淡色库蚊与骚扰库蚊触角嗅觉基因表达分析

论文摘要

目的了解淡色库蚊与骚扰库蚊触角中差异性表达的嗅觉基因,为揭示二者遗传分化特征提供参考依据。方法分别设置淡色库蚊吸血前、后,骚扰库蚊吸血前、后等4个实验组。每组共设4个生物学重复样品,每个样品取20只蚊虫触角。采用TRIzol法提取各组样品总RNA,采用NEBNext Ultra TM RNA R文库构建试剂盒构建文库。对转录组基因进行测序,通过FPKM值差异性分析,筛选淡色库蚊与骚扰库蚊分别在吸血前、后表达差异显著的嗅觉基因,并进行实时荧光定量PCR （qRT-PCR）验证。结果淡色库蚊吸血前、后触角转录组共注释了50个气味结合蛋白（OBP）和31个气味受体（OR）基因,骚扰库蚊吸血前、后触角转录组共注释了36个OBP和12个OR。淡色库蚊吸血后较吸血前显著上调的OBP有4个,无显著下调的OBP。骚扰库蚊吸血后较吸血前显著上调和下调的OBP分别有3个。淡色库蚊吸血后较吸血前无显著上调的OR,显著下调的OR有3个。骚扰库蚊吸血后较吸血前无显著上调的OR,显著下调的OR有1个。qRT-PCR验证结果显示,淡色库蚊吸血后OBP17显著上调;骚扰库蚊吸血后OBP31、 OBP44表达量显著上调,其中OBP44与测序结果一致,OBP31与测序结果相反。吸血前,骚扰库蚊OBP17显著高于淡色库蚊;吸血后,骚扰库蚊OBP31、 OBP44显著高于淡色库蚊,OBP99a显著低于淡色库蚊。骚扰库蚊吸血后OR31、 OR65、 CPIJ001069表达量均显著上调,其中OR65和CPIJ001069表达量显著高于淡色库蚊（P <0.05）。淡色库蚊吸血后无显著变化的OR基因。结论淡色库蚊与骚扰库蚊的嗅觉基因OBP和OR表现出了进化分化,OBP17、 OBP44可能参与调控骚扰库蚊吸血后行为。OR31、OR65、 CPIJ001069可能参与调控骚扰库蚊吸血后行为。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 蚊虫来源
•   1.2 主要试剂
•   1.3 RNA提取
•   1.4 文库构建
•   1.5 生物信息学分析
•   1.6 qRT-PCR检测
•   1.7 统计学分析
•   1.8 伦理批准和患者知情同意
• 2 结果
•   2.1 OBP和OR基因表达量差异性分析
•   2.2 OBP和OR基因qRT-PCR结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周洁,李春晓,兰策介,高剑,刘钦梅,孙爱娟,赵彤言

关键词: 淡色库蚊,骚扰库蚊,高通量分析技术,嗅觉基因

来源: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2019年04期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 安徽医科大学,军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室媒介生物危害和自然疫源性疾病北京市重点实验室,浙江省疾病预防控制中心,苏州市疾病预防控制中心

基金: 国家自然科学基金（No.81371847）,国家科技重大专项（No.2017ZX10303404）~~

分类号: R384.1

页码: 453-457

总页数: 5

文件大小: 741K

下载量: 75