溴化乙锭诱导的短暂脱髓鞘增强PRV的逆行转导效率

论文摘要

目的:改进伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）的注射方法,通过溴化乙锭（ethidium bromide,EB）诱导的短暂脱髓鞘提高PRV的转导效率。方法:选用18只正常成年Wistar大鼠,随机分为肌肉组、NS组和EB组（n=6）。肌肉组将2μl滴度为2×109的PRV工具病毒注射到胫骨前肌和腓肠肌上; NS组将2μl生理盐水（normal saline,NS）注射到坐骨神经上,1周后相同位置注射2μl滴度为2×109的PRV; EB组将2μl 0. 1%的EB注射到坐骨神经上,1周后相同位置注射2μl滴度为2×109的PRV。大鼠注射PRV 5天后,灌流取材并制作冰冻切片,观察各级神经元的感染情况。结果:EB组大鼠L4-L5脊髓前角神经元和背根神经节（DRG）、T8脊髓中间神经元、C4脊髓中间神经元、延髓、中脑、大脑皮层均有大量神经元被PRV标记。肌肉组和NS组各级神经元仅有少量被PRV标记。结论:EB诱导坐骨神经脱髓鞘后能够显著提高PRV的逆行转导效率。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试剂和仪器
•   1.2 实验动物
•   1.3 灌流和取材
•   1.4 组织切片的分析
•   1.5 数据统计分析
• 2 结果
•   2.1 大鼠PRV的注射位点
•   2.2 注射溴化乙锭显著提高PRV感染L4-L5运动神经元的效率
•   2.3 注射溴化乙锭显著提高PRV感染感觉神经的效率
•   2.4 注射溴化乙锭显著提高PRV感染T8中间神经元的效率
•   2.5 注射溴化乙锭显著提高PRV感染C4中间神经元的效率
•   2.6 注射溴化乙锭显著提高PRV感染脑区核团的效率
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘法东,段红梅,郝鹏,赵文,高钰丹,杨朝阳,李晓光

关键词: 溴化乙锭,脱髓鞘,伪狂犬病病毒,效率

来源: 中国生物工程杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 北京航空航天大学生物与医学工程学院生物材料与神经再生北京市重点实验室,首都医科大学神经生物学系,北京航空航天大学生物医学工程高精尖创新中心生物材料与神经再生北京市国际科技合作基地

基金: 国家自然科学基金(31730030,31670988,31771053,31650001,31320103903),国家重点研发计划(2017YFC1104001,2017YFC1104002),北京市科技计划(Z181100001818007),北京市教育委员会2018年度科技计划重点项目(KZ201810025030)资助项目

分类号: Q42

DOI: 10.13523/j.cb.20191205

页码: 35-41

总页数: 7

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