导读:本文包含了免疫反应性论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:免疫,蛋白,吸虫,血液,尾蚴,基因,磷灰石。
免疫反应性论文文献综述
李润花,关丽,殷国荣[1]（2019）在《刚地弓形虫滑行相关蛋白45的克隆、表达与免疫反应性检测》一文中研究指出目的克隆、原核表达刚地弓形虫滑行相关蛋白45 (Tg GAP45)基因,检测重组蛋白r Tg GAP45的免疫反应性。方法提取刚地弓形虫RH株速殖子总RNA,逆转录合成cDNA。根据Tg GAP45基因全长编码序列的开放阅读框设计引物,PCR扩增Tg GAP45基因。扩增产物经双酶切后连接入pET30a (+)载体,重组质粒转化至大肠埃希菌(E. coli) DH5α,阳性菌落经PCR、双酶切和测序鉴定。将重组质粒pET30a (+)Tg GAP45转化至E.coli BL21 (DE3)感受态细胞,以异丙基βD硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)结合考马斯亮蓝染色检测表达产物,分别以抗His标签抗体、人抗弓形虫血清或小鼠抗弓形虫可溶性速殖子抗原(STAg)血清为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)鉴定重组蛋白免疫反应性。结果刚地弓形虫GAP45基因的cDNA开放式阅读框全长为738 bp, PCR扩增结果显示,在750 bp处有一条特异性扩增条带(带His标签),与预期大小相符。菌落PCR、双酶切以及测序结果均表明重组质粒pET30a (+)Tg GAP45构建成功。SDSPAGE结果表明,经IPTG诱导获得相对分子质量(Mr)约35 000的可溶性重组蛋白。Western blotting分析结果显示,诱导表达的蛋白为带His标签的重组蛋白,可分别被His标签抗体、人抗弓形虫血清和小鼠抗弓形虫STAg血清识别。结论刚地弓形虫RH株Tg GAP45基因片段可在原核表达系统中高效可溶性表达,该重组蛋白r Tg GAP45具有免疫反应性。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2019年05期）
万玉萌,安家慧,纪玉洁,郑瑞程,李玉峰[2]（2019）在《胸膜肺炎放线杆菌3种Apx毒素及外膜蛋白Omp2的原核表达及免疫反应性鉴定》一文中研究指出猪传染性胸膜肺炎是猪群一种常见的细菌性疾病,给养猪业造成了巨大的经济损失。为了对胸膜肺炎放线杆菌的感染情况进行监测,本研究设计了针对该菌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ和外膜蛋白Omp2的全基因PCR扩增引物,以实验室保存的血清2型和5型菌株基因组DNA作为模板成功扩增出特异性基因片段,分别将目的片段克隆入原核表达载体成功构建重组表达质粒pColdI-omp2、pColdI-ApxⅡ、pET-32am-ApxⅠ、pCold-ProS2-ApxⅢ。将重组质粒转化Rosetta感受态细胞,通过IPTG诱导表达,应用His单克隆抗体和临床阳性猪血清对表达的重组蛋白上清进行Western blot分析,结果表明表达蛋白的分子量大小与预期相符,通过诱导条件的优化可以稳定表达可溶性蛋白,可溶性蛋白能与His单克隆抗体和临床阳性猪血清发生特异性反应,证明重组蛋白具有良好的免疫反应性。该试验为后期建立胸膜肺炎放线杆菌抗体的ELISA检测方法奠定基础。(本文来源于《畜牧与兽医》期刊2019年05期）
陈静梅,李瑾,孙慧,肖婷,魏庆宽[3]（2019）在《猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因的原核表达、纯化以及免疫反应性分析》一文中研究指出目的原核表达猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因,分析重组蛋白的免疫反应性。方法参照GenBank中Ts8B2基因序列设计引物,以合成基因为模板获得预期DNA片段,双酶切后连接至原核表达载体pGEX-4T-1。将重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α(E.coli DH5α),PCR、双酶切筛选阳性质粒,测序确认后转化至E.coli Rosstea,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表达产物。尿素法提取重组蛋白,然后以脑囊虫病患者血清为一抗,Western blot分析其免疫反应性。结果 Ts8B2基因PCR扩增产物为258 bp,与理论值一致。双酶切和测序鉴定重组表达质粒构建成功,SDS-PAGE分析重组质粒转化菌表达相对分子质量为3.5×10~3,以包涵体形式存在目的蛋白,Western blot分析尿素法提取的重组蛋白能被脑囊虫患者血清识别。结论成功构建Ts8B2基因重组表达质粒表达的重组蛋白具有免疫反应性,为进一步研究该蛋白在抗体检测中的应用奠定了基础。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年02期）
刘静娴,曾晓燕,史凤娟,郭喜玲,焦永军[4]（2018）在《寨卡病毒非结构蛋白1的真核表达纯化和免疫反应性鉴定》一文中研究指出目的在HEK293F细胞中表达寨卡病毒(Zika Virus,ZKV)的非结构蛋白1(Nonstructural Protein 1,NS1),并分离纯化得到重组ZKNS1以及验证其免疫反应性。方法根据Gen Bank中的ZKNS1序列合成基因,在基因上下游分别引入信号肽和组氨酸标签,通过Not I和Xba I双酶切将基因克隆至pc DNA3.1(+)载体;将重组载体转染HEK293F细胞,重组蛋白用镍亲和柱层析纯化;免疫印迹法(Western blot)鉴定重组ZKNS1与寨卡病毒阳性人血清的免疫反应性。结果成功构建了ZKNS1的真核表达载体pc DNA3.1(+)-ZKNS1;在HEK293F细胞中重组ZKNS1以分泌形式表达于细胞培养上清中,经纯化后获得了纯度较高的分子量约为46k Da的重组蛋白;Western blot结果显示重组ZKNS1与寨卡病毒阳性人血清能发生特异性结合。结论成功构建ZKNS1的真核表达载体,获得了免疫反应性较高的纯化的重组ZKNS1,为进一步建立ELISA检测方法及制备单克隆抗体奠定了基础。(本文来源于《现代预防医学》期刊2018年17期）
陈亚然[5]（2018）在《血液灌流联合血液透析对慢性肾脏病矿物质与骨异常患者血磷免疫反应性甲状腺激素水平的影响》一文中研究指出慢性肾脏病是对人类生命安全危害极强的疾病,具有发病率高、致死率高等特点,据流行病学研究结果显示,全球范围内慢性肾脏病患病率高达10%,随着现代医学技术的不断提升,医用设备的不断更新完善,针对慢性肾脏病终末期的治疗已经获得极大突破[1]。慢性肾脏病矿物质及骨异常是该病主要并发症,对患者生存质量有着严重影响,慢性肾脏病患者因肾功能衰减,机体将出现各种骨代谢异常及矿物质异常,从而引发血管钙化、肾性骨病、继发性甲状旁腺功能亢进等疾病,严重降低(本文来源于《山西医药杂志》期刊2018年15期）
袁晓丹,侯俊玲,田艾灵,黄思扬,王春仁[6]（2018）在《大片吸虫钙结合蛋白-2(CaBp2)基因的克隆、表达及免疫反应性研究》一文中研究指出目的克隆、表达大片吸虫钙结合蛋白-2(Ca Bp2),并探索其作为诊断抗原的可行性。方法鉴定大片吸虫后,以肝片吸虫Ca Bp2的基因序列为模板,设计以Nde 1和Xho 1作为酶切位点的Ca Bp2蛋白的引物。提取大片吸虫总RNA,利用RT-PCR克隆出目的基因,对其进行测序鉴定、生物信息学分析、系统进化分析。构建p ET-30a-Fg Ca Bp2重组表达载体后,在大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中完成诱导、表达;对纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析;目的蛋白免疫家兔后,制备多克隆抗体。结果大片吸虫Ca Bp2开放阅读框为570 bp,编码189个氨基酸残基。生物信息学预测表明,CaBp2主要以α螺旋为主,β折叠较少;具有较多B细胞抗原表位。Ca Bp2呈现出可溶性表达。Western blotting检测结果表明所表达的蛋白在25 kD处存在特异性条带,其具有良好的免疫反应性。结论成功克隆大片吸虫Ca Bp2基因,其表达产物能与该蛋白的特异性多克隆抗体产生良好的免疫反应性,是潜在的大片吸虫病诊断抗原。(本文来源于《第十一届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会摘要集》期刊2018-08-10）
郭梦霞[7]（2018）在《壳聚糖/二氧化硅/羟基磷灰石3D杂化材料的体内免疫反应性分析》一文中研究指出第一章壳聚糖/二氧化硅/羟基磷灰石3D杂化材料的制备及其局部免疫反应性[目的]制备壳聚糖-二氧化硅(CS-SIO2)和壳聚糖一二氧化硅-羟基磷灰石(CS-SIO2-HA)3D杂化材料;对比分析CS-SIO2及CS-SIO2-HA杂化材料的体内免疫反应性。[方法]制备壳聚糖-二氧化硅(CS-SIO2)和壳聚糖-二氧化硅-羟基磷灰石(CS-SIO2-HA)前驱混合液,采用3D-BioprinterTM系统打印,分别获取CS、CS-SIO2和CS-SIO2-HA杂化材料,自然干燥或冷冻干燥。切割材料(0.1x0.1x0.2cm3),无菌条件下植入C57BL/6小鼠腓肠肌内。以腓肠肌钝性分离后直接缝合小鼠为对照。分别于植入术后14d、28d、42d、56d摘取包含植入物的肌组织,做冰冻切片,通过HE染色或免疫荧光检测分析植入物诱发的局部炎性渗出特征。[结果]采用溶胶-凝胶(sol-gel)工序及3D生物打印技术,成功构建CS-SIO2及CS-SIO2-HA杂化材料。电镜观察可见两种材料几何结构均匀,纳米级硅粒及羟基磷灰石颗粒散布于壳聚糖表面。组织学检测及免疫荧光观察证实,肌内植入的CS-SIO2及CS-SIO2-HA杂化材料能迅速触发植入物局部的单核(CD11b+)/巨噬细胞(F4/80+)渗出,炎性渗出于植入术后2月内基本消退。较之冻干材料,自然干燥杂化物诱发的炎性反应更为显着,材料周边同时出现树突状细胞(CD11c+)及CD3+CD4+T细胞聚集。[结论]CS-SIO2及CS-SIO2-HA3D杂化材料植入体内后,能诱发局部炎性渗出,但炎性反应在短期内迅速消退。较之自然干燥,冻干杂化物诱发的局部炎症反应更为短暂,具有更佳的体内相容性。第二章壳聚糖/二氧化硅/羟基磷灰石3D杂化材料触发移植部位肌组织的损伤和再生[目的]分析壳聚糖-二氧化硅(CS-SIO2)及壳聚糖-二氧化硅-羟基磷灰石(CS-SIO2-HA)杂化材料是否触发植入部位肌组织的损伤和再生。[方法]将 0.1x0.1x0.2cm3 的 CS-SIO2及 CS-SIO2-HA 杂化材料植入 C57BL/6 小鼠腓肠肌,以腓肠肌钝性分离后直接缝合小鼠为对照。分别于植入术后14d、28d、42d、56d摘取包含植入物的肌组织,冰冻切片,通过HE染色、Masson染色以及Dystrophin免疫荧光染色分析植入物邻近肌组织的溃变坏死情况、基质纤维化程度以及肌纤维的再生过程。[结果]HE及Masson染色结果表明,CS-SIO2及CS-SIO2-HA杂化材料均有一定程度的肌毒性,导致植入物邻近肌细胞坏死。随着植入时间延长,植入材料周边基质中纤维成分显着增加。较之CS-SIO2,CS-SIO2-HA杂化材料在炎性区诱发更为严重的胶原聚集。此外,冻干杂化物诱发的肌坏死及纤维化较自然干燥杂化物更为显着。Dystropin染色观察进一步证实,溃变的同时肌纤维开始再生。随着肌内炎症消退,损伤肌组织的再生修复高效进行,于植入后2月内完成肌修复。[结论]CS-SIO2及CS-SIO2-HA杂化材料均有一定的体内毒性作用,可诱发植入物邻近组织发生坏死和纤维化,随着材料不断降解,肌内炎症消退,肌再生启动,肌纤维进行有效修复。于CS-SIO2杂化材料中添加HA,或采用冻干技术,均会影响杂化材料的体内相容性。第叁章壳聚糖/二氧化硅/羟基磷灰石3D杂化材料诱发的全身免疫性分析[目的]分析体内植入的壳聚糖-二氧化硅(CS-SIO2)及壳聚糖-二氧化硅-羟基磷灰石(CS-SIO2-HA)3D杂化材料是否诱发全身性免疫反应。[方法]将 0.1x0.1x0.2cm3 的 CS-SIO2及 CS-SIO2-HA 杂化材料植入 C57BL/6 小鼠腓肠肌,以腓肠肌钝性分离后直接缝合小鼠为对照。分别于植入术后14d、28d、42d、56d摘取小鼠脾脏并分离脾细胞,或无菌条件下眼眶采血。流式细胞术分析脾脏中T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核/巨噬细胞、树突状细胞的数量差异,以及酶联免疫吸附试验检测外周血中补体C3的激活情况。[结果]FACs分析表明,肌内植入的CS-SIO2及CS-SIO2-HA杂化材料的降解成分仅能诱发脾脏内单核/巨噬细胞数量增加,T/B淋巴细胞、树突状细胞的数量并未发生改变。ELISA分析证实,受体鼠的血浆中补体C3水平呈现植入术后早期快速上调,随后下调的趋势。冻干杂化材料诱导的C3上调及持续时间较自然干燥材料更为显着。[结论]小鼠对CS-SiO2和CS-SIO2-HA3D杂化材料降解成分并不易感,难以触发持续的全身性免疫反应。(本文来源于《南方医科大学》期刊2018-05-19）
陆亚冬,刘贤侠,陈创夫[8]（2018）在《新疆部分地区牛轮状病毒VP6基因的原核表达与免疫反应性分析》一文中研究指出为了原核表达牛轮状病毒VP6蛋白,检测该蛋白的反应原性,对牛轮状病毒内衣壳蛋白VP6保守区设计并合成引物,表达牛轮状病毒VP6蛋白,应用Western Blot分析该蛋白的反应原性。结果显示,利用PCR方法成功扩增出目的基因,经过测序与酶切鉴定,正确构建了表达载体pET-32a-VP6,SDS-PAGE电泳显示表达产物在60 k D表达重组蛋白。表明经过Western Blot检测,该蛋白具有良好的反应原性,为后续该蛋白作为诊断抗原奠定了基础。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2018年04期）
田艾灵,张念章,张芙恺,王萌,黄思扬[9]（2018）在《大片吸虫Ras家族蛋白基因的克隆表达及免疫反应性研究》一文中研究指出Ras家族相关蛋白是多种信号转导途径的关键组成蛋白,在寄生虫的生长发育过程中发挥着重要作用,但大片吸虫的Ras家族蛋白基因(Fg Rap1)尚未见报道。本研究旨在对Fg Rap1进行克隆、表达、序列分析及免疫反应性评价。根据肝片吸虫的基因组及转录组数据,设计肝片吸虫Ras家族蛋白基因引物,以大片吸虫总RNA为模板,通过RT-PCR获得Fg Rap1基因;对其进行生物信息学分析及鉴定;然后构建p ET-SUMO-Fg Rap1重组表达载体,在大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达;对纯化的目的蛋白进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果表明,大片吸虫Fg Rap1基因大小为648 bp,编码215个氨基酸残基。生物信息学分析表明,该蛋白含有9个亲水区,但无跨膜区,有6个α螺旋、8个β折叠、2个较长的β转角、1个较长的无规则卷曲和8个主要的线性B细胞抗原表位。Fg Rap1蛋白为包涵体表达,用大片吸虫排泄分泌抗原免疫家兔的阳性血清进行Western-blot分析,表明其具有良好的免疫反应性。本研究首次克隆并鉴定了大片吸虫Ras家族蛋白基因,表达的重组蛋白具有良好的免疫反应性,该蛋白是潜在的大片吸虫诊断候选抗原。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2018年04期）
杨慧,赵殷奇,李子华,赵嘉庆,王浩[10]（2017）在《细粒棘球绦虫原头节抗原分子Eg-08002的克隆、表达及免疫反应性分析》一文中研究指出目的筛选细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)原头节抗原分子,并进行克隆、表达及免疫反应性分析。方法在对细粒棘球绦虫六钩蚴和原头节阶段表达的转录组测序数据进行差异分析的基础上,筛选出原头节阶段特异性表达的抗原分子。PCR扩增后克隆至p ET28a载体,构建原核表达载体pET28a-Eg-08002,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli)JM109,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,抗His标签镍亲和层析柱纯化重组蛋白rEg-08002,快速免染聚丙烯酰胺电泳分析表达产物;蛋白质印迹(Western blotting)分析rEg-08002的免疫反应性。ELISA分析重组蛋白rEg-08002与细粒棘球蚴病患者血清和健康人血清的免疫反应性。结果筛选出了原头节中高表达的抗原分子Eg-08002,大小为612 bp,构建原核表达载体pET28a-Eg-08002。快速免染聚丙烯酰胺电泳和Western blotting分析结果显示重组蛋白rEg-08002在E.coli JM109中获得高效表达,在相对分子质量(Mr)约为23 000处可见重组蛋白rEg-08002条带,主要以包涵体形式存在,r Eg-08002可被感染棘球蚴的小鼠血清识别。ELISA分析结果表明,12份细粒棘球蚴病患者血清和12份健康人血清的平均吸光度(A450)值分别为1.245±0.265和0.469±0.006,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论筛选出了原头节中高表达的抗原分子Eg-08002,获得的重组蛋白rEg-08002具有较好的免疫反应性。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2017年06期）
免疫反应性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
猪传染性胸膜肺炎是猪群一种常见的细菌性疾病,给养猪业造成了巨大的经济损失。为了对胸膜肺炎放线杆菌的感染情况进行监测,本研究设计了针对该菌毒素ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ和外膜蛋白Omp2的全基因PCR扩增引物,以实验室保存的血清2型和5型菌株基因组DNA作为模板成功扩增出特异性基因片段,分别将目的片段克隆入原核表达载体成功构建重组表达质粒pColdI-omp2、pColdI-ApxⅡ、pET-32am-ApxⅠ、pCold-ProS2-ApxⅢ。将重组质粒转化Rosetta感受态细胞,通过IPTG诱导表达,应用His单克隆抗体和临床阳性猪血清对表达的重组蛋白上清进行Western blot分析,结果表明表达蛋白的分子量大小与预期相符,通过诱导条件的优化可以稳定表达可溶性蛋白,可溶性蛋白能与His单克隆抗体和临床阳性猪血清发生特异性反应,证明重组蛋白具有良好的免疫反应性。该试验为后期建立胸膜肺炎放线杆菌抗体的ELISA检测方法奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫反应性论文参考文献
[1].李润花,关丽,殷国荣.刚地弓形虫滑行相关蛋白45的克隆、表达与免疫反应性检测[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2019
[2].万玉萌,安家慧,纪玉洁,郑瑞程,李玉峰.胸膜肺炎放线杆菌3种Apx毒素及外膜蛋白Omp2的原核表达及免疫反应性鉴定[J].畜牧与兽医.2019
[3].陈静梅,李瑾,孙慧,肖婷,魏庆宽.猪囊尾蚴排泄分泌抗原Ts8B2基因的原核表达、纯化以及免疫反应性分析[J].中国病原生物学杂志.2019
[4].刘静娴,曾晓燕,史凤娟,郭喜玲,焦永军.寨卡病毒非结构蛋白1的真核表达纯化和免疫反应性鉴定[J].现代预防医学.2018
[5].陈亚然.血液灌流联合血液透析对慢性肾脏病矿物质与骨异常患者血磷免疫反应性甲状腺激素水平的影响[J].山西医药杂志.2018
[6].袁晓丹,侯俊玲,田艾灵,黄思扬,王春仁.大片吸虫钙结合蛋白-2(CaBp2)基因的克隆、表达及免疫反应性研究[C].第十一届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会摘要集.2018
[7].郭梦霞.壳聚糖/二氧化硅/羟基磷灰石3D杂化材料的体内免疫反应性分析[D].南方医科大学.2018
[8].陆亚冬,刘贤侠,陈创夫.新疆部分地区牛轮状病毒VP6基因的原核表达与免疫反应性分析[J].中国兽医杂志.2018
[9].田艾灵,张念章,张芙恺,王萌,黄思扬.大片吸虫Ras家族蛋白基因的克隆表达及免疫反应性研究[J].中国兽医科学.2018
[10].杨慧,赵殷奇,李子华,赵嘉庆,王浩.细粒棘球绦虫原头节抗原分子Eg-08002的克隆、表达及免疫反应性分析[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2017
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