改形抗论文_程巨龙

导读:本文包含了改形抗论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗体,噬菌体,分子,论文,突变体,改形重链单域,改形抗。

改形抗论文文献综述

程巨龙^[1]（2002）在《采用定向分子进化方法构建改形抗CD28重链单域抗体及抗人卵巢癌叁特异抗体的构建与表达》一文中研究指出本研究的第一个目的是验证一种具有实际意义，简化易行构建改形抗体的新方法。与以往其它方法不同的是：该方法采用实验定向分子进化方法，不需要对抗体序列进行空间模拟，以确定人源抗体受体的FRs以及受体FRs上的哪个氨基酸残基需要进一步突变；该改形方法将抗体的改形及亲和力成熟于同一步骤完成，从而节省构建的时间及劳动强度。利用该方法构建了改形抗CD28重链单域抗体。根据鼠源抗CD28VH氨基酸序列，从GenBank中得到两个与该序列最同源的人源抗体，选用其中之一作为改形抗体的主框架FRs区。在保留鼠源CDRs氨基酸残基的同时，对主框架FRs一些氨基酸残基进行可选择替换突变，可选择替换原则根据对原始鼠源序列；鼠源抗体所在Kabat分类中的种属序列；两个人源抗体序列及人源抗体所在Kabat分类中的种属序列的比较而确定。选择大肠杆菌喜好密码子，推导出其基因序列；合成大小不同的核苷酸片段，采用重迭PCR扩增得到改形抗体全长基因。在合成片段时，将突变位点要被替换氨基酸残基和替换氨基酸残基的核苷酸采用简并合成，使二者都有机会在完整基因中出现。为了进一步提高改形抗体基因数目，在重迭PCR扩增改形抗体全长基因时，采用高浓度Mg~(2+)和Taq DNA聚合酶，以便进一步随机引入突变。利用PCR产物构建了一个改形抗CD28VH抗体库，经过叁轮淘选，获得了具有高结合活性的改形抗体基因。进一步将两个改形基因与c-myc及人IgG3'CL铰链区基因融合在大肠杆菌BL21(DE3)中表达，复性后的融合表达蛋白仍表现为具有较高与CD28分子的结合活性。这一结果表明，该构建改形抗体方法是有效和可行的，通过一步就可以获得满意的改形抗体。本研究第二个目的是构建及表达一种新的叁特异抗体：抗人卵巢癌scFv×改形抗CD3 scFv×改形抗CD28VH。构建的叁特异抗体有两种类型：环形叁特异抗体；非环形叁特异抗体。在叁特异抗体构建中使用了不同的连接肽序列(interlinker)，这些序列的使用，引入了一些不同的生物学功能。两种类型的叁博土论文中文摘要特异抗体的基因在大肠杆菌BLZI pE3）中表达后，测定了表达蛋白与CD28分子的结合活性。(本文来源于《沈阳药科大学》期刊2002-05-01）

程巨龙,王祥斌,刘晶,顾莹,张众^[2]（2001）在《对一个CDR区发生突变的改形抗CD28重链单域抗体的研究》一文中研究指出在构建改形抗CD2 8重链单域抗体时 ,得到一个具有较高免疫学活性的改形抗CD2 8重链单域抗体基因序列。其推导氨基酸序列与改形构建时所选的人源抗体的FRs同源性最高 ;其推导氨基酸序列与鼠源抗CD2 8单克隆抗体重链可变区氨基酸序列比较发现 ,该改形抗体在CDR2区 53位缺失Ala氨基酸残基 ;而在 65a位上插入一个Arg氨基酸残基。在CDR3区缺少Asp95,Lys96,Gly97,Tyr98氨基酸残基。在FR3区缺少Lys82a ,Ser82b ,Leu82c氨基酸残基。由于该序列发生的突变较大 ,作者进一步对其进行了研究。该改形抗CD2 8VH 单域抗体基因与人c myc及人IgG3’CL绞链区基因在大肠杆菌中融合表达。融合表达包涵体经复性 ,纯化处理后 ,仍具有较高与人CD2 8分子结合活性。(本文来源于《高技术通讯》期刊2001年04期）

改形抗论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

在构建改形抗CD2 8重链单域抗体时 ,得到一个具有较高免疫学活性的改形抗CD2 8重链单域抗体基因序列。其推导氨基酸序列与改形构建时所选的人源抗体的FRs同源性最高 ;其推导氨基酸序列与鼠源抗CD2 8单克隆抗体重链可变区氨基酸序列比较发现 ,该改形抗体在CDR2区 53位缺失Ala氨基酸残基 ;而在 65a位上插入一个Arg氨基酸残基。在CDR3区缺少Asp95,Lys96,Gly97,Tyr98氨基酸残基。在FR3区缺少Lys82a ,Ser82b ,Leu82c氨基酸残基。由于该序列发生的突变较大 ,作者进一步对其进行了研究。该改形抗CD2 8VH 单域抗体基因与人c myc及人IgG3’CL绞链区基因在大肠杆菌中融合表达。融合表达包涵体经复性 ,纯化处理后 ,仍具有较高与人CD2 8分子结合活性。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。