猪链球菌2型05ZYH33菌株启动子的筛选和鉴定

论文摘要

为了筛选和鉴定用于猪链球菌（S.suis）致病因子和致病机制研究的启动子,本研究通过质谱鉴定了来自S.suis 2型05ZYH33菌株的5个高丰度蛋白质,并通过其驱动GFP蛋白和甘露糖苷酶SSU051921的表达水平,评估了这5个蛋白相应的基因启动子的强弱。结果显示,这5种蛋白质分别为SSU050177、SSU050530、SSU051503、SSU051815和SSU051868,相应的5个启动子P0177、P0530、P1503、P1815和P1868均能够有效驱动GFP在E.coli和S.suis中的高水平表达,但是P1815、P0177和P1868不能驱动SSU051921在S.suis中的表达。P0530和P1503能够驱动SSU051921在S.suis中的表达,并且P1503启动子驱动GFP和SSU051921的表达水平均比P0530启动子驱动的高两倍以上。因此,P0530和P1503是S.suis的强启动子,并且P1503更强于P0530。这在高水平表达GFP用于标记菌体,以及构建无启动子基因的回复突变菌株中发挥关键作用,在S.suis遗传操作中具有很好的应用前景。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要实验材料
•   1.2 引物的设计与合成
•   1.3 S.suis菌体组分制备和蛋白质鉴定
•   1.4 不同启动子融合gfp或甘露糖苷酶ssu05＿1 9 2 1 基因的载体构建
•   1.5 不同启动子驱动GFP在E.coli和S.suis中的表达
•   1.6 不同启动子驱动SSU05＿1921在S.suis中的表达
• 2 结果
•   2.1 S.suis 05ZYH33高丰度蛋白质的鉴定
•   2.2 高丰度蛋白及甘露糖苷酶SSU05＿1921的基因启动子分析
•   2.3 启动子与gfp基因、ssu05＿1921基因的融合
•   2.4 不同启动子驱动GFP在E.coli和S.suis中的表达
•   2.5 不同启动子驱动SSU05＿1921在S.suis中的表达
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘冉,黄萌萌,陈平,朱金鲁,谢芳,刘思国,张跃灵

关键词: 猪链球菌,强启动子,筛选和鉴定,翻译延伸因子,烯醇化酶

来源: 中国预防兽医学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病创新团队

基金: 国家重点研发计划(2017YFD0500203),国家自然科学基金(31772757,31500112),黑龙江省自然科学基金(C2017075)

分类号: S852.61

页码: 584-589

总页数: 6

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