1β表达在12 h时上调至最高后随即下降,而另外6种组织在24 h时上调至最高,随后下降。不同浓度的草鱼IL-1β活性重组蛋白灌肠后,IL-1βm RNA水平显着上调,在刺激24 h时达到最高,且5μg/尾鱼剂量表达量最高,72 h时则下降;相应的,受体基因IL-1R2及下游基因TNF-αm RNA的表达也上调,其变化趋势与IL-1β基本一致。琼脂双扩散显示,所获多抗的效价为1:32;Western blot结果显示,所制备的多克隆抗体可特异性识别草鱼IL-1β蛋白。用嗜水气单胞菌肛灌诱导的草鱼肠道炎症12 h后肛灌草鱼IL-1β多克隆抗体,可降低IL-1β、IL-1R2及TNF-αm RNA的表达,减少肠道中IL-1β蛋白分泌量,减轻肠道炎症。结论:我们克隆并鉴定了草鱼IL-1β。该研究证实,该基因在草鱼体内呈组成型表达,IL-1β重组活性蛋白可诱导草鱼发生肠道炎症,其多克隆抗体可部分阻断肠道炎症。因此,IL-1β在草鱼肠道炎症的发生过程中发挥重要作用。(本文来源于《苏州大学》期刊2015-05-01）
韦鹤[7]（2015）在《草鱼白细胞介素10的免疫调节功能及其作用机制研究》一文中研究指出在哺乳动物免疫系统中,白细胞介素10(Interleukin-10,IL-10)被认为是具有多重功能的重要细胞因子。IL-10由多种细胞分泌并作用于各种免疫细胞,如T细胞、B细胞、单核/巨噬细胞和树突状细胞,调控这些细胞的生长、成熟、增殖、分化与活化,进而影响机体的天然免疫和获得性免疫,并与其它细胞因子一起维持了免疫系统的稳定。硬骨鱼IL-10在多种鱼类包括斑马鱼、金鱼、鲤鱼和虹鳟中被克隆鉴定,但有关硬骨鱼IL-10的免疫调节功能知之甚少,其受体和细胞信号传导途径,以及作用机制均有待阐明。本论文研究草鱼IL-10的免疫学功能,不仅揭示其保守的抑炎症功能,而且阐明它和另一经典抑炎症细胞因子TGF-β1参与免疫反应调节的相互关系和作用机制,从而拓展了对鱼类IL-10免疫学地位的认识。另外,为了解草鱼IL-10发挥作用的分子机制,进一步鉴定了草鱼IL-10介导的IL-10受体1(IL-10R1)和IL-10受体2(IL-10R2)及其下游信号通路(STAT3)和靶基因细胞因子信号转导负调控蛋白3(Suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)。为获悉草鱼IL-10的产生机制,初步探讨了LPS和IFN-γ对草鱼IL-10的转录调控机制。具体研究内容如下:1.重组草鱼IL-10蛋白的活性鉴定和参与的免疫刺激作用:(1)通过硬骨鱼同源序列比对克隆获得草鱼IL-10 cDNA全长序列,并用生物信息学方法分析其结构域与保守特性。(2)实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测草鱼IL-10在各组织中的表达,结果表明草鱼IL-10主要在免疫相关组织头肾、肾、鳃中有较高表达,提示草鱼IL-10可能参与免疫相关反应。(3)构建原核表达系统并采用亲和纯化法获得高纯度重组草鱼IL-10蛋白,利用此蛋白研究草鱼IL-10免疫学功能。(4)细胞活性检测结果表明草鱼IL-10能够促进外周血淋巴细胞PBLs的细胞活性。相似地,转化生长因子β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)也能促进PBLs的细胞活性。(5)为揭示上述作用的机制,采用草鱼IL-10免疫中和实验发现草鱼TGF-β1是依赖于IL-10发挥上调PBLs细胞活性的作用。(6)上述结论得到进一步支持,即qPCR和竞争抑制酶联免疫吸附(CI-ELISA)实验表明草鱼TGF-β1促进IL-10的mRNA表达和蛋白分泌水平,从而证明TGF-β1可能通过诱导IL-10的产生来上调PBLs的细胞活性。本章证明了重组草鱼IL-10的免疫刺激作用,特别是揭示了鱼类TGF-β1和IL-10在发挥免疫刺激作用中的上下游关系。2.草鱼IL-10和TGF-β1在炎症反应调节中的作用和相互关系:(1)在草鱼头肾单核/巨噬细胞中,加入的草鱼il-10和tgf-β1均抑制lps刺激促炎症信号因子tnf-α、il-1β、inos和il-8的表达。(2)相反地,草鱼il-10和tgf-β1的抗体均放大lps对上述促炎症信号因子mrna的上调作用,提示内源的il-10与tgf-β1发挥了抑制促炎症因子表达的作用。(3)机制研究发现,草鱼il-10与tgf-β1均能促进草鱼iκbα全蛋白的表达,即抑制iκbα的降解从而抑制nf-κb通路的激活,表明草鱼tgf-β1和il-10可能通过抑制nf-κb信号通路控制lps诱导的促炎症因子表达。(4)草鱼il-10抗体和tgf-β1抗体分别对tgf-β1和il-10的调节作用不产生影响,提示在lps激活的头肾单核/巨噬细胞中,tgf-β1与il-10独立发挥抑制功能。这些结果验证了鱼类il-10的抑炎症作用及其机制,以及与另一抑炎症因子tgf-β1平行发挥作用的关系,从而丰富了鱼类炎症反应控制机制的知识。3.草鱼il-10受体及信号通路的鉴定:(1)采用同源克隆技术获得了草鱼il-10受体1(il-10r1)、细胞因子受体家族成员4(cytokinereceptorfamilymember4,crfb4)以及细胞因子受体家族成员5(crfb5),并进行了生物信息学分析。(2)qpcr检测结果表明草鱼il-10r1表达于鳃、胸腺、脾、头肾等免疫相关组织,而草鱼crfb4与crfb5则广泛表达于各检测组织,展现出与哺乳动物同系基因类似的表达特性。(3)构建这叁种受体的真核表达质粒,在草鱼肾细胞系cik中,通过对stat3控制的荧光素酶的活性检测,证明了草鱼il-10r1在il-10信号传导中的必要地位,以及草鱼il-10能够上调stat3的活性。更重要的,首次证明了crfb4而不是crfb5作为草鱼il-10r2。(4)分离克隆草鱼socs3启动子区域,并构建草鱼socs3启动子荧光素酶报告质粒及其stat结合位点的突变体,荧光素酶的活性检测表明草鱼stat3介导il-10对socs3启动子活性的上调作用。(5)在原代细胞草鱼头肾白细胞hkls中,免疫印迹和qpcr结果证明草鱼il-10激活stat3信号通路并介导socs3mrna的表达。这些工作阐明了草鱼il-10调节靶基因socs3转录的il-10r1/crfb4/stat3信号通路。4、草鱼il-10的转录调控分析:(1)在草鱼头肾单核/巨噬细胞中,lps通过mapk/erk和nf-κb信号通路上调il-10mrna表达。(2)在草鱼头肾单核/巨噬细胞中,重组草鱼ifn-γ抑制il-10mrna的表达,参与的信号通路为mapk/erk。(3)lps上调草鱼il-10启动子活性,而重组草鱼ifn-γ抑制il-10启动子的活性。这些实验结果表明,不同的刺激作用通过不同的信号途径调控il-10的表达。本论文揭示了草鱼il-10的免疫调节功能,包括刺激免疫细胞活性的新发现和在炎症反应中的经典抑制功能,特别明确了两种重要抑炎症因子il-10与TGF-β1在上述调节作用中的相互关系和作用机制,鉴定了草鱼IL-10的特异受体IL-10R1和辅助受体CRFB4,阐明了草鱼IL-10激活STAT3信号通路和靶基因SOCS3,且探讨了不同诱导条件下IL-10的转录调控机制。本论文的结果不仅填补了硬骨鱼IL-10功能特性、相关作用机制和信号通路等重要信息,而且揭示了基于不同细胞因子相互关系的鱼类免疫调节新机制。(本文来源于《电子科技大学》期刊2015-04-01）
杨潇[8]（2014）在《草鱼白细胞介素1β诱导表达的负调控机制及其在炎症反应中的意义》一文中研究指出白细胞介素lβ(IL-lβ)是IL-1家族中最重要的成员之一。大量的研究表明,作为一种重要的促炎症因子IL-lβ在炎症和疼痛的发生、自身免疫疾病、先天和获得性免疫反应中都发挥着重要的作用。特别是在炎症反应中IL-lβ的诱导表达及调控机制在控制炎症反应强度和维持免疫稳态方面发挥着决定性的作用。鱼类IL-lβ在基因定位、蛋白结构和分泌机制方面与哺乳动物同系物既有相似性也存在较大差异,但是目前对于鱼类IL-lβ诱导表达的调控机制仍然缺乏清楚的认识。在本论文中以草鱼为研究模型,在分析炎症条件和重组草鱼IL-lβ诱导IL-lβ表达的特征基础上,证明IL-lβ受体II(IL-1RII)和抑炎症因子(TGF-β1)参与了草鱼IL-lβ诱导表达的负调控过程,并阐明了相关分子机制。研究内容如下:1.炎症条件下草鱼IL-1β的诱导表达:(1)通过同源克隆技术获得草鱼IL-1β的cDNA全序列,再采用生物信息学方法分析所得基因。(2)通过荧光定量PCR(qPCR)技术发现草鱼IL-1β在草鱼头肾、肝、肾、胸腺、脾等免疫器官中表达量较高,证明草鱼IL-1β发挥免疫功能的场所十分保守。(3)在细菌脂多糖(LPS)刺激草鱼头肾白细胞(HKL)的体外模型中,发现LPS可以迅速地诱导IL-1β的高表达但诱导表达强度随着时间降低。(4)在嗜水气单胞菌活体感染草鱼的体内模型中,发现感染后IL-1β的诱导表达迅速上升,但随后又下降。体外体内的实验都表明在炎症反应条件下草鱼IL-1β的诱导表达呈现快速和瞬时的特征。2.草鱼IL-1β的自我诱导表达:(1)通过重组表达和纯化获得了高纯度重组草鱼IL-1β蛋白,通过qPCR和检测细胞活力的CCK8实验证明该重组蛋白具有生物学活性。(2)以重组草鱼IL-1β蛋白为抗原委托制备多克隆抗体,通过免疫印迹(WB)实验证明所获多克隆抗体能够特异识别草鱼IL-1β蛋白。(3)在重组草鱼IL-1β蛋白刺激HKL后,发现重组IL-1β在1小时内即可诱导自身表达,随后诱导表达倍数迅速降低,其细胞信号传导机制包括MAPK和NFκB信号通路。3.草鱼IL-1受体II(IL-1RII)的分离鉴定及其对IL-1β诱导表达的负调控作用:(1)通过同源克隆技术分离了草鱼IL-1RII的cDNA全序列,生物信息学方法揭示了所得基因与其它物种同源基因之间的进化关系。(2)采用qPCR检测发现草鱼IL-1RII在肝、脾、头肾和鳃组织中表达量较高。(3)在炎症反应条件下,草鱼IL-1RII在体内和体外模型中均可被诱导表达,而对照组的IL-1RII基因表达水平均无变化,表明IL-1RII的诱导表达对于炎症刺激的依赖性。(4)在重组草鱼IL-1β蛋白刺激HKL的细胞模型中,重组草鱼IL-1β可以通过MAPK和NFκB信号通路诱导草鱼il-1rii的表达。(5)通过重组表达、亲和和分子筛层析分离纯化获得了高纯度重组草鱼il-1rii的胞外区蛋白。基于elisa的蛋白结合实验证明重组草鱼il-1rii胞外区蛋白可以在体外与重组草鱼il-1β相结合。(6)重组草鱼il-1rii可以在体外显着抑制重组草鱼il-1β对自身基因的诱导表达。这些实验结果证明在炎症反应或草鱼il-1β刺激下产生的草鱼il-1rii可能是负调控草鱼il-1β表达的机制之一。4.草鱼抑炎症因子对il-1β诱导表达的负调控作用:(1)不论在嗜水气单胞菌感染的体内模型还是lps刺激hkl的体外模型中,草鱼抑炎症因子tgf-β1均被诱导高表达,而对照组的tgf-β1基因表达水平均无变化,表明tgf-β1可能参与了炎症反应的调节。(2)在草鱼hkl中发现重组草鱼il-1β蛋白可以通过mapk和nfκb信号通路诱导tgf-β1基因的表达,提示tgf-β1可能以反馈方式参与il-1β的调节作用。(3)草鱼tgf-β1的抗体中和实验发现草鱼tgf-β1抗体可以延长il-1β对自身诱导表达的作用时间,证明内源性的tgf-β1参与了草鱼il-1β的自我诱导作用。(4)上述结论被以下实验结果证实:草鱼hkl中重组草鱼tgf-β1可以抑制重组草鱼il-1β的自我诱导表达作用。(5)在机制方面,wb分析证明重组草鱼tgf-β1可以通过抑制iκb的磷酸化来影响nfκb信号通路的激活,从而降低重组草鱼il-1β对自身基因的诱导表达作用。(6)同时,重组草鱼tgf-β1可以在体外抑制重组草鱼il-1β对其受体相关基因(il-1ri和il-1racp)的诱导表达作用。相反,重组草鱼tgf-β1刺激对il-1β信号具有抑制作用的il-1rii的表达,并放大重组草鱼il-1β对il-1rii的诱导表达作用。因此,重组草鱼tgf-β1在抑制il-1β信号放大相关基因(il-1ri和il-1racp)表达的同时又能增强il-1β信号内源天然拮抗剂(il-1rii)的表达,从而双重有利于tgf-β1抑制il-1β信号的作用。(7)另一方面,qpcr和wb实验发现重组草鱼il-1β可以上调tgf-β1的i型受体(alk5)的表达,并能放大重组草鱼tgf-β1对alk5的诱导表达作用。此外,重组草鱼il-1β可以增强重组草鱼tgf-β1引起的smad2磷酸化水平,证明il-1β可以放大tgf-β1的信号传导。(8)在嗜水气单胞菌感染的体内模型中发现重组tgf-β1可以抑制细菌感染对草鱼il-1β的诱导表达作用,证明了重组tgf-β1在体内的抑炎症功能。这些实验结果证明草鱼tgf-β1通过影响il-1β受体相关基因(il-1ri、il-1racp和il-1rii)的表达和细胞信号通路(nfκb)的激活来抑制草鱼il-1β对自身基因的诱导表达;反之,il-1β可以放大tgf-β1的信号传导。因此,il-1β和tgf-β1的相互作用构成了草鱼il-1β诱导表达的负调控机制之一。总之,本论文在明确草鱼il-1β的两种诱导表达(炎症诱导和自我诱导)方式的基础上,分别揭示了基于内源天然拮抗剂(il-rii)和抑炎症因子(tgf-β1)负调节IL-1β诱导表达的方式和原理,从而诠释了在鱼类基于IL-1β信号引起的炎症反应放大过程中的控制机制。本论文的发现不仅揭示了鱼类维持免疫稳态的两种重要分子机制,而且有利于了解先天性免疫系统自调控的进化信息。另外,也为草鱼养殖病害的免疫防治提供了潜在的靶点。(本文来源于《电子科技大学》期刊2014-09-18）
颜鹏,简纪常,吴灶和[9]（2013）在《草鱼白细胞介素6基因克隆与表达分析》一文中研究指出白细胞介素6(IL-6)是一个多效的细胞因子,在机体免疫应答、急性期反应以及造血调控等过程中发挥着重要作用。以草鱼(Ctenopharyngodon idella)为研究对象,采用RT-PCR和Smart RACE技术克隆获得草鱼IL-6(CiIL-6)cDNA序列,CiIL-6的cDNA全长为1 145 bp,包含一个长为702 bp的开放阅读框,能编码233个氨基酸,预测CiIL-6的蛋白质分子质量为26.74 ku,等电点为8.72。其中5'和3'非编码区(UTR)分别为86 bp和357bp。氨基酸同源性分析显示,草鱼和斑马鱼(Danio rerio)的亲缘关系最近,它们的CiIL-6氨基酸同源性高达76%,而与其他物种的同源性均低于30%。RT-PCR的结果显示,CiIL-6在健康草鱼的胸腺、头肾和脾脏表达最高,而在鳃、胃和心脏中的表达量最低。(本文来源于《广东海洋大学学报》期刊2013年03期）
王婷婷[10]（2012）在《草鱼（Ctenopharyngodon idella）白细胞介素-8的克隆与鉴定》一文中研究指出目的白细胞介素8（白介素-8/IL-8）是一个碱基-肝素结合蛋白，属于CXC趋化因子，它的主要作用是介导炎症反应。现已在多种鱼类中克隆到IL-8的基因，并对其功能进行了初步研究。草鱼（Ctenopharyngodon idella）不仅是我国的主要淡水养殖品种，也是世界第叁大养殖品种，但草鱼抗病力差，易受各种致炎因子刺激发生炎症乃至死亡，严重影响草鱼养殖业的发展。本论文拟克隆草鱼IL-8的完整基因，并对其生物学功能进行初步鉴定。方法首先，运用Rapid application of cDNA ends技术从草鱼中克隆IL-8cDNA全长序列，并通过原核表达质粒pET32a+表达IL-8融合蛋白。其次，运用Real-time PCR技术检测健康草鱼血液及12个组织的IL-8转录水平；同时经腹腔注射嗜水气单胞菌后4h，1d，3d，7d检测脑、心脏、肠道、中肾、脾脏、头肾、鳃、胸腺、表皮、尾鳍和肝脏等11个组织中的IL-8mRNA相对变化量。最后，利用扫描电镜技术和石蜡切片技术观察4h，1d，3d，7d时草鱼肠道结构的变化。结果草鱼IL-8的cDNA全长序列为609bp，其中包含5’非编码区96bp、3’非编码区216bp和开放阅读框297bp；其开放阅读框共编码98个氨基酸，与人的IL-8相似性为45%，预测的叁级结构与人的IL-8空间结构极为相似。草鱼IL-8全长DNA包括四个外显子，结构组成与其它物种的IL-8内含子外显子排列相似；利用表达载体成功诱导表达IL-8融合蛋白，与预期大小一致。健康草鱼12个组织及血液的IL-8转录水平检测结果显示，IL-8在各个组织中都有转录，其中肝脏中最高，鳍和表皮仅次于肝脏，肠道、中肾、脾脏、头肾、鳃、胸腺等免疫相关组织的转录水平也较高。腹腔注射嗜水气单胞菌后各组织中IL-8mRNA相对变化量检测结果显示，脑和鳍的IL-8无变化；心脏、肠道、中肾、脾脏、头肾、鳃、胸腺、表皮和肝脏等9个组织中的IL-8mRNA分别在4h或1d达到最高值；其中，免疫相关组织中表现更为明显，3d后下降到正常水平。嗜水气单胞菌感染刺激后草鱼肠道的显微结构变化表现为，肠道内皮细胞在4h时有出现空泡变性，1d时粘膜下层结缔组织充血，细胞肿胀，固有层淋巴细胞聚集，3d时淋巴细胞多聚集于粘膜下层结缔组织，7d时肠道组织基本恢复正常。肠绒毛超微结构显示，肠道绒毛的破损在3d时最为明显，7d时基本恢复正常。结论本研究成功克隆并表达了草鱼完整的炎症细胞因子IL-8，该基因在草鱼体内呈组成性表达；致病菌刺激后的免疫相关组织中IL-8转录水平分别在4h或1d达到最高峰，3d后下降到正常水平；肠道组织在致病菌刺激3d后的炎症反应达到高峰，7d后恢复正常，初步证实了IL-8与草鱼炎症反应有关，参与了草鱼体内的免疫调节。(本文来源于《苏州大学》期刊2012-04-01）
草鱼白细胞介素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为探讨水体铜(Cu)和镉(Cd)污染对草鱼免疫系统的影响,本研究利用实时荧光定量PCR(QRT-PCR)技术,分析在不同时间(2、4、6、8 d)及不同质量浓度的Cu~(2+)(0.10、0.20、0.40、0.60、0.80 mg/L)和Cd~(2+)(0.05、0.10、0.20、0.30、0.40 mg/L)暴露下,草鱼肾脏中3种白细胞介素——白细胞介素-1β、白细胞介素-8和白细胞介素-10基因表达量的变化。试验结果显示,高质量浓度和长时间的Cu~(2+)暴露(0.60、0.80 mg/L, 8 d)和Cd~(2+)暴露(0.20、0.30、0.40 mg/L, 8 d)下,草鱼肾脏中的白细胞介素-1β、白细胞介素-8和白细胞介素-10基因表达量与对照组相比显着增加(P<0.05);在0.80 mg/L Cu~(2+),0.30、0.40 mg/L Cd~(2+)暴露下的草鱼肾脏中白细胞介素-1β的基因表达量,以及在0.60、0.80 mg/L Cu~(2+)暴露下的草鱼肾脏中白细胞介素-8和白细胞介素-10的基因表达量,均随着暴露时间的增加而逐渐升高,且第8 d时的基因表达量均显着高于第2 d时(P<0.05)。本研究揭示了高质量浓度和长时间的Cu~(2+)、Cd~(2+)暴露会使草鱼肾脏产生炎症反应,为进一步深入研究重金属对鱼类的免疫毒性机制奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
草鱼白细胞介素论文参考文献
[1].简晓玉.草鱼白细胞介素21的免疫功能鉴定及其作用机制研究[D].电子科技大学.2019
[2].江红霞,凌洁彬,叶凯甲,李学军.铜和镉对草鱼肾脏中3种白细胞介素基因表达的影响[J].水产科学.2019
[3].吕梦圆,周红,汪新艳.草鱼白细胞介素-2的重组表达及功能鉴定[C].中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集.2018
[4].邱兴阳,尹里程,冯诗雨,周红.草鱼白细胞介素12受体的分离鉴定[C].中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集.2018
[5].刘亚珍.草鱼白细胞介素8（gcIL-8）免疫功能的初步研究[D].电子科技大学.2016
[6].卜云璇.草鱼白细胞介素1β的克隆及其在肠道炎症中的功能鉴定[D].苏州大学.2015
[7].韦鹤.草鱼白细胞介素10的免疫调节功能及其作用机制研究[D].电子科技大学.2015
[8].杨潇.草鱼白细胞介素1β诱导表达的负调控机制及其在炎症反应中的意义[D].电子科技大学.2014
[9].颜鹏,简纪常,吴灶和.草鱼白细胞介素6基因克隆与表达分析[J].广东海洋大学学报.2013
[10].王婷婷.草鱼（Ctenopharyngodonidella）白细胞介素-8的克隆与鉴定[D].苏州大学.2012
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