导读:本文包含了晶体上皮论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:晶体,肾小管,草酸钙,上皮细胞,肾结石,结晶,损伤。
晶体上皮论文文献综述
张建文,徐长志,张颖,孙睿,植凡[1]（2019）在《草酸钙结石晶体对人近曲肾小管上皮细胞蛋白质表达谱的影响》一文中研究指出目的探讨肾结石草酸钙晶体对人近曲肾小管上皮细胞蛋白质表达谱的影响,筛选差异表达蛋白质并初步探讨肾结石与肾损伤的关系。方法选取临床经结石成分分析为草酸钙的肾结石标本,充分研磨后配制草酸钙晶体悬液,处理人近曲肾小管上皮细胞HK-2,提取总蛋白并通过SDS-PAGE对蛋白质量进行鉴定,通过BCA法测定蛋白浓度,然后通过TMT标记定量蛋白质组学分析法筛选实验组和对照组蛋白质表达谱的差异,最后通过生物信息学的方法进行聚类分析、GO富集分析以及差异基因相关的蛋白质相互作用网络分析。结果草酸钙晶体对HK-2细胞显示出明显的细胞毒性,细胞生长速度减慢且引起细胞形态以及培养基PH值发生显着改变。TMT标记定量蛋白质组学分析结果显示经草酸钙晶体处理后的HK-2细胞中差异表达的蛋白分子共1 141个,其中上调表达的699个,下调表达的442个。生物信息学分析结果提示这些差异蛋白在细胞外复合体、细胞器以及多种细胞学过程中发挥重要作用;差异蛋白共表达网络分析发现在细胞骨架维持(ACTB,CFL1)和细胞特殊功能如分泌和加帽中起作用的蛋白(MYH9,MYH14)关系最为密切。结论草酸钙结晶对人肾上皮细胞蛋白质表达有显着影响,并且这些差异表达的蛋白质分子可能与肾结石的形成以及肾损伤有关。(本文来源于《中华腔镜泌尿外科杂志(电子版)》期刊2019年04期）
李德荣[2]（2019）在《内质网应激在草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及机制研究》一文中研究指出目的:观察在草酸钙晶体(CaOx晶体)诱导的肾小管上皮细胞损伤中内质网应激是否被激活,并通过内质网应激抑制剂4-苯基丁酸干预,明确内质网应激在草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及机制,为预防肾结石的形成与治疗提供新思路。方法:用5个不同浓度的草酸钙晶体(0,0.25,0.5,1.0,2.0,4.0mM)干预肾小管上皮细胞24h,利用CCK-8检测细胞活力,LDH试剂盒检测细胞上清液中的LDH的活性,采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS水平及DAPI染色检测细胞核来综合评价肾小管上皮细胞损伤情况。通过Western blot技术检测各组肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白BIP与CHOP的表达水平,间接细胞免疫荧光检测肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白BIP表达及透射电子显微镜观察草酸钙晶体干预肾小管上皮细胞24h后内质网的微观形态变化评估细胞内质网应激,通过以上实验结果综合评估肾小管上皮细胞内质网应激水平。为进一步探讨内质网应激在草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及机制,我们在本次实验中应用内质网应激特异性抑制剂4-本苯基丁酸对肾小管上皮细胞进行干预,并检测4-本苯基丁酸干预后的相关指标。实验分组为:肾小管上皮细胞组(Control组)、肾小管上皮细胞+草酸钙晶体组(CaOx组)、肾小管上皮细胞+草酸钙晶体+4-苯基丁酸组(CaOx+4-PBA组)和肾小管上皮细胞+4-苯基丁酸组(4-PBA组)。在各组完成相应干预后用蛋白免疫印迹法检测内质网应激标志蛋白BIP与CHOP表达的变化,评估内质网应激水平;检测自噬标志蛋白LC3-II、LC3-II/LC3-I的比值和BECLIN-1评价自噬水平;DCFH-DA荧光探针评价细胞内ROS水平,最后通过采用LDH、CCK8及DAPI和TUNEL双染色法评价细胞损伤情况。结果:随着草酸钙晶体干预浓度的升高,草酸钙晶体对肾小管上皮细胞的影响越明显;与正常组比较,细胞活力在1.0 mM草酸钙晶体干预浓度时出现明显的抑制作用(P<0.01);细胞上清液中LDH在O.5 mM草酸钙晶体干预浓度时出现明显增高(P<0.01);而细胞内ROS则在0.25 mM草酸钙晶体干预浓度表达就开始增加(P<0.01);另外DAPI染色提示在1.0 mM时肾小管上皮细胞核出现明显浓缩,变形。Western blot检测结果显示:随着草酸钙晶体刺激浓度的增加,内质网关键蛋白BIP和CHOP表达都逐渐升高,BIP在1.0 mM草酸钙晶体干预浓度时表达量出现差异有统计学意义(P<0.01),而CHOP则在2.0 mM草酸钙晶体干预浓度时表达量出现差异有统计学意义(P<0.01)。以上指标都随着草酸钙晶体浓度的增加而增加,出现较明显的剂量依赖性。细胞间接免疫荧光显示:与正常细胞对比,4.0 mM草酸钙晶体干预肾小管上皮细胞后,细胞内BIP荧光强度明显升高。在透射电镜下我们可以看到:与对照组相比,在4.0 mM草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞24h后,细胞内质网出现了较明显的肿胀和空泡化。在4苯基丁酸干预细胞后,对相关指标进行检测。Western blot检测结果显示:与CaOx组比较,CaOx+4-PBA组内质网应激关键蛋白BIP和CHOP表达都降低(P<0.05),自噬关键蛋白LC3-II、LC3-II/LC3-I的比值和BECLIN-1的表达水平都降低了(P<0.05)。另外,在4-苯基丁酸干预后,细胞内ROS水平下降;细胞活力升高(P<0.01);细胞上清液中乳酸脱氢酶的活力减低(P<0.01);同时细胞损伤和凋亡情况得到显着改善。结论:草酸钙晶体可能通过促进内质网应激相关途径诱导肾小管上皮细胞损伤和凋亡;4苯基丁酸可通过缓解由草酸钙晶体诱导肾小管细胞发生的内质网应激,并减少由内质网应激诱导而产生的ROS和自噬来降低草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
刘权[3]（2018）在《M2型巨噬细胞对草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞凋亡的保护作用机制研究》一文中研究指出目的明确人单核细胞(THP-1)细胞序贯诱导为M1型与M2型巨噬细胞的方法,探讨共培养条件下M2型巨噬细胞对草酸钙(CaOx)晶体诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)氧化应激损伤及凋亡的保护作用机制。方法利用10ng/ml的佛波酯(Phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)诱导THP-1细胞24h为M0型巨噬细胞,100ng/ml的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)及10ng/ml的干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)诱导M0型巨噬细胞48h向M1型巨噬细胞极化,20ng/ml的白介素-4(Interleukin-4,IL-4)及20ng/ml的白介素-13(Interleukin-13,IL-13)诱导M0型巨噬细胞48h向M2型巨噬细胞极化,采用实时荧光定量PCR检测CD68、TNF-α、IL-1β、IL-1ra、CD206mRNA,酶联免疫吸附测定(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)IL-6、IL-10,Western Blot测定转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)蛋白,及显微镜观察巨噬细胞极化后形态学特征,以建立M2型巨噬细胞模型。采用0.5mg/ml的CaOx晶体刺激HK-2细胞,将M2型巨噬细胞、Apocynin(NADPH氧化酶抑制剂,Apo)与CaOx晶体诱导的HK-2细胞进行共培养,实验分组为:HK-2组、HK-2+CaOx组、HK-2+CaOx+M2组、HK-2+CaOx+Apo组、HK-2+M2组、HK-2+Apo组。采用细胞增殖活性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测各组HK-2细胞活力,酶标仪法检测各组HK-2细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性,以观察各组HK-2细胞损伤情况;流式细胞仪及Hoechst33258染色,观察各组HK-2细胞的凋亡情况。采用荧光酶标仪法检测各组HK-2细胞活性氧(Reactive oxygen species,ROS)及线粒体膜电位表达情况,Western Blot检测NADPH氧化酶p47phox、凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleave caspase-3、细胞色素C(Cytochrome c)及丝裂原活化蛋白激酶p38MAPK、Phospho-p38MAPK的表达情况,以观察M2型巨噬细胞在CaOx晶体诱导HK-2细胞损伤凋亡中NADPH氧化酶-ROS-P38MAPK信号通路的作用,采用Western Blot检测蛋白激酶Akt、Phospho-Akt蛋白表达情况,划痕实验检测HK-2增殖、迁移情况,以观察M2型巨噬细胞对HK-2细胞的增殖影响。结果实时定量PCR、ELISA、Western Blot结果显示M0型、M1型和M2型巨噬细胞的CD68mRNA相对THP-1细胞表达显着增高(P<0.05),M1型巨噬细胞相对M0型、M2型巨噬细胞TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、IL-6及MCP-1蛋白表达显着增高(P<0.05),M2型巨噬细胞相对M0型、M1型巨噬细胞IL-1ra mRNA、CD206mRNA、IL-10及TGF-β蛋白表达显著增高(P<0.05),形态学显示THP-1细胞已经极化为M0型、M1型及M2型巨噬细胞。CaOx晶体刺激HK-2细胞后与M2型巨噬细胞、Apocynin共培养结果提示,M2型巨噬细胞、Apocynin可显着增加CaOx晶体刺激HK-2细胞后的细胞活力、线粒体膜电位的释放、Bcl-2蛋白的表达(P<0.05),可显着降低CaOx晶体刺激HK-2细胞后LDH活性、ROS释放、凋亡率及p47phox、Phospho-p38MAPK、Cleave caspase-3、Cytochrome c蛋白的表达(P<0.05),M2型巨噬细胞可显着促进CaOx晶体刺激HK-2细胞Akt蛋白磷酸化的表达(P<0.05),Apocynin则无明显影响(P>0.05)。划痕结果提示M2型巨噬细胞可促进HK-2细胞增殖、迁移(P<0.05),Apocynin则无显着影响(P>0.05)。结论10ng/ml的PMA干预24h后可成功诱导THP-1细胞向M0型巨噬细胞极化,100ng/ml的LPS及10ng/ml的IFN-γ干预48h可成功诱导M0型巨噬细胞向M1型巨噬细胞极化,20ng/ml的IL-4及20ng/ml的IL-13干预48h可成功诱导M0型巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化。M2型巨噬细胞可能通过抑制NADPH氧化酶的激活、降低ROS的产生、并抑制p38MARK磷酸化途径来降低草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞的氧化应激损伤及凋亡,M2型巨噬细胞可能通过增强Akt蛋白磷酸化,进一步促进CaOx晶体损伤后肾小管上皮细胞的增殖、修复作用。(本文来源于《广西医科大学》期刊2018-05-01）
刘权,关晓峰,陶芝伟,王翔,吴基华[4]（2018）在《M2型巨噬细胞对草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞损伤的影响》一文中研究指出目的探讨M2型巨噬细胞对草酸钙晶体(CaOx)刺激肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的影响。方法将人单核细胞(THP-1)经佛波酯(PMA)及白细胞介素(IL)-4、IL-13序贯诱导为M2型巨噬细胞,使用实时定量PCR、Western Blot、ELISA法检测其表型标志物,以鉴定诱导分化情况。用浓度为0.5 mg/m L的CaOx刺激HK-2细胞,利用Transwell建立M2型巨噬细胞(上室)与HK-2细胞(下室)共培养模型,实验分组为HK-2细胞组、HK-2细胞+M2型巨噬细胞共培养组、HK-2细胞+CaOx组、HK-2细胞+CaOx+M2型巨噬细胞共培养组。使用CCK-8法检测各组HK-2细胞活力、微量酶标仪法测各组HK-2细胞上清液的乳酸脱氢酶(LDH)活性、DAPI进行凋亡染色和Western Blot检测各组HK-2细胞抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。划痕实验观测M2型巨噬细胞对HK-2细胞的迁移、修复的影响。结果表型标志物鉴定结果显示,成功将THP-1细胞序贯诱导为M2型巨噬细胞。CCK-8法结果显示M2型巨噬细胞显着增加CaOx对HK-2细胞损伤后的活力,且M2型巨噬细胞对HK-2细胞增殖具有促进作用(P<0.05)。LDH活性检测结果显示M2型巨噬细胞显着性降低CaOx刺激HK-2细胞的LDH活性(P<0.05)。DAPI染色及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达结果显示M2型巨噬细胞具有抑制CaOx刺激HK-2细胞凋亡的作用。划痕实验显示M2型巨噬细胞对HK-2细胞具有促进迁移、修复的作用。结论 M2型巨噬细胞对CaOx刺激HK-2细胞的损伤具有一定的抑制作用,且可促进HK-2细胞增殖、迁移。(本文来源于《广东医学》期刊2018年03期）
王铸,张建文,张颖,张圣平,孙睿[5]（2018）在《草酸钙结石晶体粘附对人肾上皮细胞lncRNA表达谱的影响》一文中研究指出目的比较分析肾结石草酸钙晶体对人肾上皮细胞lncRNA的表达谱的影响,筛选差异表达的lncRNA并初步探讨其与肾结石的关系。方法选取临床经结石成分分析为草酸钙的肾结石标本,充分研磨后配制草酸钙晶体悬液处理人肾上皮细胞HK-2细胞,通过MTT法测定草酸钙晶体对HK-2细胞生长的影响;提取总RNA并通过高通量转录组测序平台HiSeq 2500进行lncRNA表达谱差异性分析。对筛选获得的差异lncRNA进行Real-Time PCR验证,并通过Gene Ontology数据库和KEGG信号通路初步分析其功能。结果草酸钙晶体在数分钟内便粘附于HK-2细胞表面,并且显示出明显的细胞毒性,细胞生长速度减慢且引起细胞形态以及培养基pH值发生显着改变。RNA seq结果显示经草酸钙晶体处理后的HK-2细胞中差异表达的lncRNA有25个,其中上调表达的9个,下调表达的16个。通过实时定量RT-PCR进行验证,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论草酸钙结晶对人肾上皮细胞lncRNA以及mRNA表达有显着影响,并且这些lncRNA的异常表达可能与肾结石发病有关。(本文来源于《现代泌尿外科杂志》期刊2018年01期）
江涛,毛厚平[6]（2018）在《NPS-2390对肾小管上皮细胞钙超载及黏附晶体能力的影响》一文中研究指出目的研究钙敏感受体(CasR)抑制药NPS-2390对肾小管上皮细胞钙超载及黏附晶体能力的影响。方法在对数生长期的NRK-52E细胞中转染过表达CasR载体及空白载体,分别作为模型组及对照组。实验组在模型组的基础上加入5μg·mL~(-1)NPS-2390。蛋白免疫印迹(Western blot)及荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)技术检测各组细胞CasR的表达情况。激光共聚焦技术检测各组细胞中钙离子浓度的变化,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,用红色荧光标记的一水草酸钙晶体(Alexa Fluor350COM)刺激细胞,荧光显微镜观察细胞荧光强度。结果模型组、对照组及实验组CasR的蛋白表达量分别为0.73±0.06,0.33±0.04,0.29±0.03,模型组CasR的蛋白表达量显着高于对照组及实验组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组、对照组及实验组CasR的mRNA表达量分别为0.58±0.05,0.15±0.01及0.10±0.01,模型组CasR的mRNA表达量显着高于对照组及实验组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组、对照组及实验组钙离子荧光强度增加率分别为-34.8%,9.0%,4.3%,模型组荧光强度增加率显着低于对照组及实验组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组、对照组及实验组细胞内晶体荧光强度分别为(166±22),(241±29),(255±32)cd,模型组晶体荧光强度显着低于对照组及实验组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组、对照组及实验组细胞活力在48h时分别为3.42±0.35,2.74±0.32,2.55±0.28,模型组细胞活力显着高于对照组及实验组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组、对照组及实验组细胞活力在72 h时分别为7.16±0.63,5.64±0.51,5.24±0.58,模型组细胞活力显着高于对照组及实验组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 NPS-2390可抑制CasR的表达,进而加重肾小管上皮细胞钙超载并引起细胞活性减弱,促进细胞黏附晶体。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2018年02期）
卢穗琳,钟文,李淑珏,赵志健[7]（2017）在《草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞紧密连接损伤与TRPV5变化的调节机制》一文中研究指出目的探讨草酸钙晶体黏附肾小管上皮引起紧密连接(TJs)损伤与TRPV5变化的调节机制。方法利用一水草酸钙晶体(COM)暴露犬肾小管上皮细胞(MDCK)及TRPV5稳定过表达HEK-293细胞,2 mmol/L EGTA处理构建细胞TJs损伤模型;采用Western blot、荧光免疫、偏光显微镜等手段,分别检测TJs主要结构蛋白、Na~+-K~+-ATPase、TRPV5、晶体黏附量等指标,评估草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞TJs损伤及TRPV5表达的变化。结果 COM呈下调MDCK细胞TJs蛋白Occludin和ZO-1表达水平(P<0.01)。TJs损害后,COM黏附增加(P<0.05);Na~+-K~+-ATPase介导TJs修复,在1 min时表达最强,随着TJs修复完成而逐步减弱,晶体黏附力也逐渐减弱(P<0.01)。COM与TRPV5稳转HEK-293细胞株共培养,下调TRPV5总蛋白及膜蛋白表达水平(P<0.01)。结论草酸钙晶体引起肾小管上皮细胞之间的TJs受损,促进草酸钙晶体黏附;细胞极性破坏,TRPV5膜蛋白转运失调,最终引起TRPV5膜蛋白表达减少。尿钙增加,负反馈激发Na~+-K~+-ATPase表达使TJs进入修复环节;随着TJs的自我修复,草酸钙晶体黏附减少。(本文来源于《广东医学》期刊2017年14期）
高宇端,邵瑛[8]（2016）在《连接蛋白43在晶体上皮细胞增殖过程中表达变化的研究》一文中研究指出缝隙连接是晶体细胞膜的特征化结构[1],使细胞间形成了高度发达的通讯网络,以使得晶体内的离子和代谢产物得以交换,从而维持晶体内渗透压和代谢稳态以及晶体的透明。晶体上皮细胞(LEC)是晶体代谢最活跃的部分,担负着晶体生长、分化和损伤修复等任务。后发性白内障从白内障囊外摘除术一开始就存在,其中LEC的增殖起重要作用[2]。因此,我们通过检测兔晶体皮质吸出术后不同时期LEC连接蛋白43(Cx43)的变化与核增殖指标增殖细胞核抗原(PCNA)对(本文来源于《中国药物与临床》期刊2016年10期）
余凯,徐猛,王建敏,欧阳健明[9]（2016）在《不同形貌二水草酸钙晶体的合成、表征及其对肾上皮细胞的损伤作用》一文中研究指出合成了4种不同形貌和尺寸的二水草酸钙(COD)晶体,分别为尺寸20μm的花状、10μm的十字形、2μm的四方双锥形和1μm的棒状COD晶体。采用X射线衍射、傅立叶变换红外光谱、扫描电子显微镜(SEM)和比表面测试仪对上述4个COD晶体的理化性质进行了表征。花状和十字形COD晶体都具有尖锐的棱角;棒状、四方双锥形COD都具有完整的(100)面。随着晶体尺寸的降低和晶体表面正电荷密度高的(100)面比例增大,其Zeta电位绝对值不断减小。不同形貌COD晶体均对非洲绿猴肾上皮细胞(Vero)具有毒性作用,其细胞毒性大小与多因素相关,包括晶体的尺寸、晶面、尖锐程度、比表面积以及Zeta电位等。本研究有助于进一步阐明尿微晶形貌差异影响肾结石形成的分子和细胞机制。(本文来源于《人工晶体学报》期刊2016年09期）
甘琼枝,孙新园,姚秀琼,欧阳健明[10]（2016）在《肾上皮细胞损伤使草酸钙晶体黏附增强的分子机制》一文中研究指出研究了非洲绿猴肾上皮细胞(Vero)在损伤前后与一水合草酸钙(COM)和二水合草酸钙(COD)晶体的黏附作用及其引起的细胞反应,探讨了肾结石形成机理.COM和COD晶体与损伤细胞的黏附加重了细胞的过氧化损伤程度,导致损伤细胞的活力进一步降低,乳酸脱氢酶(LDH)释放量和活性氧(ROS)进一步增加,坏死细胞数量进一步增多,细胞体积缩小,并出现凋亡小体.COM晶体对细胞的损伤能力显着大于COD晶体.扫描电子显微镜(SEM)观测结果表明,损伤组Vero与COM微晶的黏附作用显着强于对照组,且能促进COM微晶的聚集.共聚焦显微镜观测结果表明,Vero损伤后,其表面表达的晶体黏附分子透明质酸(HA)显着增加,HA分子是促进微晶黏附的重要原因.细胞表面草酸钙的黏附量和晶体聚集程度与细胞的损伤程度成正相关.本文结果从分子和细胞水平上提示,细胞损伤是导致草酸钙肾结石形成的重要因素.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2016年06期）
晶体上皮论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:观察在草酸钙晶体(CaOx晶体)诱导的肾小管上皮细胞损伤中内质网应激是否被激活,并通过内质网应激抑制剂4-苯基丁酸干预,明确内质网应激在草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及机制,为预防肾结石的形成与治疗提供新思路。方法:用5个不同浓度的草酸钙晶体(0,0.25,0.5,1.0,2.0,4.0mM)干预肾小管上皮细胞24h,利用CCK-8检测细胞活力,LDH试剂盒检测细胞上清液中的LDH的活性,采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS水平及DAPI染色检测细胞核来综合评价肾小管上皮细胞损伤情况。通过Western blot技术检测各组肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白BIP与CHOP的表达水平,间接细胞免疫荧光检测肾小管上皮细胞中内质网应激标志蛋白BIP表达及透射电子显微镜观察草酸钙晶体干预肾小管上皮细胞24h后内质网的微观形态变化评估细胞内质网应激,通过以上实验结果综合评估肾小管上皮细胞内质网应激水平。为进一步探讨内质网应激在草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及机制,我们在本次实验中应用内质网应激特异性抑制剂4-本苯基丁酸对肾小管上皮细胞进行干预,并检测4-本苯基丁酸干预后的相关指标。实验分组为:肾小管上皮细胞组(Control组)、肾小管上皮细胞+草酸钙晶体组(CaOx组)、肾小管上皮细胞+草酸钙晶体+4-苯基丁酸组(CaOx+4-PBA组)和肾小管上皮细胞+4-苯基丁酸组(4-PBA组)。在各组完成相应干预后用蛋白免疫印迹法检测内质网应激标志蛋白BIP与CHOP表达的变化,评估内质网应激水平;检测自噬标志蛋白LC3-II、LC3-II/LC3-I的比值和BECLIN-1评价自噬水平;DCFH-DA荧光探针评价细胞内ROS水平,最后通过采用LDH、CCK8及DAPI和TUNEL双染色法评价细胞损伤情况。结果:随着草酸钙晶体干预浓度的升高,草酸钙晶体对肾小管上皮细胞的影响越明显;与正常组比较,细胞活力在1.0 mM草酸钙晶体干预浓度时出现明显的抑制作用(P<0.01);细胞上清液中LDH在O.5 mM草酸钙晶体干预浓度时出现明显增高(P<0.01);而细胞内ROS则在0.25 mM草酸钙晶体干预浓度表达就开始增加(P<0.01);另外DAPI染色提示在1.0 mM时肾小管上皮细胞核出现明显浓缩,变形。Western blot检测结果显示:随着草酸钙晶体刺激浓度的增加,内质网关键蛋白BIP和CHOP表达都逐渐升高,BIP在1.0 mM草酸钙晶体干预浓度时表达量出现差异有统计学意义(P<0.01),而CHOP则在2.0 mM草酸钙晶体干预浓度时表达量出现差异有统计学意义(P<0.01)。以上指标都随着草酸钙晶体浓度的增加而增加,出现较明显的剂量依赖性。细胞间接免疫荧光显示:与正常细胞对比,4.0 mM草酸钙晶体干预肾小管上皮细胞后,细胞内BIP荧光强度明显升高。在透射电镜下我们可以看到:与对照组相比,在4.0 mM草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞24h后,细胞内质网出现了较明显的肿胀和空泡化。在4苯基丁酸干预细胞后,对相关指标进行检测。Western blot检测结果显示:与CaOx组比较,CaOx+4-PBA组内质网应激关键蛋白BIP和CHOP表达都降低(P<0.05),自噬关键蛋白LC3-II、LC3-II/LC3-I的比值和BECLIN-1的表达水平都降低了(P<0.05)。另外,在4-苯基丁酸干预后,细胞内ROS水平下降;细胞活力升高(P<0.01);细胞上清液中乳酸脱氢酶的活力减低(P<0.01);同时细胞损伤和凋亡情况得到显着改善。结论:草酸钙晶体可能通过促进内质网应激相关途径诱导肾小管上皮细胞损伤和凋亡;4苯基丁酸可通过缓解由草酸钙晶体诱导肾小管细胞发生的内质网应激,并减少由内质网应激诱导而产生的ROS和自噬来降低草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
晶体上皮论文参考文献
[1].张建文,徐长志,张颖,孙睿,植凡.草酸钙结石晶体对人近曲肾小管上皮细胞蛋白质表达谱的影响[J].中华腔镜泌尿外科杂志(电子版).2019
[2].李德荣.内质网应激在草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及机制研究[D].广西医科大学.2019
[3].刘权.M2型巨噬细胞对草酸钙晶体诱导肾小管上皮细胞凋亡的保护作用机制研究[D].广西医科大学.2018
[4].刘权,关晓峰,陶芝伟,王翔,吴基华.M2型巨噬细胞对草酸钙晶体刺激肾小管上皮细胞损伤的影响[J].广东医学.2018
[5].王铸,张建文,张颖,张圣平,孙睿.草酸钙结石晶体粘附对人肾上皮细胞lncRNA表达谱的影响[J].现代泌尿外科杂志.2018
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