论文摘要
Inulin（菊糖）和levan是两种常见的β-果聚糖。其中,菊糖和菊糖型低聚糖已经在2018年6月份被美国FDA公开批准为膳食纤维。菊糖主要以β-（2, 1）糖苷键相,而levan型果聚糖中的果糖分子多以β-2,6糖苷键相互连接1。Levan型果聚糖具有重要的生理功能,包括改善肠道微环境、降低脂肪吸收、调节血糖水平等。利用微生物来源的果聚蔗糖酶（Levansucrase,EC 2.1.4.10）催化蔗糖合成levan果聚糖,是大规模制备levan果聚糖的重要手段。然而,大多微生物来源的果聚蔗糖酶在合成levan果聚糖的过程中具有较差的热稳定性2。根据30组氨基酸序列比对,发现具有不同热稳定性的果聚蔗糖酶在404位残基种类呈现明显的偏好性。对来自Brenneria sp. EniD312的重组果聚蔗糖酶第404位氨基酸残基进行饱和定点突变研究。结果表明,相比于原始酶,突变体酶E404L的蛋白解折叠温度提高了2.8°C,同时35°C和45°C下的热稳定性也相应提高了12.5和1.3倍;此外,突变体E404V,E404I和E404F的热稳定性也相比于原始酶有了大幅提高。经过对蛋白三维结构的分析与比较,发现404位引入疏水残基可以大幅提高酶三维结构的稳定性,进而提高了果聚蔗糖酶的热稳定性。这一研究为理性改造果聚蔗糖酶天然不足的属性提供了一定的思路,同时也为高效制备levan提高了一定的应用价值。
论文目录
文章来源
类型: 国内会议
作者: 徐炜,沐万孟
关键词: 果聚糖,果聚蔗糖酶,饱和定点突变,定向改造,应用
来源: 第十二届中国酶工程学术研讨会 2019-08-08
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 江南大学食品学院江南大学食品科学与技术国家重点实验室
分类号: Q55
页码: 121
总页数: 1
文件大小: 658k
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