导读:本文包含了红细胞分化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:红细胞,干细胞,低氧,诱导,造血干细胞,人多,能干。
红细胞分化论文文献综述
王姣杰,安慧娟,单泓,韩小改,别立莉[1]（2019）在《体外诱导外周血造血干细胞分化为成熟红细胞》一文中研究指出背景:随着人口老龄化、医疗技术不断的更新,红细胞需求呈增加趋势,血液供应也日趋紧张。体外制备可供临床应用的血液制品成为众多专家关注的热点,而体外诱导造血干细胞向成熟红细胞分化是获得新型血源的可能途径之一。目的:探讨采用叁阶段悬浮培养体系诱导外周血废弃白膜层来源造血干细胞向成熟红细胞分化及体外生产成熟红细胞的可行性。方法:经河南省红十字血液中心伦理委员会批准,采用外周血废弃白膜层为原料(献血者均知情同意),分离出CD34~+细胞,以此为种子细胞,采用叁阶段21 d悬浮培养体系体外诱导造血干细胞向成熟红细胞分化,分别在第4,7,9,11,13,15,17,19,21天进行细胞计数,绘制细胞生长曲线,了解细胞生长情况;在第7,11,15,19,21天进行细胞涂片和瑞氏-吉姆萨染色,显微镜下观察细胞形态学变化;在培养第7天时,采用流式细胞仪检测红系早期分化情况;在第7,11,15,17天时,采用流式细胞仪检测红系终末分化情况;在第15,17,19天时,采用流式细胞仪检测脱核率。结果与结论:①随着培养天数增加,细胞呈增加趋势,到第17天达高峰,细胞扩增约1 300倍,之后趋于平稳状态;②随着培养天数的增加,细胞从原幼红细胞向嗜碱性幼红细胞、多染幼红细胞、正染幼红细胞分化,培养至21 d时,几乎全部分化为脱核红细胞;③红系早期分化情况:IL-3R/GPA双阴性细胞占(15.8±0.21)%,其中红系爆发集落形成单位(BFU-E)占(0.98±0.21)%,红系祖细胞克隆形成单位(CFU-E)占(8.13±1.42)%;④红系终末分化情况:随着细胞培养天数的增加,GPA表达也逐渐增加,培养至第17天时,接近90%的细胞表达GPA,表明造血干细胞定向红系分化较为成功;⑤随着培养天数的增加,无核红细胞越来越多,至第19天80%以上均为无核红细胞;⑥结果表明,采用叁阶段21 d悬浮培养体系,体外诱导来自废弃白膜层的外周血造血干细胞向成熟红细胞分化,可以生产成熟红细胞,且能达到较高脱核率。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2019年29期）
徐长禄,赵艳红,马艺戈,王冰蕊,王鼎[2]（2019）在《利用生物信息学方法解析自噬相关基因在人体红细胞终末分化各阶段的动态表达》一文中研究指出为了探究自噬相关基因在人体红细胞终末分化各阶段的表达概况,利用生物信息学方法对人体终末分化各阶段红细胞转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)数据中自噬相关基因的表达进行提取并分析。结果表明,自噬相关基因在红细胞终末分化各阶段呈现不同的表达模式;在红细胞终末分化的早期,超过50%的自噬相关基因呈现高表达状态;原始红细胞及早幼红细胞中高表达的自噬相关基因富集的生物学过程主要包括细胞自噬及其调节、蛋白质的磷酸化及囊泡的运输,而线粒体自噬相关基因主要在中幼红细胞及晚幼红细胞阶段高表达。研究发现,自噬相关基因在人体红细胞终末分化各阶段的表达呈现动态变化;不同阶段的红细胞中高表达的自噬相关基因及其富集的生物学过程均不同。(本文来源于《生物技术进展》期刊2019年03期）
王姣杰,安慧娟,单泓,刘敏,韩小改[3]（2018）在《诱导外周造血干细胞向成熟红细胞分化的实验研究》一文中研究指出目的探讨采用叁阶段悬浮培养体系,体外利用外周血来源造血干细胞生产成熟红细胞的可行性;方法利用外周血白膜层为原料,分离出CD34+细胞,以此为种子细胞,采用叁阶段21 d悬浮培养体系体外诱导造血干细胞向成熟红细胞分化,分别在d4,d7,d9,d11,d13,d15,d17,d19,d21进行细胞计数,绘制细胞生长曲线,了解细胞生长情况;在d7,d11,d15,d19,d21进行细胞涂片,May-Giemsa染色,显微镜下观察并拍照;在培养d7时,采用流式检测红系早期分化情(本文来源于《中国输血协会第九届输血大会论文专辑》期刊2018-11-01）
赵慧娟,王文天,李园,魏晓晶,杨洋[4]（2018）在《遗传性红细胞增多症相关HIF2α基因点突变对人CD34+造血干祖细胞体外红系分化的影响》一文中研究指出该文旨在研究与遗传性红细胞增多症相关的低氧诱导因子HIF2α基因点突变对人造血干祖细胞红系分化的影响。通过构建人HIF2α基因编码区、携带疾病相关的两个点突变体(M535V和G537R)以及文献中报道的HIF2α基因阳性对照突变(P531A)慢病毒表达载体,分别包装病毒并感染人脐血来源的CD34+造血干祖细胞,并进行常氧及5%低氧条件下的红系定向诱导分化培养。利用FACS流式分析比较红系分化进程特征分子CD71和CD235a的表达变化,结合荧光定量PCR检测HIF2α调控的红系分化相关的靶基因表达水平。结果显示,构建的HIF2α及突变体的慢病毒载体经病毒包装后感染K562细胞可在RNA和蛋白水平实现过表达;与对照组相比,感染表达HIF2α基因或其突变体病毒后的脐血CD34+HSPC在常氧及5%O_2条件下诱导红系分化培养的细胞CD71和CD235a的表达动态均无明显改变,但HIF调控的红系分化相关基因EPOR和VEGFA的表达水平有一定升高。综上,在体外红系分化培养体系中,慢病毒介导的HIF2α及突变体的过表达不直接影响造血干祖细胞的红系分化进程,提示疾病相关的HIF2α基因突变造成的红系分化异常增多的细胞内外调控机制需要更进一步的深入研究。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2018年09期）
张宇[5]（2018）在《造血干细胞（CD34~+细胞）体外高效扩增及向红细胞分化制备通用血液的研究》一文中研究指出背景:造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)被广泛应用于实验室基础医学研究及临床血液病的移植治疗。本实验室在之前的研究中,筛选优化出一种体外扩增高效培养扩增HSC的方案(Hematopoietic expansion medium,HEM),并且在免疫缺陷小鼠体内证实了扩增获得的HSCs具有多系分化和长期植入造血潜能。由于HSC具有自我更新和多系分化潜能,将HSC在体外诱导分化大规模制备红细胞是提供一种血液替代品,应对临床血液供应不足的潜在解决方案。目的:结合本实验室已有的研究工作基础,本论文围绕HSC体外安全高效扩增及向红细胞的定向诱导分化展开研究,旨在非人类灵长类大动物体内进一步评价扩增后获得的HSCs的功能性和安全性,并为体外大规模诱导HSC分化制备红细胞应用于临床输血提供临床前研究资料。方法:1.首先收集食蟹猴动员后外周血,分离富集CD34+造血干细胞,并将HEM应用于食蟹猴造血干细胞扩增。在体外通过集落形成实验和流式免疫表型分析鉴定经HEM扩增的CD34+的多系分化能力及HSCs特征;食蟹猴(共11只)接受环磷酰胺给药处理,造成骨髓抑制模型;用GFP病毒标记体外扩增后的细胞用于自体移植,移植分组如下:空白对照组(n=3,移植时给予生理盐水),阴性对照组(n=3,移植时给予自体CD34-细胞),实验组(n=5,给予扩增后的自体CD34+细胞移植)。在移植术后,定期抽取食蟹猴静脉血,进行血常规测定及流式分析等,观察动物的造血系统恢复情况,综合评价移植进入猴体内的造血干细胞的功能性和安全性。2.从人O型脐带血中分离富集造血干细胞,在HEM的基础上,我们继续优化因子配方并尝试用滚瓶培养体系完成红细胞定向诱导分化的体外中试规模制备,并对体外制备获得的红细胞的安全性、有效性、稳定性进行研究,包括体外研究(细胞表型、基因组稳定性与细胞周期、血红蛋白含量及功能性评价、体外储存稳定性等)和体内研究(免疫缺陷小鼠及非人灵长类动物食蟹猴体内的输注研究)。结果:1.食蟹猴CD34+细胞可经HEM扩增达到移植数量要求,集落形成能力实验显示扩增后CD34+细胞保持了多系分化能力。实验组食蟹猴(给予自体CD34+细胞移植)在骨髓抑制后的血象恢复明显快于对照组(移植时给予生理盐水或CD34-细胞),在移植后一个月可在食蟹猴骨髓和外周血中的淋巴系和髓系细胞中均可检测到GFP+细胞,且接受移植的食蟹猴在移植术后全部健存,在随后长达18个月的跟踪检测中未出现肉眼可见病变。2.运用滚瓶培养系统对人脐血造血干细胞进行定向诱导分化21天,总细胞扩增可超过2 × 108倍,该产量相当于单份脐带血(约5 × 106个CD34+细胞作为起始)经过体外分化培养可获得500个输血单位所含红细胞量。体外制备的人晚幼红细胞,CD235a表达90.1 ± 6.2%,脱核率50 ± 5.7%,具备和人正常外周血相当的血红蛋白和氧合功能,在免疫缺陷小鼠体内可进一步分化为终末成熟的无核红细胞,且在失血性贫血猴体内输注后可发挥携氧功能,改善猴贫血症状。结论:1.经HEM扩增后的CD34+细胞经自体移植到骨髓抑制的食蟹猴体内后,对食蟹猴的血象恢复有促进作用,并具备向髓系和淋巴系分化的能力,及植入食蟹猴骨髓的能力。本研究验证了 HEM体外高效扩增CD34+细胞用于临床前大动物自体移植的安全性和有效性,为体外扩增后的人造血干细胞移植应用于临床治疗提供了临床前研究参考资料。2.在HEM的基础上进一步优化建立了一个用于CD34+造血干细胞体外扩增并定向诱导分化成红细胞的培养技术体系,该培养体系包括使造血干细胞高效扩增及分阶段定向诱导红系分化的因子组合配方,和滚瓶中试规模放大培养系统。首次实现了造血干细胞定向分化为红细胞的中试规模制备,并通过一系列体外和小鼠及食蟹猴体内实验完成了体外制备红细胞的临床前研究,验证了体外制备的红细胞的安全性和有效性,为体外红细胞产业化制备从实验室走向临床研究提供了数据支持和参考。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2018-08-01）
王思乐[6]（2018）在《人多能干细胞向红细胞特异诱导分化》一文中研究指出红细胞的体外制备为血液的医学研究提供了新的思路。传统的诱导方法有两种,拟胚体法和基质细胞共培养法。然而这两种方法存在步骤繁琐、诱导周期长、效率较低、含有动物源性物质的缺陷。本研究对以往的方法进行了改进,实现了红细胞的“两步法”诱导。首先将hiPS细胞和hUCMSC~(Rh-A)细胞贴壁培养,使其向中胚层方向分化,诱导为CD31~+和CD34~+细胞群。随后收集上一步的CD31~+和CD34~+细胞群,在特异造血因子的作用下使其向红细胞方向诱导分化。最终获得了hiPS来源的红细胞,通过吉姆萨染色和荧光定量PCR检测其大小形态与正常红细胞相似,且表达成熟的β-globin,而hUCMSC~(Rh-A)细胞来源的红细胞为未成熟的红细胞。采用Rh阴性的人脐带间充质干细胞为研究对象,是为了获取Rh阴性的红细胞,为体外制备Rh阴性O型的“万能血”提供了新的思路。本研究获得的主要结果如下:1.人多能干细胞的体外培养和鉴定hiPS细胞在体外培养的过程中,细胞克隆形态和增殖速度均正常,并未出现衰老和分化的迹象。通过细胞的免疫荧光法,对多能标记OCT4、SOX2以及NANOG进行了检测,结果显示这些多能标记在hiPS细胞中呈阳性。hUCMSC~(Rh-A)细胞在体外培养时,始终呈现梭形的形态,没有细胞分化和凋亡。利用RT-PCR法检测hUCMSC~(Rh-A)细胞多能基因的表达,结果发现其表达间充质干细胞标志的基因CD29、CD90和CD117,不表达CD31、CD34和CD45等与造血相关的基因。随后,采用细胞流式技术,检测hUCMSC~(Rh-A)细胞中多能标记的表达水平,结果发现其高表达CD44和CD71,低表达CD31、CD34和CD45等。2.人多能干细胞向CD31~+和CD34~+细胞群的诱导分化优化的“两步法”诱导,首先将hiPS细胞和hUCMSC~(Rh-A)细胞通过贴壁培养,诱导为CD31~+和CD34~+的细胞群。hiPS细胞经过6天的诱导,用细胞流式仪检测发现,hiPS细胞来源的CD31~+和CD34~+细胞群中,表达CD31的细胞占细胞总数的31.2%,表达CD34的细胞占细胞总数的8.2%。hUCMSC~(Rh-A)细胞经过10天的诱导,并用细胞流式仪和RT-PCR法检测收集的细胞。结果发现,第10天时hUCMSC~(Rh-A)细胞来源的CD31~+和CD34~+细胞群,其中表达CD31的细胞占细胞总数的5.3%,表达CD34的细胞占细胞总数的22.7%。第14天时hUCMSC~(Rh-A)细胞来源的CD31~+和CD34~+细胞群中,只有1.2%的分化细胞群体表达CD31,5.6%的分化细胞群体表达CD34,说明随着诱导的进行,表达CD31和CD34的细胞逐渐减少。3.CD31~+和CD34~+细胞群分化为红细胞“两步法”诱导的第二阶段是经过36天的持续悬浮诱导,将hiPS细胞来源的CD31~+和CD34~+细胞群诱导为红细胞。通过吉姆萨染色发现,诱导得到的红细胞已有脱核的现象,且其形态大小与人正常红细胞相似。采用qRT-PCR检测globin基因的表达水平,结果表明,γ-globin、ε-globin和β-globin叁种基因的表达比例分别是74%、6%和20%。将诱导得到的红细胞进行2个小时的静置,获得了红色的细胞沉淀。然而,hUCMSC~(Rh-A)细胞来源的CD31~+和CD34~+细胞群,将其进行第二步诱导,但目前只能获得诱导分化为未成熟的红细胞。通过RT-PCR法检测globin基因的表达发现,诱导获得的未成熟红细胞不表达成熟红细胞中的β-globin,和未成熟的ε-globin,只表达未成熟的γ-globin。综上所述,本研究采用贴壁—悬浮“两步法”的诱导法,成功获得了类似造血祖细胞的的CD31~+和CD34~+细胞群(hiPS细胞和hUCMSC~(Rh-A)细胞来源)和有成熟β-globin表达的红细胞(hiPS细胞来源)。本研究优化了以往的诱导体系,为红细胞体外的大量制备提供了新的技术方法和研究思路。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2018-05-01）
王敏,潘旭,毛斌,赖默温,滕嘉雯[7]（2018）在《胶原支架促进人类多能干细胞向红细胞的诱导分化》一文中研究指出目的建立人胚胎干细胞(hESCs)来源的造血干/组细胞向红细胞分化的体外3D培养方法。方法hESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾区(AGM-S3)基质细胞共培养14 d后获得CD34~+CD45~+造血干/祖细胞,对获得的CD34~+CD45~+细胞扩增5 d后,以相同初始接种数量分别接种于胶原水凝胶、透明质酸水凝胶、Ⅰ型胶原蛋白构建的叁维(3D)支架材料(简称胶原支架)中,在体外模拟骨髓微环境,做红细胞定向分化,以普通液体悬浮培养(简称液体培养)为对照,通过MGG染色、流式细胞术、免疫染色、qRT-PCR等手段分别对收获的细胞做形态学、红系特异性表面标志表达情况、红系细胞成熟程度以及红系细胞发育过程中相关基因的表达情况分析。结果红系定向分化14 d后,胶原支架中收获的总细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.50、1.19、1.33倍,GPA~+CD71~+细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.55、1.25及1.48倍;GPA~+CD36~+细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.65、1.07、1.36倍。结论利用Ⅰ型胶原蛋白构建的3D支架材料可模拟骨髓微环境,促进红细胞分化。(本文来源于《中国输血杂志》期刊2018年04期）
王思乐,王宁,蔡元星,王华岩[8]（2018）在《人多能干细胞向红细胞的诱导分化》一文中研究指出目前,体外生成人红细胞的实验技术较为复杂,为优化诱导步骤,采用两步法将人多能干细胞诱导分化为红细胞。首先,利用人多能干细胞(包括Rh阴性A型的脐带间充质干细胞(hUCMSC~(Rh-A))和人iPS(hiPS)细胞)在BVF培养液中进行诱导分化得到CD31+和CD34~+的阳性细胞群。经PCR和流式细胞仪检测CD31和CD34的表达发现,hUCMSC~(Rh-A)细胞诱导得到的CD31和CD34阳性细胞率分别是5.3%和22.7%;hiPS细胞诱导得到的CD31和CD34阳性细胞率分别是31.2%和8.2%。第二步,将获得的CD31~+和CD34~+的阳性细胞群在多种生长因子的作用下经过36 d诱导,分化为成熟红细胞。经吉姆萨染色检测得到的红细胞在形态和大小上与正常人红细胞相近,且存在血细胞去核的现象。荧光定量RT-PCR检测到了globin的表达,其中β-globin的表达量占20%以上。将得到的红细胞收集到离心管中,自然沉降后可见红色的红细胞沉淀。上述研究为大量制备人红细胞提供了新的有效的技术方法。(本文来源于《生物工程学报》期刊2018年06期）
廖瑜,王玮,冯琳,汤锋,格日力[9]（2018）在《慢性低氧对小鼠骨髓有核红细胞分化与凋亡的调控作用》一文中研究指出目的以慢性低氧刺激30天的Balb/c小鼠为模型观察慢性低氧对小鼠骨髓有核红细胞分化及凋亡的调控作用。方法选用全自动生化分析仪行小鼠血液学分析,结合流式细胞术检测慢性低氧30天小鼠骨髓CD71~+、Ter119~+有核红细胞增殖分化及凋亡的变化。结果慢性低氧30天小鼠RBC、HGB、HCT指标均显着高于对照组(P<0.01)。低氧组小鼠骨髓单个核细胞CD71~+细胞数显着高于对照组(37.2067±4.38%vs.6.3367±1.16%,P=0.004),Ter119~+细胞数显着高于对照组(51.53±2.91 vs.6.93±0.45,P=0.001),低氧组小鼠骨髓单个核细胞CD71~+、Ter119~+细胞的凋亡率均高于对照组,并有显着性差异(P<0.01)。结论慢性低氧对小鼠骨髓单个核CD71~+、Ter119~+有核红细胞的增殖分化具有促进作用。同时,由于机体代偿负反馈引起凋亡率增加。(本文来源于《中国高原医学与生物学杂志》期刊2018年01期）
陈旭东,徐纪伟[10]（2017）在《促红细胞生成素对小鼠诱导多能干细胞源性神经干细胞向功能性神经元样细胞分化的影响》一文中研究指出目的:探讨促红细胞生成素体外对小鼠诱导多能干细胞(iPSCs)来源的神经干细胞神经分化的影响。方法:神经干细胞培养基培养诱导iPSCs分化为神经干细胞,设4个浓度加入含促红细胞生成素的培养基,免疫细胞化学荧光鉴定神经元标志物微管相关蛋白2(MAP-2)、神经干细胞标志物巢蛋白的表达。FM 1-43染色技术观察FM 1-43染色颗粒消失的情况。结果:iPSCs在条件培养液的诱导下形成神经干细胞克隆,15 U/ml促红细胞生成素处理后神经干细胞克隆球向神经元方向分化,呈MAP-2阳性细胞。新分化的神经元有大量FM 1-43绿色阳性颗粒。结论:iPSCs体外诱导可获得神经干细胞,促红细胞生成素浓度为15 U/ml时可促进iPSCs源性神经干细胞向功能性的神经元方向分化。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2017年05期）
红细胞分化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了探究自噬相关基因在人体红细胞终末分化各阶段的表达概况,利用生物信息学方法对人体终末分化各阶段红细胞转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)数据中自噬相关基因的表达进行提取并分析。结果表明,自噬相关基因在红细胞终末分化各阶段呈现不同的表达模式;在红细胞终末分化的早期,超过50%的自噬相关基因呈现高表达状态;原始红细胞及早幼红细胞中高表达的自噬相关基因富集的生物学过程主要包括细胞自噬及其调节、蛋白质的磷酸化及囊泡的运输,而线粒体自噬相关基因主要在中幼红细胞及晚幼红细胞阶段高表达。研究发现,自噬相关基因在人体红细胞终末分化各阶段的表达呈现动态变化;不同阶段的红细胞中高表达的自噬相关基因及其富集的生物学过程均不同。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
红细胞分化论文参考文献
[1].王姣杰,安慧娟,单泓,韩小改,别立莉.体外诱导外周血造血干细胞分化为成熟红细胞[J].中国组织工程研究.2019
[2].徐长禄,赵艳红,马艺戈,王冰蕊,王鼎.利用生物信息学方法解析自噬相关基因在人体红细胞终末分化各阶段的动态表达[J].生物技术进展.2019
[3].王姣杰,安慧娟,单泓,刘敏,韩小改.诱导外周造血干细胞向成熟红细胞分化的实验研究[C].中国输血协会第九届输血大会论文专辑.2018
[4].赵慧娟,王文天,李园,魏晓晶,杨洋.遗传性红细胞增多症相关HIF2α基因点突变对人CD34+造血干祖细胞体外红系分化的影响[J].中国细胞生物学学报.2018
[5].张宇.造血干细胞（CD34~+细胞）体外高效扩增及向红细胞分化制备通用血液的研究[D].北京协和医学院.2018
[6].王思乐.人多能干细胞向红细胞特异诱导分化[D].西北农林科技大学.2018
[7].王敏,潘旭,毛斌,赖默温,滕嘉雯.胶原支架促进人类多能干细胞向红细胞的诱导分化[J].中国输血杂志.2018
[8].王思乐,王宁,蔡元星,王华岩.人多能干细胞向红细胞的诱导分化[J].生物工程学报.2018
[9].廖瑜,王玮,冯琳,汤锋,格日力.慢性低氧对小鼠骨髓有核红细胞分化与凋亡的调控作用[J].中国高原医学与生物学杂志.2018
[10].陈旭东,徐纪伟.促红细胞生成素对小鼠诱导多能干细胞源性神经干细胞向功能性神经元样细胞分化的影响[J].解剖学杂志.2017
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