酶解大豆分离蛋白的抗原活性变化及其抗原表位分析

论文摘要

研究酶解过程中大豆蛋白分子成分和抗原性变化规律及酶解物中是否存在抗原表位序列。用碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白后,首先分别用电泳和酶联免疫法分析蛋白质分子组分和抗原活性变化,结果发现,酶解过程中新生成23 ku和21 ku抗酶解肽链直到酶解120min时仍未消失,同时酶解物中剩余28%抗原活性。进一步通过胰蛋白酶对这两个肽链胶内酶解并用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪分析后,将所得肽段氨基酸序列分别与抗原数据库中抗原表位序列和大豆分离蛋白氨基酸序列进行匹配解析,结果发现,在21 ku组分中含有两个完整的序列抗原表位（LQRFNQRSPQLQNLR和SEDKPFNLRSRDPIYSNKLGKFFEITPEKN）,且均来自β-伴大豆球蛋白中的α-亚基,21 ku组分抗原剩余率为15.7%;在23 ku肽链中含有抗原表位的部分氨基酸序列,但未发现含有完整的抗原表位序列,23 ku组分抗原剩余率为2.1%,该组分中是否含有新的未知抗原表位或是否与糖链有关尚待深入研究。上述研究结果揭示了大豆蛋白酶解物中仍残留抗原性的部分原因。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 大豆分离蛋白的水解
•     1.3.2 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳 （sodium dodecyl?sulfate-polyacrylamide?gel?electrophoresis, SDS-PAGE） 分析
•     1.3.3 竞争法ELISA对酶解物抗原活性的测定[17]
•     1.3.4 胰蛋白酶的胶内酶解
•     1.3.5?MALDI-TOF-MS分析[19]
•     1.3.6 数据库检索
•     1.3.7 肽链抗原活性测定
• 2 结果与分析
•   2.1 酶解过程中大豆分离蛋白成分的变化
•   2.2 酶解物抗原活性分析
•   2.3 MALDI-TOF-MS肽段分析
•   2.4 肽链抗原性分析
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王章存,袁路阳,张露,胡金强,安广杰,赵学伟

关键词: 大豆分离蛋白,酶解,抗原活性,抗原表位

来源: 食品科学 2019年10期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 郑州轻工业大学食品与生物工程学院,食品生产与安全河南省协同创新中心

基金: 国家自然科学基金面上项目(31671782),郑州轻工业大学研究生科技创新基金资助项目(2017023)

分类号: TS214.2

页码: 64-69

总页数: 6

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