泡叶藻聚糖低分子质量降解片段组成特征及其体外免疫诱导活性

论文摘要

目的:对从泡叶藻（Ascophyllum nodosum）中提取的泡叶藻聚糖进行化学法降解,将得到的低分子质量降解产物进行分离纯化,分析其基本组成特征和体外免疫诱导活性,为泡叶藻聚糖或其他海藻多糖的生物活性和基本结构特征研究提供参考。方法:通过酸水解法和双氧水氧化降解法制备泡叶藻聚糖低分子质量降解片段,利用超滤法和Sephadex G-50凝胶柱层析分离纯化得到4个泡叶藻聚糖低分子质量片段:HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2;采用对氨基苯甲酸乙酯柱前衍生样品后进行高效液相色谱及化学方法分析其单糖组成和化学组成;采用高效分子排阻色谱法测定其重均分子质量;通过小鼠巨噬细胞RAW264.7模型分析HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2的体外免疫诱导活性。结果:泡叶藻聚糖低分子质量片段的组成特征表明HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2均为杂多糖,且单糖组成存在较大差异,其重均分子质量分别为4.80、4.20、5.30、2.30 kDa。免疫活性分析细胞模型结果表明,HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F2在所测定质量浓度范围（0～200μg/mL）内能明显诱导RAW264.7细胞活化,释放NO和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）,而H2O2-F1诱导RAW264.7细胞释放NO和TNF-α的活性明显低于HCl-F1、HCl-F2和H2O2-F2。结论:泡叶藻聚糖低分子质量降解片段（HCl-F1、HCl-F2和H2O2-F2）具有明显的免疫诱导活性,其中HCl-F1和H2O2-F2的免疫诱导活性明显高于泡叶藻聚糖。结合其化学组成分析的结果,提示泡叶藻聚糖低分子质量降解片段的免疫诱导活性是由单糖组成和硫酸根质量分数共同决定的。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 As的提取
•     1.3.2 As低分子质量降解产物的制备
•       1.3.2. 1 酸水解法制备低分子质量降解产物
•       1.3.2. 2 氧化降解法制备低分子质量降解产物
•     1.3.3 As低分子质量降解片段的分离纯化
•     1.3.4 As低分子质量降解片段分子质量的测定
•     1.3.5 As低分子质量降解片段的基本组成分析
•       1.3.5. 1 低分子质量降解片段的酸水解
•       1.3.5. 2 单糖组成分析
•       1.3.5. 3 糖醛酸质量分数分析
•       1.3.5. 4 硫酸基团质量分数分析
•     1.3.6 As低分子质量降解片段的傅里叶变换红外光谱分析
•     1.3.7 As低分子质量降解片段体外免疫诱导活性分析
•       1.3.7. 1 RAW264.7细胞培养
•       1.3.7. 2 低分子质量降解片段诱导RAW264.7细胞活化释放免疫因子NO和肿瘤坏死因子能力测定
•   1.4 数据统计与分析
• 2 结果与分析
•   2.1 As低分子质量降解片段分离纯化结果
•     2.1.1 酸水解法降解片段分离纯化结果
•     2.1.2 氧化法降解片段分离纯化结果
•   2.2 As低分子质量降解片段基本组成分析结果
•   2.3 傅里叶变换红外光谱分析结果
•   2.4 As低分子质量降解片段的体外免疫诱导活性分析结果
•     2.4.1 低分子质量降解片段诱导RAW264.7细胞活化释放NO的分析
•     2.4.2 低分子质量降解片段诱导RAW264.7细胞活化分泌TNF-α质量浓度
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 何萍萍,韦敬柳乙,姜泽东,朱艳冰,倪辉,李清彪

关键词: 泡叶藻聚糖,低分子质量降解片段,分离纯化,化学组成,体外免疫诱导活性

来源: 食品科学 2019年11期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 集美大学食品与生物工程学院,福建省食品微生物与酶工程重点实验室,厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用与深加工重点实验室,厦门市食品生物工程技术研究中心

基金: 国家自然科学基金青年科学基金项目(31501441),福建省高校杰出青年科研人才培育计划项目(B16166)

分类号: TQ914.2

页码: 139-145

总页数: 7

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