导读:本文包含了六邻体蛋白基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,综合征,蛋白,病毒,载体,河北,序列。
六邻体蛋白基因论文文献综述
杜冬华,周静,王爱华[1]（2013）在《鸡减蛋综合征病毒河北分离株六邻体蛋白基因的表达及免疫活性测定》一文中研究指出为了研究减蛋综合征病毒河北分离株(EDSV-HB)六邻体(Hexon)蛋白免疫原性,试验对六邻体基因进行了表达及免疫活性测定,将克隆得到的EDSV-HB株Hexon基因亚克隆到pET-32a-c(+)原核表达载体上,并用重组蛋白免疫6周龄非免疫鸡,用间接ELISA方法检测。结果表明:免疫鸡均产生了较高的抗体水平。说明体外表达的重组蛋白保留了天然蛋白所具有的抗原性。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2013年07期）
杜冬华,周静,王爱华[2]（2013）在《鸡减蛋综合征病毒河北株六邻体蛋白基因的克隆与序列分析》一文中研究指出为了研究鸡减蛋综合征病毒河北分离株(EDSV-HB)遗传变异规律,试验采用PCR方法对鸡EDSV-HB株Hexon基因进行PCR扩增和序列测定,并将其核苷酸及推导的氨基酸序列与标准株AV-127、中国株AA-2及其他腺病毒六邻体基因进行了比较分析。结果表明:EDSV-HB株Hexon基因的全序列为2 733 bp,共编码910个氨基酸;EDSV各毒株之间六邻体蛋白同源性极高,均为98.6%以上;EDSV-HB株六邻体蛋白的氨基酸序列与国际标准株AV-127(强毒株)六邻体蛋白的氨基酸序列同源性更高,达99.7%,而与中国株AAV-2(弱毒株)同源性为98.6%。说明六邻体蛋白是EDSV的主要结构蛋白,比较保守;EDSV-HB株与国际标准株AV-127同为强毒株。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2013年03期）
陈红梅,傅光华,程龙飞,施少华,彭春香[3]（2008）在《种番鸭减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆与序列分析》一文中研究指出运用PCR技术从表现产蛋异常的种番鸭分离鉴定的减蛋综合征病毒(EDSV)E05株中分段扩增六邻体蛋白基因,分别与克隆载体pMD18-T连接后,转化感受态细胞,对经PCR鉴定和酶切鉴定均为阳性的克隆进行测序.结果表明,E05株六邻体蛋白基因长度为2733 bp,共编码910个氨基酸.序列分析表明,该株病毒与鸡源EDSV 127株和鹌鹑源EDSV QU株六邻体蛋白基因的核苷酸同源性分别为99.6%和96.0%,氨基酸同源性分别为99.9%和99.3%.(本文来源于《福建农林大学学报(自然科学版)》期刊2008年03期）
崔艳[4]（2008）在《犬2型腺病毒六邻体蛋白结构分析、改造及其基因转移载体的研究》一文中研究指出重组腺病毒基因转移载体被广泛应用于基因治疗和重组疫苗研究领域。目前,动物腺病毒常被应用于相应易感动物重要疫病的重组疫苗研究,并已显示出良好的安全性。本实验室在前期工作中,建立了以犬2型腺病毒(CAV-2)为载体表达狂犬病病毒弱毒株SRV9糖蛋白的重组CAV-2疫苗,免疫试验结果表明,该重组疫苗可诱导动物机体产生针对狂犬病病毒的具有保护水平的中和抗体。该重组腺病毒是针对复制非必须区E3区进行缺失并插入外源基因,外源基因只能以分泌形式进行表达,与完整的病毒颗粒相比,外源蛋白诱导的抗体水平较低,虽然已达到国际要求的保护水平,但仍有进一步提高的空间和必要。重组病毒免疫中和抗体水平较低的原因是多方面的,在很大程度上与外源蛋白产量不高以及相当数量的靶动物机体本身携带的抗腺病毒抗体相关。因此,本研究进行了以犬2型腺病毒主要衣壳蛋白——六邻体为基础表达外源性抗原表位的基因转移载体的探索性研究。腺病毒衣壳由叁个主要衣壳蛋白构成:六邻体、纤突和五邻体基质。六邻体,是结构最大、数量最多的腺病毒衣壳蛋白,构成整个病毒粒子的衣壳表面。在成熟病毒粒子中,六邻体是以单体叁聚化形成病毒的二十面体结构,因此每个病毒粒子共含有720个拷贝。人的2型和5型腺病毒晶体结构已经得到实验解析,每个六邻体单体的基底部由两个β折叠基序构成,从基底延伸出叁个长环形成了分子顶端的“塔”区,形成病毒粒子的外部。比较不同血清型腺病毒六邻体蛋白发现,凸出于衣壳表面的环相对应的序列在氨基酸顺序和长度上都缺乏保守性,这些非保守区序列被称为超变区。基于人腺病毒不同血清型六邻体序列比对的早期研究,认为在六邻体蛋白分子中存在七个超变区,最近文献中报道了更精确的人2型腺病毒超变区的位置,并且发现第7超变区是由叁个独立的非保守区构成,因此超变区数目最终确认为九个。研究表明超变区不参与维持六邻体结构的完整性,因此假设对其氨基酸残基进行修饰改造不会影响病毒的包装。近来已有许多关于人腺病毒六邻体超变区改造成功的报道,分别是在不同超变区插入或替换为不同长度的外源序列肽段,突变后显示重组病毒的形成、稳定性和天然受体介导的病毒感染等生物学特性同原始病毒相近,并且能够检测到外源基因以不同程度和形式的表达。为了探索以犬2型腺病毒六邻体蛋白为基础基因转移载体研究的可行性,建立一种犬腺病毒抗原表位展示技术,本研究通过生物信息学手段分析CAV-2六邻体蛋白结构,推断超变区的位置,然后在不同超变区替换入狂犬病病毒糖蛋白线性表位,通过重组病毒的包装探索CAV-2六邻体蛋白中可修饰的区域,验证超变区的位置,从而为构建一种新型的基因转移载体,并作为抗原展示性疫苗研究奠定基础。本实验首先通过PCR分别获得犬2型腺病毒疫苗株YCA-18和弱毒株CC0710六邻体蛋白基因,进行克隆及测序,并推导氨基酸序列,与其它已知不同血清型的哺乳动物腺病毒六邻体蛋白序列进行比对,利用蛋白质同源模建方法预测CAV-2六邻体蛋白的二级、叁级结构,与已经实验方法解析的人2型和5型腺病毒六邻体蛋白结构进行比较分析,推导出CAV-2六邻体蛋白超变区的可能位置。根据不同超变区在六邻体蛋白中所处的空间位置,选择位于蛋白表面的第2、3、5和7超变区作为改造靶点。在本实验室前期构建的CAV-2感染性全基因组质粒pPolyII-CAV-2的基础上,通过重迭延伸PCR方法对超变区内的氨基酸残基进行缺失并替换为狂犬病病毒糖蛋白中和性线性表位WSPIDI,并在两侧加入柔性氨基酸LGS,分别构建了基于上述四个超变区的犬2型腺病毒六邻体蛋白基因转移载体。最后,通过脂质体介导重组全基因组转染MDCK细胞。在严格控制重组CAV-2全基因组质粒质量的情况下,虽经多次和重复转染,未能检测到重组腺病毒粒子的产生。Western-blotting分析转染后细胞,结果能够检测到六邻体蛋白的表达,说明CAV-2重组全基因组能够在转染体系中进行复制、转录和翻译功能,进一步说明腺病毒包装可能是影响无法获得重组病毒的重要因素。重组CAV-2六邻体蛋白空间结构模建分析发现,HVR2,HVR3和HVR5的突变导致loop1整体结构发生松散或紧缩的趋势,其中HVR2区域在缺失插入后形成一个多余的α螺旋,HVR3和HVR5在突变序列后侧可能的一个β折叠结构变为无规卷曲。HVR7位于loop2表面,天然二级结构预测为无规卷曲,在替换入线性表位后,出现一个额外的β折叠结构,引起loop2顶端构象改变。另外,在六邻体loop中存在多个表面衣壳蛋白相互作用位点,改造区域引起的局部空间构象改变,可能使得六邻体蛋白单体之间以及与其他蛋白相互对接的部位发生变形、错位,HVR2中的156～159位氨基酸位于六邻体蛋白的相互结合区域,其氨基酸残基被缺失替换后可能影响六邻体蛋白单体之间的相互作用力。综上所述,基于人2型和5型腺病毒六邻体成功改造实例所设计的上述四个位点的突变修饰,不能成功包装出重组病毒颗粒。从结构水平分析原因,改造可能影响了CAV-2六邻体蛋白局部空间构象和蛋白之间的相互作用,导致其包装过程受阻,最终未能获得重组CAV-2。本实验对CAV-2六邻体蛋白结构和超变区位置的分析,以及进行的CAV-2结构蛋白基因转移载体的研究,为下一步构建新型展示性犬2型腺病毒基因转移载体提供理论和实验基础。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2008-05-15）
吴志明,赵德明,程相朝,张志凌[5]（2007）在《EDSV六邻体蛋白基因核酸疫苗对减蛋综合征灭活油乳苗的免疫协同作用》一文中研究指出利用所构建的减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因真核表达质粒pcDNA3-hexon和减蛋综合征灭活油乳苗,观察了EDSV六邻体蛋白基因核酸疫苗对减蛋综合征灭活苗的免疫协同作用。结果显示,7日龄时应用核酸疫苗和减蛋综合征灭活油乳苗联合免疫的鸡群,在14~56日龄整个观察期内,胸腺T淋巴细胞对ConA、法氏囊B淋巴细胞对PMA的反应,均明显强于单纯油乳苗免疫组(其中,除在接种后第7天两组鸡的B淋巴细胞增殖OD570值差异不显着外,其余各检测时间两组间均表现为显着或极显着差异);特别是T淋巴细胞增殖情况在接种第14天后均表现为差异极显着。而且,HI抗体效价水平也持续性高于单纯灭活油乳苗免疫鸡群,并在免疫接种后35~49 d时差异显着。说明EDSV六邻体蛋白基因核酸疫苗与灭活油乳苗联合免疫,可明显提高机体的细胞免疫和体液免疫水平,产生很好的免疫协同作用。(本文来源于《河南农业科学》期刊2007年12期）
杜冬华[6]（2007）在《鸡减蛋综合征病毒河北分离株六邻体蛋白基因的克隆表达及免疫原性研究》一文中研究指出本研究主要对减蛋综合征病毒河北分离株(EDSV-HB)的六邻体(Hexon)基因进行了扩增、克隆、测序、表达及免疫原性的研究。参照GeneBank上发表的国际标准株AV-127六邻体(Hexon)基因序列，利用Premer5.0软件设计一对特异性引物。将病毒经鸭胚增殖及PEG沉淀法纯化后，用SDS-蛋白酶K的方法提取出病毒DNA，利用PCR技术扩增六邻体蛋白基因，与pBS-T载体连接后转化TOP10大肠杆菌感受态细胞，经PCR及酶切鉴定筛选出阳性重组子。经测序及序列分析表明，所扩增克隆的基因片段包括了EDSV-HB株Hexon基因从起始密码子ATG到终止密码子TGA在内的完整序列。将EDSV-HB株Hexon基因序列与EDSV国内外其它参考毒株进行序列比较，分析EDSV-HB株的遗传变异情况，得到如下结果和结论：EDSV-HB株的六邻体蛋白基因全长2733bp，共编码910个氨基酸，与GeneBank上公布的EDSV国际标准株AV-127的长度一致。由系统发育树、EDSV-HB株核苷酸序列及推导出的氨基酸序列可知，EDSV-HB、国际标准株AV-127与中国株AAV-2同属一个分枝，且EDSV各毒株之间六邻体蛋白同源性也极高，均为98.6％以上，但国际标准株AV-127是强毒株，中国株AAV-2则属弱毒株。本研究中，相比较而言EDSV-HB株六邻体蛋白的氨基酸序列与国际标准株AV-127六邻体蛋白的氨基酸序列同源性更高，达99.7％，而与AAV-2同源性为98.6％。中国株AAV-2与国际标准株AV-127六邻体蛋白的氨基酸序列的同源性为98.9％，因此可以得出EDSV-HB株与国际标准株AV-127同为强毒株的结论。EDSV-HB株六邻体基因核苷酸及氨基酸序列与其它哺乳动物及人腺病毒同源性很低，核苷酸同源性为48.4％—78.4％，氨基酸同源性为57.9％—80.9％。另外，与禽腺病毒Ⅰ群病毒代表株Fowl Adenovirus(CELO)的核苷酸同源性为51.8％，氨基酸同源性为78.3％；而与禽腺病毒Ⅱ群病毒代表株HEV(鸡出血性肠炎病毒)的核苷酸同源性也仅为40.5％，氨基酸同源性为69.1％。因此，要将减蛋综合征病毒归入禽腺病毒Ⅲ群。作者将克隆得到的EDSV-HB株Hexon基因亚克隆到pET-32a-c(+)原核表达载体对其进行了表达，经SDS-PAGE、Western-blotting检测，结果表明Hexon基因在大肠杆菌BL21(DE3)中与6×His一同表达为约110KDa的融合蛋白，且表达产物具有免疫学活性。在研究过程中，作者优化了表达条件后，对重组蛋白进行了大量表达并纯化，用于免疫六周龄非免疫鸡，用间接ELISA方法检测，免疫鸡均产生了较高的抗体水平。由此表明，体外表达的重组蛋白保留了天然蛋白所具有的抗原性。为进一步研究减蛋综合征病毒本地分离株的分子生物学特性及六邻体蛋白结构与功能等奠定了基础，也为研究EDS基因工程疫苗创造了条件。(本文来源于《河北农业大学》期刊2007-06-03）
吴志明,张春杰,李银聚,程相朝[7]（2006）在《减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆与真核表达载体的构建》一文中研究指出应用降落PCR技术扩增出减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因并将其克隆至pMDT-18载体上,酶切、PCR及测序结果表明插入的片段为目的基因.切下该目的基因定向克隆至pcDNA 3质粒构建六邻体蛋白基因真核表达载体pcDNA 3-hexon,经各种酶切、PCR鉴定及进一步测序鉴定,证明六邻体蛋白基因片段所插入的位置、大小、核苷酸序列和阅读框架正确无误,从而为下一步的转染、表达及进一步阐明EDSV六邻体基因结构与功能的关系和减蛋综合征基因工程苗的研究奠定了良好的基础.(本文来源于《河南农业大学学报》期刊2006年01期）
张春杰,吴庭才,程相朝,李银聚,郑祥海[8]（2005）在《减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆与原核表达载体的构建》一文中研究指出应用降落PCR技术扩增出减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因并将其克隆至pMDT-18载体上,经酶切、PCR鉴定及测序结果表明插入的片段为目的基因,全长2.733kb,共编码910个氨基酸。切下该目的基因定向克隆至pET-28a质粒构建了六邻体蛋白基因原核表达载体pET28a-hexon,经各种酶切、PCR鉴定及进一步测序后证明六邻体蛋白基因片段所插入的位置、大小、核苷酸序列和阅读框架正确无误,从而为下一步的表达及进一步阐明EDSV六邻体蛋白基因结构与功能的关系和减蛋综合征基因工程苗的研究奠定了良好的基础。(本文来源于《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集》期刊2005-09-24）
张春杰,张敏,吴庭才,李银聚[9]（2005）在《EDSV六邻体蛋白基因克隆与原核表达载体构建》一文中研究指出应用降落PCR技术扩增出减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因并将其克隆至pMDT18载体上,经酶切、PCR鉴定及测序结果表明插入的片段为目的基因,全长2.733kb,共编码910个氨基酸。切下该目的基因定向克隆至pET28a质粒构建了六邻体蛋白基因原核表达载体pET28ahexon,经各种酶切、PCR鉴定及进一步测序后证明六邻体蛋白基因片段所插入的位置、大小、核苷酸序列和阅读框架正确无误,从而为下一步的表达及进一步阐明EDSV六邻体蛋白基因结构与功能的关系和减蛋综合征基因工程苗的研究奠定了良好基础。(本文来源于《河南科技大学学报(自然科学版)》期刊2005年04期）
李银聚,吴庭才,程相朝,吴志明,张春杰[10]（2005）在《减蛋综合症病毒六邻体蛋白基因的克隆与序列分析》一文中研究指出设计了1对特异性引物,应用降落PCR法对减蛋综合症病毒(EDSV)六邻体蛋白基因进行了扩增。将扩增产物克隆至pMD18-T载体中,经酶切和PCR鉴定后,初步证明了目的片段的正确性。进一步经核苷酸序列测定表明,所扩增的基因片段长度为2.74kb,共编码910个氨基酸,与由EDSV弱毒株(AA-2)全基因组的Hind酶切片段测序所得到的六邻体结构基因推测的氨基酸序列相比,有11处氨基酸发生了变异。(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2005年08期）
六邻体蛋白基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了研究鸡减蛋综合征病毒河北分离株(EDSV-HB)遗传变异规律,试验采用PCR方法对鸡EDSV-HB株Hexon基因进行PCR扩增和序列测定,并将其核苷酸及推导的氨基酸序列与标准株AV-127、中国株AA-2及其他腺病毒六邻体基因进行了比较分析。结果表明:EDSV-HB株Hexon基因的全序列为2 733 bp,共编码910个氨基酸;EDSV各毒株之间六邻体蛋白同源性极高,均为98.6%以上;EDSV-HB株六邻体蛋白的氨基酸序列与国际标准株AV-127(强毒株)六邻体蛋白的氨基酸序列同源性更高,达99.7%,而与中国株AAV-2(弱毒株)同源性为98.6%。说明六邻体蛋白是EDSV的主要结构蛋白,比较保守;EDSV-HB株与国际标准株AV-127同为强毒株。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
六邻体蛋白基因论文参考文献
[1].杜冬华,周静,王爱华.鸡减蛋综合征病毒河北分离株六邻体蛋白基因的表达及免疫活性测定[J].黑龙江畜牧兽医.2013
[2].杜冬华,周静,王爱华.鸡减蛋综合征病毒河北株六邻体蛋白基因的克隆与序列分析[J].黑龙江畜牧兽医.2013
[3].陈红梅,傅光华,程龙飞,施少华,彭春香.种番鸭减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆与序列分析[J].福建农林大学学报(自然科学版).2008
[4].崔艳.犬2型腺病毒六邻体蛋白结构分析、改造及其基因转移载体的研究[D].中国人民解放军军事医学科学院.2008
[5].吴志明,赵德明,程相朝,张志凌.EDSV六邻体蛋白基因核酸疫苗对减蛋综合征灭活油乳苗的免疫协同作用[J].河南农业科学.2007
[6].杜冬华.鸡减蛋综合征病毒河北分离株六邻体蛋白基因的克隆表达及免疫原性研究[D].河北农业大学.2007
[7].吴志明,张春杰,李银聚,程相朝.减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆与真核表达载体的构建[J].河南农业大学学报.2006
[8].张春杰,吴庭才,程相朝,李银聚,郑祥海.减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆与原核表达载体的构建[C].中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会论文集.2005
[9].张春杰,张敏,吴庭才,李银聚.EDSV六邻体蛋白基因克隆与原核表达载体构建[J].河南科技大学学报(自然科学版).2005
[10].李银聚,吴庭才,程相朝,吴志明,张春杰.减蛋综合症病毒六邻体蛋白基因的克隆与序列分析[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2005
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