两株植物内生菌的次生代谢产物研究

论文摘要

微生物来源的天然产物具有良好的生物活性、较低的毒性等特点,在成药潜力方面具有化学合成药不可比拟的优势。随着对微生物次级代谢产物的深入研究,微生物资源的重复筛选问题日渐突出,新活性成分的发现几率逐渐降低。因此,开拓新的微生物资源,从特殊生境微生物中寻找新颖结构的活性物质成为天然药物研究的重要领域。动植物来源内（共）生微生物能够产生结构新颖、活性多样的次生代谢产物,成为药物先导化合物的重要来源。本学位论文对两株植物内生菌链格孢菌Alternaria sp.W-1和球毛壳菌Chaetomium gsum IFB-WQ的次生代谢产物进行了研究。Alternaria sp.W-1是从中国威海海域的海带（Laminaria japonica）中分离得到的一株内生真菌,该菌株采用液体发酵,其发酵液经乙酸乙酯萃取得粗浸膏20g。C globosum IFB-WQ是从传统药用植物白茅（Imperata cylindrical）中分离得到的一株内生真菌,该菌株采用固体发酵,其固体发酵产物经正丁醇萃取得粗浸膏17g。上述两株内生菌的发酵产物粗浸膏分别经硅胶柱层析初步分离,得到各极性组分;再分别以1H-NMR谱和TLC示踪,综合采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、反相柱层析、高效液相色谱等方法进行组分的追踪分离纯化,结果从Alternaria sp.W-1中分离获得5个化合物（1～5）,从C.globosum IFB-WQ中分离获得5个化合物（3和6-9）。采用高分辨质谱、1D和2D核磁共振谱等波谱技术及文献比对的方法对化合物进行结构鉴定,上述化合物分别被鉴定为6-iso-tricycloalterarene 6a（1）,tricycloalterarene 6a（2）、uracil（3）、5-methyluracil（4）、lumichrome（5）、Chaetoglobosin E（6）和Chaetoglobosin Vb（7）。其中,化合物1和2为tricycloalterarene类化合物,化合物1是未见文献报道的新化合物;化合物6和7为细胞松弛素类化合物;化合物3同时从菌株Alternaria sp.W-1和C.globosum IFB-WQ中分离得到;化合物8和9的结构有待进一步鉴定。本学位论文还采用MTT法测定了化合物2对人肝癌细胞株SMMC-7721的体外细胞毒活性,结果发现,化合物2对SMMC-7721细胞有一定的细胞毒活性,在浓度为100 μg/mL时其对SMMC-7721细胞的增殖抑制率为44.95%,而阳性对照顺铂的IC50值是8.64 μg/mL。细胞松弛素类化合物是结构类型丰富、生物活性多样的一类真菌次生代谢产物。我们前期实验发现,该类化合物除对人肝癌细胞株SMMC-7721、人胃癌细胞株SGC-7901和人宫颈癌细胞株Hela等具有明显的体外细胞毒活性,它们还对帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型细胞（MPP+损伤的PC12细胞）和新生儿缺血缺氧脑病（neonatalhypoxie-ischemic encephalopathy,NHIE）模型细胞（OGD模型大鼠原代星形胶质细胞）具有显著的神经保护活性。细胞松弛素类化合物是一类神经保护剂,在PD和NHIE等治疗药物研制方面极具研究开发潜力。tricycloalterarene类化合物也是一类结构类型丰富的真菌次生代谢产物,我们前期实验发现,该类化合物对人肝癌细胞株SMMC-7721和人胃癌细胞株SGC-7901具有明显的体外细胞毒活性,其中TCA 3a对SMMC-7721细胞的体外抗肿瘤活性与诱导细胞G1期周期阻滞、促进细胞凋亡相关。tricycloalterarene类化合物的药理活性研究相对较少,有待进一步深入。因此,继续进行这两类真菌次生代谢产物的分离纯化、结构鉴定和药理活性研究,发掘结构新颖、活性突出的化合物,可为新药研发提供重要的实验依据,应用前景广阔。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略词表
• 第一章 Tricloalternarene化合物研究进展
•   1.1 Tricycloalternarene化合物
•     1.1.1 链格孢属真菌产生的Tricycloalterarene化合物
•     1.1.2 球座菌属真菌产生的Tricycloalterarene化合物
•     1.1.3 曲霉属真菌产生的Tricycloalterarene化合物
•     1.1.4 其他真菌产生的Tricycloalterarene化合物
•   1.2 Tricycloalternarene衍生物
•   1.3 展望
•   参考文献
• 第二章 两株植物内生菌的次生代谢产物研究
•   2.1 仪器与材料
•     2.1.1 实验仪器
•     2.1.2 实验材料
•   2.2 实验方法
•     2.2.1 菌株来源及发酵方法
•     2.2.2 发酵产物的提取
•     2.2.3 化合物的分离纯化
•     2.2.4 化合物结构鉴定
•     2.2.5 化合物体外细胞毒活性测定
•   2.3 实验结果
•     2.3.1 化合物结构解析
•     2.3.2 化合物的结构鉴定
•     2.3.3 化合物体外细胞毒活性
•   2.4 结论与讨论
•   参考文献
• 附录: 化合物谱图
• 致谢
• 攻读学位期间发表的学术论文

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 陈曦

导师: 申丽

关键词: 植物内生菌,次生代谢产物,化合物,细胞松弛素化合物,细胞毒活性

来源: 扬州大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 扬州大学

分类号: Q945

DOI: 10.27441/d.cnki.gyzdu.2019.001009

总页数: 68

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