（许昌市食品药品检验所河南许昌461000）
【摘要】目的：建立熄风瘫复丸中主要成分芍药苷的含量测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法，色谱柱AgilentZORBAXSB-C185?m，4.6×250mm；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14:86）；检测波长：230nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃。结果：芍药苷进样量在0.12～1.2?g范围内与峰面积呈良好线性关系，r=0.9999；平均加样回收率为（99.49%），RSD为（1.11%）(n=9)。结论：本法操作简便，灵敏，准确，可用于熄风瘫复丸中芍药苷的质量控制。
【关键词】熄风瘫复丸；芍药苷；高效液相色谱；含量测定
【中图分类号】R281【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2016）29-0350-02
DeterminationofPaeoniflorininXifengTanfuPillsbyHPLC
Wangyou-xinYanguang-hua.XuchangInstituteforFoodandDrugControl,HenanXuchang461000,China
【Abstract】Objective:Toestablishareversed–phaseHPLCassayfordeterminingthePaeoniflorininXifengTanfupills.Method:ThechromatographicsystemconsistedofAgilentZORBAXSB-C185?m,150A,4.6×250mmcolumn；mobilephaseofacetonitrile-0.1mol/Lphosphoricacid(14:86)withadetectionwavelengthat230nm.Theflowratewas1.0ml/minandthecolumntemperaturewas30℃.Results:ThelinearrangeofPaeoniflorinwas0.12～1.2μg,r=0.9999.Theaveragerecoverywas99.49%andtheRSDwas1.11%(n=9).Conclusion:Thismethodissimple,reliable,accurate,whichoffersadvantagesofhighersensitivityandhigherprecisionandsuitableforcontrolthequalityofPaeoniflorininXifengTanfupills.
【Keywords】XifengTanfupills,Paeoniflorin,HPLC,determinationofcontent
熄风瘫复丸为禹州中医院中药制剂，处方组成为白芍、木瓜、枸杞子、续断、牛膝、丹参、土鳖虫、大黄、石菖蒲、陈皮等19味中药，粉碎成细粉,过筛，混匀，用水泛丸，干燥，再用60g炼蜜及药用炭包衣，打光，制成1000g丸剂。其中白芍为君药，具有滋补肝肾，活血化瘀，熄风通络之作用。用于中风后遗症，见半身不遂，患侧肢体强硬，屈伸不利。为了控制该制剂质量，保证临床用药安全有效，故选择该制剂中的君药白芍的主要有效成分芍药苷作为指标成分，进行分析研究。结果表明，芍药苷性质稳定，分离效果好，专属性强，干扰小，并具有较好的重现性，可用于熄风瘫复丸中芍药苷的质量控制。
1.仪器与试药
Agilent1260液相色谱仪，G1316A检测器,Openlab色谱工作站；MSA225S-000-DU电子天平。芍药苷对照品（中国食品药品检定研究院批号：110736-201539）；熄风瘫复丸（160110、160118、160130）与缺少白芍的阴性样品均为禹州市中医院制剂室制备；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2.方法与结果
2.1色谱条件及系统适应性试验
色谱柱：AgilentZORBAXSB-C185?m，4.6×250mm；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14:86）；柱温：30℃；检测波长：230nm；进样量：10?L。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。
2.2对照品溶液的制备
精密称取芍药苷对照品约60mg，置100mL量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液（每1mL中含芍药苷600μg）；精密量取5mL，置50mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液（每1mL中含芍药苷60μg）。
2.3供试品溶液的制备
取本品适量，研细，精密称取细粉约1.2g，置50mL中，加50%甲醇溶液约30mL，超声处理（功率400W，频率120kHz）30分钟，放冷至室温，用50%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，作为芍药苷测定的供试品溶液。
2.4阴性样品溶液的制备
取缺少白芍的阴性样品适量，研细，精密称取细粉约1.2g，置50mL中，加50%甲醇溶液约30mL，超声处理（功率400W，频率120kHz）30分钟，放冷至室温，用50%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，作为芍药苷测定的阴性对照溶液。
2.5阴性试验
精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各10μL，进样分析，记录色谱图。从色谱图可见，熄风瘫复丸中其他成分对芍药苷的测定没有干扰（见图1）。
图1芍药苷对照品（A）、熄风瘫复丸样品（B）、熄风瘫复丸阴性对照（C）的HPLC色谱图
2.6线性关系考察
精密吸取对照品溶液2、5、8、10、13、17、20?L，注入液相色谱仪，进样分析。以芍药苷峰面积积分值为纵坐标Y，进样量位横坐标X(?g)绘制标准曲线，得到回归方程Y=92.225X+4.5651，r=0.9999，结果表明，芍药苷进样量在0.12～1.2?g之间呈良好的线性关系。
2.7稳定性试验
取同一供试品溶液，室温放置，于0、2、4、6、8、10h进样分析，测定，计算芍药苷峰面积积分值RSD为0.93%（n＝6）。结果表明，供试品溶液在10h内基本稳定。
2.8精密度试验
取芍药苷对照品溶液10?L，重复进样6次，记录色谱图，计算芍药苷面积值RSD为0.62%。
2.9重复性试验
精密称取供试品细粉（160110）5份，制备供试品溶液，测得平均含量2.2296mg?g-1，计算供试品中芍药苷含量的RSD为1.04%（n＝5）。结果表明芍药苷该方法处理重复性良好。
2.10回收率试验
精密称取已知含量的熄风瘫复丸（160110）约0.6g，分别精密加入芍药苷对照品溶液储备溶液适量，按2.3项下方法制备供试品溶液，依法测定，计算回收率，结果见表1。
表1芍药苷加样回收试验测定结果（n=9）
3.讨论
3.1白芍为熄风瘫复丸的主药，具有具有平抑肝阳，养血收阴之功效，芍药中的芍药苷含量高，性质稳定，可以作为指标成分用以控制熄风瘫复丸的质量。
3.2采用超声提取处理样品，比其他方法方法简单，样品损失少。
3.3本法采用高效液相色谱法测定熄风瘫复丸中芍药苷的含量，方法的精密度、重现性、回收率均符合规定，操作简便，灵敏，准确，可用于熄风瘫复丸中白芍的质量控制。
【参考文献】
[1]中国药典[S].2015年版一部.105.
[2]马鑫.养血愈风颗粒中芍药苷含量的高效液相色谱测定方法[J].中国医药指南，2013，26（11）：340-342.