导读:本文包含了制备和鉴定论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:抗体,单克隆抗体,蛋白,交城,杂交瘤,密码子,棉铃虫。
制备和鉴定论文文献综述
赵青[1]（2019）在《未公开鉴定数据和制备方法的发明是否适合作为现有技术评价新颖性的探讨》一文中研究指出针对在化合物发明的审查实践中存在对现有技术的"公开"和对本申请的"公开"的认定标准不一致的问题,本文从多个角度分析了在化合物发明中作为现有技术的选取资格的问题,并引用国外的一些相关规定进行对比。对该问题的讨论在平衡申请人和社会公众的利益以及促进技术创新等方面具有参考意义。(本文来源于《中国发明与专利》期刊2019年12期）
董雪,徐雨昕,郭晶,龚忠阔,夏霖亚[2]（2019）在《重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定》一文中研究指出通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体的重链和轻链DNA序列,分别构建表达载体pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV,将表达载体共转染HEK-293细胞后,与C6胶质瘤细胞共培养,并将所得蛋白进行分离纯化.实验结果表明:pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV共转染HEK-293F细胞,可显着抑制C6细胞增殖(P<0.01);转染24～144h后的细胞培养上清液中均有蛋白表达;所得纯化蛋白和标准品一致;纯化所得抗体蛋白能明显抑制C6细胞增殖(P<0.05～0.01),与标准品抑制效果相似.(本文来源于《吉林大学学报(理学版)》期刊2019年06期）
李言言,刘阿华,王毅,宁梦夏,马文涛[3]（2019）在《山羊乳酪蛋白单克隆抗体的制备与鉴定》一文中研究指出制备山羊乳酪蛋白单克隆抗体可以为检测乳品中山羊乳成分提供免疫学检测手段。以山羊酪蛋白免疫Balb/c小鼠,应用细胞融合技术,制备特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体,对获得的阳性杂交瘤细胞进行连续传代和反复冻存以测定其稳定性,并对其分泌的单克隆抗体应用ELISA进行抗体特异性分析,对特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体进行抗体亚型鉴定和染色体组型分析。最终,成功的筛选出可以分泌特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,被命名为7H。经染色体组型分析,染色体数目为102条;单克隆抗体7H类别为IGg1,轻链为κ;经连续传代和反复冻存,ELISA检测细胞上清抗体发现其OD450nm值无显着性差异。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年11期）
李佳,王政杰,张磊,王英,黄欢[4]（2019）在《~(177)Lu-DOTA-anti-CITED1-PNA的制备、鉴定及其对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖能力的影响》一文中研究指出目的研究放射性镥核素(~(177)Lu)标记的结合转化激活因子(Cbp/p300 interacting transactivator with Glu/Asp rich carboxy-terminal domain 1,CITED1)mRNA反义肽核酸(antisense peptide nucleic acid,asPNA)即~(177)Lu-DOTA-anti-CITED1-PNA的制备,鉴定标记物的理化性质并探讨其在人甲状腺乳头状癌K1细胞系中的摄取能力及细胞毒性作用。方法实时荧光定量PCR(RT-PCR)鉴定肽核酸(peptide nucleic acid,PNA)的靶向特异性。通过间接标记法得到反义探针~(177)Lu-DOTA-anti-CITED1-PNA并测定其标记率,检测其体内外的稳定性。体外细胞实验测定反义探针的摄取能力及对K1细胞增殖能力影响。结果 RT-PCR显示反义肽核酸作用于K1细胞后能明显降低CITED1的表达;反义探针的放射化学纯度为(94.5±0.12)%,比活度为(8.7±0.53)MBq/μg,48 h的放射化学纯度仍大于90%;体外细胞摄取、滞留以及细胞增殖实验显示反义探针能被人K1细胞特异性摄取,且相较于未偶联的~(177)Lu和asPNA,~(177)Lu和asPNA偶联后联用具有显着的抗肿瘤细胞作用。结论成功制备了~(177)Lu标记的CITED1mRNA反义肽核酸探针,证实反义探针对K1细胞具有特异性、靶向性且反义探针的联合作用能有效降低细胞活力及增殖能力。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2019年20期）
李旭,魏德强[5]（2019）在《以烟草花叶病毒为载体的μE_3单克隆抗体的制备及鉴定》一文中研究指出目的:获得半抗原雌叁醇(μE_3)高特异性和高亲和力的单克隆抗体。方法:本研究利用烟草花叶病毒(TMV)作为抗原的载体,通过化学方法与半抗原雌叁醇(μE_3)连接形成TMV-EPMK-μE_3复合体,利用该复合体免疫小鼠,再通过杂交瘤筛选技术来获得具有高亲和力的μE_3单克隆抗体。结果:TMV-EPMK-μE_3免疫的小鼠血清效价达到1∶100 000,通过细胞融合及筛选获得4株分泌抗体效价较高的杂交瘤细胞,然后进行了亚克隆,分别命名为TE1-1、TE2-1、TE3-1和TE 4-1。抗体的效价均在10~(-8)左右,最低检测限约为1 ng。SDS-PAGE电泳结果显示4株抗体分别在25 kD和50 kD处各有一条清晰的条带,纯度都在95%以上。获得的4株抗体通过罗氏亚型鉴定试剂盒测定轻链类型均为κ;TE2-1和TE4-1单抗重链为IgG2a、 TE1-1和TE3-1单抗重链为IgG2b。TE1-1和TE3-1为TMV-EPMK-μE_3的特异性抗体。结论:利用烟草花叶病毒(TMV)作为抗原载体,提高了半抗原μE_3免疫原性,进而使μE_3能够刺激机体产生有效免疫应答。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2019年20期）
吴忠香,张雪梅,徐婧雯,宋杰,李慧[6]（2019）在《抗树鼩CD4单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定》一文中研究指出目的制备鼠抗树鼩CD4单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法将重组质粒p GEX-5X-1-CD4和pET30a(+)-CD4分别转化感受态E. coli BL21和BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并通过Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析柱纯化重组蛋白GST-CD4和His-CD4。以His-CD4蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,经杂交瘤技术筛选出能分泌抗树鼩CD4的杂交瘤细胞株,制备小鼠腹水单克隆抗体,间接ELISA法检测效价,并通过Protein A亲和层析柱纯化获得鼠抗树鼩CD4单克隆抗体,Western blot及FACS法分析其生物学特性。结果筛选出3株能稳定分泌抗树鼩CD4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为37D2、38E1、39F2,腹水单克隆抗体效价分别为1∶204 800、1∶204 800、1∶3 200。经HRP标记的38E1单克隆抗体可与树鼩PBMC总蛋白发生特异性结合,经PECy5. 5标记的38E1单克隆抗体能特异性识别树鼩PBMC。结论成功制备了鼠抗树鼩CD4的单克隆抗体,为进一步对树鼩作为动物模型的研究及应用奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年10期）
刘运超,陈玉梅,冯丽丽,汪磊,王聚财[7]（2019）在《抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定》一文中研究指出为了获得具有中和活性的抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体,分别将CSFV和杆状病毒表达系统表达纯化的CSFV E2蛋白与佐剂混合后免疫BABL/c小鼠,经杂交瘤细胞融合制备抗CSFV单克隆抗体,经过多轮亚克隆和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)筛选,成功获得5D1、8H7、9A1和13B2共4株能够稳定分泌抗CSFV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。4株单克隆抗体轻链均属于κ型,其中5D1、8H7、13B2为IgG1亚型,9A1为IgG2c亚型。间接ELISA检测结果显示,4株单克隆抗体的腹水效价在2.56×10~5～1.02×10~6;IPMA效价分别为6.40×10~4、1.28×10~5、2.56×10~5、1.28×10~5;SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,4株单克隆抗体均能与经原核表达系统及杆状病毒表达系统获得的CSFV E2蛋白发生特异性反应;IPMA检测结果显示,4株单克隆抗体均能与CSFV发生特异性反应,而与牛流行性腹泻病毒(BVDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒(PCV2)均无交叉反应。病毒中和试验证实,单克隆抗体13B2具有中和活性,其中和效价为1.28×10~4。综上,成功筛选出4株能够分泌抗CSFV特异性抗体的杂交瘤细胞株,其中单克隆抗体13B2具有中和CSFV感染活性。(本文来源于《河南农业科学》期刊2019年12期）
李涛,蒋伟,顾璇,李冰,王静静[8]（2019）在《全人源双特异性c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白的优化、制备及生物学特性鉴定》一文中研究指出目的:通过优化设计、构建c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白,探究重轻链不同组合形式对c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白与肿瘤抗原结合的亲和性和特异性的影响。方法:使用生物信息学分析、基因工程抗体技术设计、优化及制备重轻链不同组合的双特异性c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白CP1、CP2、PC1、PC2;生物分子相互作用分析仪BLItz分析融合蛋白对重组c-Met蛋白和PD-L1蛋白的亲和力,ELISA法分析其抗原结合特异性。结果:成功制备双特异性c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白,融合蛋白CP1与重组c-Met蛋白和PD-L1蛋白的亲和力和抗原结合特异性均优于CP2、PC1和PC2。结论:重轻链不同组合形式会影响c-Met/PD-L1 scFv-Fc融合蛋白与c-Met和PD-L1蛋白的亲和力和抗原结合的特异性,融合蛋白CP1的亲和力和抗原结合的特异性最高,其对应的重轻链组合形式可用于c-Met/PD-L1 CAR表达载体的构建。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2019年10期）
报讯[9]（2019）在《交城义望公司液态热熔渣规模化制备矿渣棉及制品关键技术与应用通过成果鉴定》一文中研究指出围绕铁合金产业延伸，大力发展循环经济，交城义望铁合金有限责任公司(以下简称：义望公司)自主研发了液态热熔渣直接制取矿渣棉技术，2019年9月19-20日中国建筑材料联合会组织相关行业专家，对项目进行了技术交流和成果鉴定。中国建筑材料联合会会长乔龙(本文来源于《世界金属导报》期刊2019-10-08）
王婷婷,索倩,孙晓燕,马跃敏,刘凯于[10]（2019）在《棉铃虫激活增强子结合蛋白AP-4基因的原核表达、多克隆抗体制备、表达谱分析及功能鉴定》一文中研究指出【目的】激活增强子结合蛋白4(activating enhancer binding protein 4, AP-4)是近年来备受关注的一类功能广泛的转录因子,参与Wnt/β-catenin信号通路的调控。本研究旨在研究棉铃虫Helicoverpa armigera HaAP-4基因的原核表达并制备多克隆抗体,明确HaAP-4基因的时空表达谱,初步探究HaAP-4对棉铃虫胆固醇载体蛋白2(sterol carrier protein-2, SCP-2)基因(HaSCP-2)表达的调控作用。【方法】通过PCR扩增棉铃虫HaAP-4基因片段,将其克隆至pET-28a原核表达载体,转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21,经IPTG诱导表达,采用镍柱纯化重组蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体。运用RT-qPCR检测HaAP-4基因在棉铃虫不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)以及5龄幼虫和预蛹不同组织(中肠、脂肪体、头和表皮)中的表达水平。设计并合成HaAP-4 siRNA,转染棉铃虫Ha细胞,通过RT-qPCR检测和分析使用HaAP-4 siRNA进行RNA干扰后Ha细胞中HaAP-4和HaSCP-2基因mRNA的表达情况。【结果】成功构建pET-28a-HaAP-4重组表达质粒,在大肠杆菌细胞中获得高效表达的可溶性蛋白,目的蛋白大小约为55 kD,经纯化获得了纯度较高的重组蛋白,免疫新西兰兔成功制备了多克隆抗体,通过Western blotting检测显示抗体具有较好的特异性,ELISA分析表明抗体效价较高。发育阶段特异性表达结果显示,HaAP-4基因在棉铃虫不同发育阶段均有表达,其中在卵期、5龄幼虫期和预蛹期的表达量较高。组织表达结果表明,HaAP-4基因在5龄幼虫和预蛹不同组织中均有表达,且在中肠和头部具有高表达,而在表皮和脂肪体中表达量较低。RNA干扰实验发现,HaAP-4基因的敲降对HaSCP-2基因转录有显着影响,HaSCP-2基因mRNA表达水平下降了约55%。【结论】利用pET-28a原核表达系统能有效地在体外表达可溶性的HaAP-4,并制备了较好的多克隆抗体。RNAi实验结果提示,在中肠内高表达的HaAP-4基因能促进HaSCP-2基因的转录表达,在棉铃虫脂质生理代谢过程中发挥作用。本研究为进一步深入阐明棉铃虫HaAP-4的潜在功能打下了基础。(本文来源于《昆虫学报》期刊2019年09期）
制备和鉴定论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体的重链和轻链DNA序列,分别构建表达载体pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV,将表达载体共转染HEK-293细胞后,与C6胶质瘤细胞共培养,并将所得蛋白进行分离纯化.实验结果表明:pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV共转染HEK-293F细胞,可显着抑制C6细胞增殖(P<0.01);转染24～144h后的细胞培养上清液中均有蛋白表达;所得纯化蛋白和标准品一致;纯化所得抗体蛋白能明显抑制C6细胞增殖(P<0.05～0.01),与标准品抑制效果相似.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
制备和鉴定论文参考文献
[1].赵青.未公开鉴定数据和制备方法的发明是否适合作为现有技术评价新颖性的探讨[J].中国发明与专利.2019
[2].董雪,徐雨昕,郭晶,龚忠阔,夏霖亚.重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定[J].吉林大学学报(理学版).2019
[3].李言言,刘阿华,王毅,宁梦夏,马文涛.山羊乳酪蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].动物医学进展.2019
[4].李佳,王政杰,张磊,王英,黄欢.~(177)Lu-DOTA-anti-CITED1-PNA的制备、鉴定及其对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖能力的影响[J].第叁军医大学学报.2019
[5].李旭,魏德强.以烟草花叶病毒为载体的μE_3单克隆抗体的制备及鉴定[J].中国免疫学杂志.2019
[6].吴忠香,张雪梅,徐婧雯,宋杰,李慧.抗树鼩CD4单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定[J].中国生物制品学杂志.2019
[7].刘运超,陈玉梅,冯丽丽,汪磊,王聚财.抗猪瘟病毒中和性单克隆抗体的制备与鉴定[J].河南农业科学.2019
[8].李涛,蒋伟,顾璇,李冰,王静静.全人源双特异性c-Met/PD-L1scFv-Fc融合蛋白的优化、制备及生物学特性鉴定[J].南京医科大学学报(自然科学版).2019
[9].报讯.交城义望公司液态热熔渣规模化制备矿渣棉及制品关键技术与应用通过成果鉴定[N].世界金属导报.2019
[10].王婷婷,索倩,孙晓燕,马跃敏,刘凯于.棉铃虫激活增强子结合蛋白AP-4基因的原核表达、多克隆抗体制备、表达谱分析及功能鉴定[J].昆虫学报.2019
论文知识图
