Calpeptin对丙烯酰胺致大鼠大脑微管损伤的干预及机制

论文摘要

目的建立大鼠丙烯酰胺（Acrylamide,ACR）神经中毒模型和钙蛋白酶抑制剂Calpeptin（CP）干预模型,探讨CP对ACR诱导的大脑微管（Microtubules,MT）损伤的干预作用及其机制,以期为ACR诱导的神经损伤提供预防与治疗的理论依据。方法将40只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为对照组、CP组、ACR组和ACR+CP组,每组10只。采用腹腔注射进行ACR染毒和CP干预,对照组给予生理盐水;CP组给予200μg/kg CP;ACR组给予30 mg/kg ACR;ACR+CP组在给予30 mg/kg ACR后1 h,给予200μg/kg CP进行干预。每周3次,共4周。每周末进行大鼠体重、步态评分和转棒试验测定。处理结束后,迅速分离大脑组织,测定钙蛋白酶Calpain的活力,采用凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫印迹法（Western blot）分析α-tubulin、β-tubulin、CDK5、p25和p35蛋白的含量。结果与对照组相比,ACR组自第三周开始步态评分升高、转棒试验停留时间缩短（P<0.05）;与ACR组相比,ACR+CP组上述变化均有所改善（P<0.05）。至实验结束时与对照组相比,ACR组Calpain活力升高了59.86%（P<0.05）;与ACR组相比,ACR+CP组Calpain活力降低了32.80%（P<0.05）。与对照组相比,CP组CDK5和p35的含量呈现升高趋势,分别升高了31.01%和19.06%（P<0.05）,ACR组α-tubulin、β-tubulin、CDK5、p25和p35分别升高了12.63%、21.14%、52.81%、40.58%和25.05%（P<0.05）,ACR+CP组CDK5和p35的含量呈现升高趋势,分别升高了42.80%和22.60%（P<0.05）。与ACR组相比,ACR+CP组α-tubulin、β-tubulin、CDK5、p25和p35分别降低了13.10%、10.96%、6.55%、12.79%和25.65%（P<0.05）。结论 CP对ACR诱导的MT损伤具有干预作用,其机制可能是CP通过Calpain调节p35-CDK5/p25通路来维持MT的稳定性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要仪器与试剂
•   1.2 动物模型建立及分组
•   1.3步态评分
•   1.4 转棒试验
•   1.5 组织匀浆
•   1.6 蛋白定量和Calpain活力测定
•   1.7 凝胶电泳和蛋白免疫印迹
•   1.8 统计分析
• 2 结果
•   2.1 体重变化
•   2.2 神经行为学改变
•     2.2.1 步态评分
•     2.2.2 转棒试验
•   2.3 大鼠大脑组织匀浆中Calpain活力的检测结果
•   2.4 大鼠大脑组织中α-tubulin、β-tubulin、CDK5、p25和p35蛋白表达水平的测定结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 姜文冲,苏本玉,王淑娥,杨曦伟,许梦梦,管强东,于素芳,段化伟

关键词: 丙烯酰胺,蛋白激酶,微管,大脑

来源: 环境与健康杂志 2019年06期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 预防医学与卫生学

单位: 山东大学公共卫生学院职业与环境健康学系,中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所

基金: 国家自然科学基金(81372969)

分类号: R114

DOI: 10.16241/j.cnki.1001-5914.2019.06.002

页码: 475-479

总页数: 5

文件大小: 310K

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