超滤系统制备鸡传染性支气管炎病毒HI抗原及其初步应用

论文摘要

鸡传染性支气管炎病毒（IBV）血凝抑制（HI）试验具有简便、快速的特点,适用于鸡传染性支气管炎（IB）的快速诊断。目前,我国尚无质量可靠的商品化IBV HI抗原,只能从国外购买价格昂贵的进口抗原。据多项研究表明可以将IBV浓缩后,用PLCI处理得到血凝抗原（HA）,浓缩方法多以差速离心法为主,但是超速离心机价格昂贵,不利于大众化生产。本研究拟通过IBV超滤系统和差速离心法制备HI抗原,并筛选合适的PLCI或魏氏梭菌浓度来处理抗原,以期得到合适的制备方法,使其可以在普通实验室制备,为更广泛地应用于临床打下基础。首先通过比较100kd、300kd孔径超滤管浓缩抗原,用PLCI或魏氏梭菌进行血凝处理,并与差速离心法制备的IBV HI抗原和荷兰GD抗原比较,以选出最适的IBV HI处理方法,并将其冻干保存;再通过超滤系统制备中试IBV HI抗原,与荷兰GD抗原比较,分析其特异性、灵敏性和符合率;最后通过超滤系统制备IBV HI抗原,与IDEXX-IBV试剂盒进行同批临床血清样品检测,并比较符合率。结果显示,IBV经100kd、300kd浓缩抗原和差速法浓缩抗原,加入1mL/mL PLCI+魏氏梭菌混合液、3U/mL PLCI处理的抗原,其HA效价均为1:512;经1‰甲醛灭活,冻干后保存,保存期4℃为8个月,-20℃为12个月;中试3批经100kd膜包浓缩和1批经300kd中空纤维柱浓缩100倍的IBV,经血凝性处理,灵敏性、特异性与荷兰GD公司生产的商品抗原无差异,其符合率为96%;其与IDEXX-IBV试剂盒进行同批临床血清样品检测,符合率达95.3%。综上可见,超滤系统浓缩制备HI抗原方法简单、灵敏性高、特异性强,与荷兰GD抗原和IDEXX-IBV试剂盒检测结果符合率高,适合鸡场监测和IB疫苗免疫效果检测。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略表
• 1 引言
•   1.1 国内外研究进展
•   1.2 目的与意义
•   1.3 研究内容
•   1.4 技术路线
• 2 材料
•   2.1 鸡胚及试验动物
•   2.2 基础菌毒种
•   2.3 抗体、血清
•   2.4 试验仪器及设备
•   2.5 试验试剂、耗材
•   2.6 试验所用主要试剂配置方法
• 3 方法
•   3.1 实验室研制方法
•   3.2 中试试验方法
•   3.3 临床应用比较
• 4 结果与分析
•   4.1 实验室研制结果
•   4.2 中试试验结果
•   4.3 临床应用比较
• 5 讨论
•   5.1 实验室研制
•   5.2 中试试验
•   5.3 临床应用比较
• 6 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录
• 作者简历

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 李海生

导师: 李焕荣,赵卓

关键词: 鸡传染性支气管炎病毒,抗原,超滤系统

来源: 北京农学院

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 北京农学院

分类号: S852.65

总页数: 43

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