茄子紫外光受体蛋白基因SmUVR8的克隆及功能分析

论文摘要

以光敏感型茄子（Solanum melongena L.）‘蓝山禾线茄’子叶为材料,克隆了紫外光受体蛋白基因UVR8同源基因SmUVR8的cDNA全长序列,并对序列进行生物信息分析,通过转化拟南芥突变体以及实时荧光定量PCR研究其功能。序列分析表明,SmUVR8的CDS全长1 530 bp,编码509个氨基酸,属于较不稳定亲水性蛋白。蛋白序列比对发现,SmUVR8与其他茄科植物的UVR8高度同源。通过拟南芥uvr8突变体转化试验发现,转基因植株（SmUVR8/uvr8）恢复了野生型的表型,说明SmUVR8与拟南芥的UVR8功能具有相似性。通过实时定量PCR发现,UV-B照射影响SmUVR8以及下游SmHY5和SmCHS的表达。酵母双杂交结果表明,SmUVR8与SmCOP1的互作依赖于UV-B。推测UV-B在茄子中是通过紫外光受体SmUVR8与SmCOP1的互作,促进SmHY5和SmCHS的表达。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 SmUVR8的克隆
•     1.2.1 引物设计
•     1.2.2 RNA提取及cDNA合成
•     1.2.3 pMD-19T-SmUVR8质粒的构建
•     1.2.4 大肠杆菌转化及测序
•   1.3 基因序列的生物信息学分析
•   1.4‘蓝山禾线茄’幼苗UV-B处理
•   1.5 拟南芥转化验证基因功能
•     1.5.1 PCAMBIA1302-SmUVR8表达载体的构建
•     1.5.2 拟南芥的浸花转化与筛选
•     1.5.3 拟南芥的UV-B处理
•   1.6 差异表达基因的q RT-PCR分析
•   1.7 酵母双杂交
•     1.7.1 酵母双杂交重组表达载体的构建
•     1.7.2 酵母双杂交检测Sm UVR8和SmCOP1.1、SmCOP1.2蛋白之间的相互作用
• 2 结果与分析
•   2.1 SmUVR8序列分析
•   2.2 SmUVR8的功能分析
•     2.2.1 UV-B对茄子幼苗的影响
•     2.2.2 UV-B对拟南芥的影响
•   2.3 SmUVR8与Sm COP1蛋白在酵母发生依赖于UV-B的相互作用
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张君豪,何永军,周露,刘杨,陈火英

关键词: 茄子

来源: 园艺学报 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,园艺

单位: 上海交通大学农业与生物学院

基金: 国家自然科学基金项目(31872944)

分类号: S641.1;Q943.2

DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0776

页码: 295-306

总页数: 12

文件大小: 2756K

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