牙龈卟啉单胞菌来源的外泌体对食管癌细胞增殖迁移作用的研究

牙龈卟啉单胞菌来源的外泌体对食管癌细胞增殖迁移作用的研究

论文摘要

目的探究牙龈卟啉单胞菌来源的外泌体(P. gingivalis-Exo)对食管癌增殖迁移的影响。方法超速离心法提取P. gingivalis-Exo,通过透射电镜、纳米粒度分析仪对外泌体进行物理表征分析;共聚焦显微镜观察红色荧光染料DIR标记的外泌体被食管癌细胞(KYSE-30/KYSE-150)摄取能力;外泌体与食管癌细胞共培养后,采用MTT、Transwell、划痕和Western blot实验评估外泌体干预前后对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭以及TGF-β1信号通路相关蛋白表达水平的影响。结果透射电镜观察P. gingivalis-Exo大小均一,形状如典型的外泌体"圆碟"状,P. gingivalis-Exo粒径约为130 nm; DIR标记的外泌体可被食管癌细胞摄取;与对照组相比,外泌体共培养组细胞增殖能力明显增强(P<0.05),侵袭细胞数量明显增多(P<0.05),划痕愈合速度也显著加快(P<0.05); Western blot分析TGF-β信号通路相关蛋白TGF-β1、Smad2表达明显增加。结论TGF-β1/Smad2通路可能参与了P. gingivalis-Exo促进食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 仪器
  •     1.1.2 菌株及细胞
  •     1.1.3 试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细菌培养
  •     1.2.2 细胞培养
  •     1.2.3 外泌体提取
  •     1.2.4 电镜鉴定P.
  •     1.2.5 Zetasizer Nano分析P.gingivalis-Exo粒径
  •     1.2.6 细胞摄取P.gingivalis-Exo
  •     1.2.7 MTT实验
  •     1.2.8 划痕实验
  •     1.2.9 Transwell实验
  •     1.2.1 0 Western Blot实验
  •   1.3 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 P.gingivalis-Exo的物理表征
  •   2.2 P.gingivalis-Exo进入食管癌细胞
  •   2.3 P.gingivalis-Exo促进食管癌的增殖、迁移和侵袭
  •   2.4 P.gingivalis-Exo通过TGF-β1/Smad2通路调控食管癌的增殖、迁移
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王浩洁,史浩,齐义军,朱梦玺,陈攀,兰子君,张灏,梁高峰,高社干

    关键词: 食管癌,牙龈卟啉单胞菌,外泌体,增殖

    来源: 食管疾病 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 河南科技大学医学院,河南省肿瘤表观遗传学重点实验室河南科技大学第一附属医院,暨南大学肿瘤精准医学和病理研究所

    基金: 国家自然科学基金(81741147),中国博士后基金(2019M652533)

    分类号: R735.1

    页码: 17-22

    总页数: 6

    文件大小: 1170K

    下载量: 82

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