基于ARE-Nrf2的皮肤致敏体外检测方法及其在样品检测中的应用

论文摘要

目的建立基于ARE-Nrf2荧光素酶的皮肤致敏体外检测方法,并对化学品及混合物样品进行皮肤致敏性检测。方法构建含有选择性质粒的稳转HaCaT细胞株（DSens）,不同浓度受试物与细胞共孵育48 h,通过荧光的读取检测细胞荧光素酶的表达量,从而判断物质的致敏潜力。对16种已知皮肤致敏化学物质和6种混合物样品进行皮肤致敏性预测。结果使用DSens的方法可准确区分16种参考物质的皮肤致敏性,6种混合物样品中,5种预测结果与其他检测方法预测结果一致,另一种未知样品预测为阳性。结论 DSens体外检测方法可以代替部分动物测试,用于可溶性皮肤致敏物质的预测。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 实验材料
•     1.1.1 实验动物
•     1.1.2 细胞
•   1.2 主要试剂与仪器
•   1.3 实验方法
•     1.3.1 细胞培养方法
•     1.3.2 质粒构建及稳转细胞株筛选
•     1.3.3 聚合酶链式反应（PCR）及实时定量PCR鉴定
•     1.3.4 受试物暴露
•     1.3.5 LLNA:BrdU-ELISA实验方法
•     1.3.6 结果分析
•   1.4 统计学分析
• 2 结果
•   2.1 稳转细胞株的鉴定
•   2.2 DSens实验条件确定
•   2.3 化学物样品检测
•   2.4 混合物样品检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘春凤,张丽婷,李小林,施镇,张子龙,李健,陈田,邱璐

关键词: 皮肤致敏,替代方法,混合物成品

来源: 中国比较医学杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 皮肤病与性病

单位: 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心,上海家化联合股份有限公司启初研究中心,上海国际旅行卫生保健中心

基金: 科技重大专项(2018ZX10101003-002-005),上海市科委科技专项资助项目(13140901000),上海市科委项目(18495810900)

分类号: R758.2

页码: 23-30

总页数: 8

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