基因主要抗原区论文_韩林梅,吴翠兰,李军,陶立,潘艳

导读:本文包含了基因主要抗原区论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:基因,抗原,病毒,链球菌,细小,密码子,免疫。

基因主要抗原区论文文献综述

韩林梅,吴翠兰,李军,陶立,潘艳[1](2019)在《广西牛支原体主要抗原基因的变异分析》一文中研究指出为了解牛支原体广西分离株的P81基因和vspY1基因的变异特点,为牛支原体病的诊断和防控提供依据,本研究对7株牛支原体广西分离株P81和vspY1基因进行PCR扩增、克隆、测序和序列分析。序列分析结果显示,7株牛支原体的P81基因全长为2 100bp,编码700个氨基酸残基;vspY1全长为948bp~1 029bp,编码316~343个氨基酸残基。核苷酸相似性结果显示,7株分离株与参考株之间的P81基因相似性为94.7%~99.9%,而vspY1基因的相似性为78.4%~100%。核苷酸进化树结果表明,7株牛支原体P81基因和vspY1基因均与标准株PG45分属于不同的分支。抗原表位预测结果显示,7株分离株P81含有26~28个潜在的抗原表位,vspY1基因含有6~7个潜在的抗原表位。试验结果表明P81较保守,变异小,而vspY1基因变异较大,且P81和vspY1蛋白均存在抗原表位。(本文来源于《广西畜牧兽医》期刊2019年05期)

潘素敏,仲飞,贺英,史秋梅,潘素娜[2](2018)在《犬细小病毒VP2主要抗原表位基因的密码子优化及原核表达》一文中研究指出为了制备大量廉价的可溶性犬细小病毒(CPV)VP2蛋白抗原,试验截选了VP2抗原表位集中的基因片段VP2-70进行密码子优化及合成,将合成基因克隆到pET-32a(+)载体中,构建原核表达载体pET-32-VP2-70,转化BL21(DE3)工程菌,IPTG诱导表达后进行Ni-NTA亲和层析纯化,Western-blot检测验证其生物学活性。结果表明:试验构建的VP2-70表达载体能够介导VP2-70融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达量高出野生型VP2-70融合蛋白16 mg/L;Western-blot检测显示,该蛋白具有很好的免疫反应原性,可为CPV亚单位疫苗和免疫学诊断方法的研究提供候选抗原。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2018年19期)

孟帆,樊振华,吴忻,姚敬明,王娟萍[3](2017)在《山西猪伪狂犬病毒gE基因主要抗原区的遗传变异分析》一文中研究指出根据Gen Bank中收录的PRV Becker株的gE基因序列,设计了合成1对引物,对山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE部分基因进行了PCR扩增,并进行克隆与序列分析。经测序,山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE部分基因核苷酸序列长度为997 bp,编码322个氨基酸。测序后对山西流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列和推导出的氨基酸序列与18株PRV参考株进行了遗传变异分析,结果显示,山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列与18株PRV参考株之间同源性为97.8%~100%,其中与YY株(湖南)、SC-1-2015株(四川)、HNXX2012株(湖北)、HN-DZ株(广东)及DL14-08株(长春)同源性最高,均为100%,与75V19株(比利时)同源性最低,为97.8%。山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因核苷酸序列推导的氨基酸序列与18株PRV参考株之间同源性为96.1%~100%,其中与YY株(湖南)、SC-1-2015株(四川)、HNXX2012株(湖北)、HN-DZ株(广东)及DL14-08株(长春)同源性最高,均为100%,与Rice(美国)同源性最低,为96.1%。山西PRV流行株包含主要抗原表位区的gE基因序列的遗传进化分析表明,山西PRV流行株属于2012年以来分离的PRV变异株群,与YY株和HNXX2012株亲缘关系较近,与欧洲和美洲分离株亲缘关系较远。(本文来源于《山西农业科学》期刊2017年11期)

郑辉,张青,邹敏,董雅琴,刘爽[4](2017)在《PRV SD株gE基因主要抗原区域原核表达及间接ELISA方法的建立》一文中研究指出参考猪伪狂犬病病毒(PRV)SD株g E基因序列,设计1对引物,通过PCR方法扩增一段包含g E主要抗原表位编码区的618 bp片段,将其用Bam HⅠ和Xho L I双酶切后,插入到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),进行表达、SDS-PAGE电泳、Western-blot检测和纯化;利用表达的PRV SD g E蛋白进行g E-ELISA鉴别检测方法研究。结果发现:gE重组蛋白得到了高效表达,融合蛋白的分子量约为42ku;表达产物存在于上清液中,表达量可达菌体总蛋白的30%以上,并且能被PRV抗体所识别。将纯化后的g E蛋白作为抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪Ig G为二抗,建立检测PRV抗体的间接ELISA方法。结果显示:确定的抗原最佳包被浓度为36μg/m L,最佳包被时间为37℃、1 h并4℃过夜,待检血清(1:50稀释)37℃作用1 h,二抗(1:3 000)37℃作用1 h。重复性试验、交叉试验证明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高。用g E-ELISA和IDEXX g E-ELISA同时对采集的92份猪血清进行平行检测,发现该方法的特异性为85.71%,敏感性为90.63%,二者符合率为89.13%。该方法为我国猪伪狂犬病的鉴别监测提供了一种可供选择的技术手段。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2017年10期)

吴金花,布日额,王金良,陈金龙,锡林高娃[5](2017)在《奶牛乳腺炎无乳链球菌sip、pgk及FbsA基因主要抗原区域的融合表达及抗原性鉴定》一文中研究指出为获得具有无乳链球菌膜表面相关蛋白sip和磷酸甘油激酶pgk及纤连蛋白FbsA叁重活性的多亚单位融合蛋白,研究其作为无乳链球菌亚单位疫苗候选抗原的可行性,根据GenBank中已发表的无乳链球菌sip、pgk及FbsA基因的核苷酸序列,利用DNAStar软件对蛋白的抗原表位序列进行分析并设计合成包括重迭PCR引物共4对引物,通过重迭PCR技术将前2个基因主要抗原区域进行拼接后插入pET30a(+)载体,再将第3个基因插入。为减少叁重基因串联表达过程中3个蛋白之间空间构象的干扰,在3个基因连接处各引入1段45bp的柔性linker,结果重组基因在BL21感受态中实现了可溶性表达,表达的蛋白约62 000;Western blot试验表明多亚单位融合蛋白可被无乳链球菌多抗识别,且由此融合蛋白制备小鼠多抗能够识别sip、pgk及FbsA等3个蛋白;这表明构建的多亚单位融合蛋白可能具备sip、pgk及FbsA蛋白的叁重活性,而且在小鼠的攻毒保护性试验中,重组多亚单位融合抗原对攻毒小鼠的保护优于单个蛋白。本试验为牛无乳链球菌性乳腺炎新型疫苗的研究提供了一定的参考数据。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2017年07期)

孙涛,王超,徐彪,王宏华,邓明俊[6](2016)在《鸭坦布苏病毒E基因主要抗原域的原核表达及单克隆抗体的制备》一文中研究指出为制备鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因主要抗原域的单克隆抗体(MAb),本研究经DNAStar软件分析预测E蛋白含有的优势抗原表位区,以DTMUV QD株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增涵盖编码主要优势表位的E基因片段(943 bp~1 287 bp),并将其克隆至表达载体p ET-28a中,转化于大肠杆菌中进行诱导表达。对表达的重组蛋白进行western blot鉴定,将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与SP2/0细胞融合,经筛选和鉴定,获得了两株能够稳定分泌抗E蛋白的杂交瘤细胞株,命名为4G8和6B12,其亚型均为Ig G1型,并且识别于不同的抗原位点。经间接免疫荧光检测,MAb 4G8和6B12均能够与DTMUV发生特异性反应。本研究所制备的MAb为进一步鉴定DTMUV以及分析囊膜糖蛋白E的结构和功能奠定了基础。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2016年06期)

何奇松,颜健华,冯淑萍,易春华,韦达有[7](2016)在《O型口蹄疫病毒VP1基因主要抗原位点基因串连表达载体的构建及序列测定》一文中研究指出以构建好的O型FMDV VP1基因的重组质粒PMD18-T-VP1为模板,通过PCR扩增出VP1基因主要抗原位点VP1(61~180bp)的核苷酸及VP1(421~639bp)的核苷酸,采用重组PCR方法将扩增所得的2个基因片段用linker连接,结果构建出1个含384bp的重组质粒,将该重组质粒定向插入原核表达载体pGEX-6P-1,成功构建了pGEX-6P-1-VP1(384bp)串联表达载体。该串联表达载体的构建为进一步研制FMDV的诊断抗原及多肽疫苗奠定了基础。(本文来源于《上海畜牧兽医通讯》期刊2016年02期)

焦鹏涛,李孟,陈果,何坤,邹广珍[8](2016)在《泛素介导的禽类病毒主要抗原基因DNA疫苗的构建与应用》一文中研究指出泛素与抗原基因的共表达能够使DNA疫苗诱导机体产生更强的细胞免疫反应,从而增强疫苗免疫的效果。文章总结了应用泛素介导禽类几种重要病毒主要抗原基因共表达DNA疫苗平台的构建及其动物免疫应答的研究进展。(本文来源于《中国家禽》期刊2016年05期)

布日额,吴金花,王金良,锡林高娃,刘燕[9](2015)在《奶牛乳腺炎无乳链球菌sip与pgk双基因主要抗原区域的融合表达》一文中研究指出为获得具有无乳链球菌膜表面相关蛋白sip和磷酸甘油激酶pgk双重活性的融合蛋白,探讨其作为无乳链球菌亚单位疫苗候选抗原的可行性。根据GenBank中已发表的无乳链球菌sip、pgk基因的核苷酸序列,设计合成4条引物,通过重迭PCR技术将2个基因主要抗原区域进行融合表达;在2个基因连接处引入45bp连接肽的核苷酸序列;重组蛋白通过pET30a(+)载体及BL21表达菌实现原核表达,表达的蛋白大小约为47 000;Western blot检测表明,重组蛋白可被无乳链球菌多抗识别,具有较好地免疫生物学活性。本研究为奶牛乳腺炎无乳链球菌亚单位疫苗的研发提供了一定的理论依据。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2015年08期)

吴植,曹斌,贺生中,戴建华,吴迪[10](2015)在《犬细小病毒VP2基因编码主要抗原表位区的核酸免疫及其免疫原性研究》一文中研究指出为评价犬细小病毒(CPV)VP2主要抗原表位的免疫原性,本研究对CPV YZ株VP2的氨基酸序列进行分析,确定了主要抗原表位区域(VP2-228),通过PCR扩增相应的表位编码区域基因片段(700 bp),将其克隆于真核表达载体p VAX1中构建重组真核表达质粒p VAX1-VP2-228。Western blot结果显示VP2-228能够在COS-7细胞中正确表达。将该重组质粒免疫小鼠,利用血凝抑制试验检测不同时期的抗体水平,以MTT法检测免疫35 d时淋巴细胞的增殖活性。结果表明p VAX1-VP2-228能够诱导小鼠产生较高的抗体水平;淋巴细胞增殖试验表明免疫小鼠的淋巴细胞刺激指数显着高于对照组(p<0.05)。本研究为开展CPV DNA疫苗的研究提供了实验依据。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2015年06期)

基因主要抗原区论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为了制备大量廉价的可溶性犬细小病毒(CPV)VP2蛋白抗原,试验截选了VP2抗原表位集中的基因片段VP2-70进行密码子优化及合成,将合成基因克隆到pET-32a(+)载体中,构建原核表达载体pET-32-VP2-70,转化BL21(DE3)工程菌,IPTG诱导表达后进行Ni-NTA亲和层析纯化,Western-blot检测验证其生物学活性。结果表明:试验构建的VP2-70表达载体能够介导VP2-70融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达量高出野生型VP2-70融合蛋白16 mg/L;Western-blot检测显示,该蛋白具有很好的免疫反应原性,可为CPV亚单位疫苗和免疫学诊断方法的研究提供候选抗原。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

基因主要抗原区论文参考文献

[1].韩林梅,吴翠兰,李军,陶立,潘艳.广西牛支原体主要抗原基因的变异分析[J].广西畜牧兽医.2019

[2].潘素敏,仲飞,贺英,史秋梅,潘素娜.犬细小病毒VP2主要抗原表位基因的密码子优化及原核表达[J].黑龙江畜牧兽医.2018

[3].孟帆,樊振华,吴忻,姚敬明,王娟萍.山西猪伪狂犬病毒gE基因主要抗原区的遗传变异分析[J].山西农业科学.2017

[4].郑辉,张青,邹敏,董雅琴,刘爽.PRVSD株gE基因主要抗原区域原核表达及间接ELISA方法的建立[J].中国动物检疫.2017

[5].吴金花,布日额,王金良,陈金龙,锡林高娃.奶牛乳腺炎无乳链球菌sip、pgk及FbsA基因主要抗原区域的融合表达及抗原性鉴定[J].中国兽医学报.2017

[6].孙涛,王超,徐彪,王宏华,邓明俊.鸭坦布苏病毒E基因主要抗原域的原核表达及单克隆抗体的制备[J].中国预防兽医学报.2016

[7].何奇松,颜健华,冯淑萍,易春华,韦达有.O型口蹄疫病毒VP1基因主要抗原位点基因串连表达载体的构建及序列测定[J].上海畜牧兽医通讯.2016

[8].焦鹏涛,李孟,陈果,何坤,邹广珍.泛素介导的禽类病毒主要抗原基因DNA疫苗的构建与应用[J].中国家禽.2016

[9].布日额,吴金花,王金良,锡林高娃,刘燕.奶牛乳腺炎无乳链球菌sip与pgk双基因主要抗原区域的融合表达[J].中国兽医学报.2015

[10].吴植,曹斌,贺生中,戴建华,吴迪.犬细小病毒VP2基因编码主要抗原表位区的核酸免疫及其免疫原性研究[J].中国预防兽医学报.2015

论文知识图

CSFVE2基因主要抗原区的nested...广西CSFV毒株与HCLV和Shimen株E2基一6表达蛋白的sDs一PAGE(左)和WesternB...猪瘟野毒混合毒感染猪所分离病毒E2基因...猪瘟野毒混合毒感染猪所分离病毒E2基因...重组质粒pET32a-E2的BamⅡ和HindⅢ双...

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