论文摘要
目的探讨二甲双胍对酸性环境下的调节性T细胞（Treg）的调控及二甲双胍的抗肿瘤作用。方法经磁珠分选得到CD4+CD25+Treg细胞。在pH 7.4或pH 6.7环境加入二甲双胍干预的条件下,培养Treg或T细胞（Tcon）24～72 h后,采用流式细胞术检测细胞增殖、凋亡及Foxp3表达情况,采用Real-time PCR检测糖代谢相关基因水平。动物实验中,将32只C57BL/6雄性小鼠单次皮下注射RM-1细胞建立小鼠前列腺癌模型,随机分为PBS对照组、二甲双胍治疗组、疫苗治疗组及联合治疗组（各组n=8）。于接种后第4天开始,按100 mg·kg-1·d-1给予二甲双胍治疗组及联合治疗组小鼠腹腔注射二甲双胍,给予疫苗治疗组及联合治疗组小鼠每4 d一次肌注疫苗。PBS注射作为对照。连续监测肿瘤大小,在植瘤后第25天处死小鼠获取肿瘤及血液样本。采用流式细胞术检测瘤内及外周血内CD4+、CD8+、CD4+Foxp3+细胞亚群的变化。结果较中性缓冲条件,酸性环境下Treg细胞活性增强（P<0.05）,而Tcon细胞增殖受到抑制（P<0.001）。QPCR结果显示,酸性环境较正常酸碱环境下,Treg细胞OXPHOS相关基因pgc1a（P<0.001）及cox5b（P<0.01）水平增高,而Tcon细胞内相关基因水平变化不显著。酸性环境下Treg细胞凋亡显著减少（P<0.01）、Foxp3+细胞比例增加（P<0.001）、胞内pH值偏碱性（P<0.001）,加入二甲双胍,逆转了Treg细胞的酸性耐受。但是,二甲双胍对Tcon细胞影响不显著。动物实验中,二甲双胍（P<0.05）或疫苗（P<0.01）单独治疗均可减小肿瘤体积,而联合治疗组肿瘤体积减小最多（P<0.001）。二甲双胍单独治疗对肿瘤内CD4+细胞、CD8+细胞影响不明显,但可显著降低CD4+Foxp3+细胞比例（P<0.05）,而疫苗单独治疗显著提高肿瘤内CD4+细胞、CD8+细胞（P<0.001）,但CD4+Foxp3+细胞也升高（P<0.05）。联合治疗组肿瘤内CD4+细胞、CD8+细胞增高最多（P<0.01）,CD4+Foxp3+细胞比例较疫苗单独治疗组下降（P<0.01）。结论二甲双胍抑制酸性环境下的调节性T细胞增殖及功能,并且在体内通过减少Treg细胞比例提高肿瘤疫苗效果,发挥抗肿瘤功能。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 韦莉莉,罗周翔,李金龙,李红卫,梁瑶,李金连,申玉婷,李天柏,宋捷,胡志明
关键词: 二甲双胍,肿瘤微环境,细胞,抗肿瘤作用,肿瘤疫苗,前列腺癌
来源: 南方医科大学学报 2019年12期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 药学
单位: 南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所
基金: 国家自然科学基金(81373122)~~
分类号: R96
页码: 1427-1435
总页数: 9
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