导读:本文包含了重组逆转录病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:病毒,逆转录,核酸,技术,层析,树突,菜豆。
重组逆转录病毒论文文献综述
张阳,孙涛,徐聪林,周冲[1]（2019）在《登革病毒逆转录重组酶聚合酶扩增-测流层析试纸条检测方法的建立与评价》一文中研究指出目的建立快速简便的登革病毒检验方法对控制登革热疫情至关重要。方法本研究首次建立了一种登革病毒的RT-RPA-LFD检测技术,结果本研究建立的RT-RPA-LFD检测技术能同时检测四种血清型的登革病毒,具有较好的重复性,特异性高,对乙型脑炎病毒、基孔肯雅热病毒、黄热病毒和塞卡病毒没有交叉检测,并且具有较高的检测灵敏度,对四种血清型的登革病毒检测限都低至10拷贝/反应。结论综合考虑其快速性和操作简便性,RT-RPA-LFD是一种非常有前景的登革病毒一线检测技术。(本文来源于《口岸卫生控制》期刊2019年03期）
马磊,曾繁文,丛锋,袁文,朱余军[2]（2019）在《小鼠诺如病毒逆转录重组酶聚合酶扩增检测方法的初步建立》一文中研究指出小鼠是科学研究中使用最多的实验动物,小鼠诺如病毒(MNV)是试验小鼠感染率最高的病毒性病原,因此MNV感染小鼠将影响研究结果,及时对小鼠健康状态进行监测必不可少。本研究根据逆转录重组酶聚合酶扩增技术(RT-RPA),通过引物探针的筛选,建立了检测MNV的RT-RPA方法。该方法具有较好的敏感性和特异性,通过荧光扩增曲线判定样本中是否含有MNV,在20 min内即可实现样本的检测。将该方法应用于临床样本的检测,结果显示32个样本中有6个阳性,和RT-qPCR检测结果总符合率达到97%。该方法的建立对于试验小鼠的日常病原监测和MNV流行病学研究具有重要意义。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年05期）
齐菊菊[3]（2019）在《逆转录重组酶介导等温核酸扩增技术在呼吸道合胞病毒检测中的应用》一文中研究指出目的:在全球范围内,呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是一种引起婴幼儿下呼吸道感染常见的病毒病原体,给社会造成了巨大的医疗和经济负担。重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification,RAA)是具有我国自主知识产权的等温核酸快速检测技术。RAA扩增产物的检测可分为荧光法和侧流层析试纸条法(Lateral Flow Dipstick,LFD)。本研究旨在建立两种方法实现呼吸道合胞病毒的快速检测,一种为含有内参的双重实时荧光逆转录重组酶介导等温核酸扩增技术(IC-rtRAA),另一种是将RAA技术与LFD相结合的LFD-rtRAA技术。评价该两种检测方法的灵敏度和特异性,并分别应用于临床标本的检测,进行临床标本检测效能的评价。方法:本研究从美国国立生物技术信息中心(NCBI)中下载RSV病毒的全基因序列,并利用Vector NTI软件进行序列比对,找出其保守区(靶基因区)。1.IC-rtRAA检测方法:根据RAA引物探针设计原则,并针对比对出的保守区设计引物和探针数条,随后筛选出最优的引物探针组合。在本实验中,首先建立了单重实时荧光逆转录重组酶介导等温核酸扩增技术(Singleplex-rtRAA),随后在此基础上加入内参,建立了含有内参的双重实时荧光逆转录重组酶介导等温核酸扩增技术(IC-rtRAA)。2.LFD-rtRAA检测方法:根据RAA-LFD引物探针的设计原则,设计了适用于LFD-rtRAA法的引物探针,并进行相应的修饰,建立了LFD-rtRAA检测方法。用含有靶基因的重组质粒标准品对此两种方法进行灵敏度的评价;用其他常见呼吸道病毒进行特异性的评价;分别利用已建立好的IC-rtRAA检测方法和LFD-rtRAA检测方法与文献报道的RT-qPCR方法同时检测278份临床标本,计算Kappa值,进行检测结果一致性比较,评估该两种方法的临床检测效能。结果:1.IC-rtRAA法的分析灵敏度为5.0拷贝/反应,未与其他常见呼吸道病毒发生交叉反应,特异性良好。采用该方法检测278例临床标本,结果与RSV RT-qPCR分析结果完全一致。2.LFD-rtRAA法可检测到的最低RSV质粒浓度为10拷贝/反应,未与其他常见呼吸道病毒发生交叉反应,特异性良好。采用该方法检测278例临床标本,结果与IC-rtRAA法和RSV RT-qPCR分析结果完全一致。结论:本研究建立的两种RAA检测方法在快速检测RSV方面具有很大的应用潜力,简便快速且具有较高的灵敏度和特异性,为呼吸道合胞病毒的检测提供了新工具。IC-rtRAA检测方法中内参的引入,保证了检测结果的准确性,有利于其在临床上的应用,且内参设计中所采取的策略对基于RAA的检测技术的实际应用具有一定的参考价值。LFD-rtRAA检测方法更适用于经济欠发达地区或现场快速检测。(本文来源于《河北医科大学》期刊2019-03-01）
张永江,魏霜,袁俊杰,乾义柯,李桂芬[4]（2018）在《一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增(RT-RPA)技术检测菜豆荚斑驳病毒》一文中研究指出菜豆荚斑驳病毒(bean pod mottle virus,简称BPMV)是我国进境植物检疫性有害生物,建立快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增(reverse transcription-recombinase polymerase amplification,简称RT-RPA)技术用于对BPMV的检测。根据BPMV基因组的保守序列,设计重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,简称RPA)技术特异性引物,对BPMV、南方菜豆花叶病毒(southern bean mosaic virus,简称SBMV)、大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,简称SMV)、南芥菜花叶病毒(arabis mosaic virus,简称Ar MV)及烟草环斑病毒(tobacco ringspot virus,简称TRSV)共5种病毒进行RT-RPA特异性验证;并设计5个模板浓度梯度,以验证RT-RPA方法的灵敏性。结果表明,建立的RT-RPA检测方法能够从BPMV样品中检测到198 bp的特异性条带,且仅需在40℃下恒温反应40 min,不需要特殊的仪器设备;特异性验证试验表明,除BPMV能检测到特异性条带外,其他4种病毒SBMV、SMV、Ar MV、TRSV均未检测到特异性条带,证明该方法特异性好; RT-RPA检测BPMV的灵敏度达到10-4稀释度,说明所建立的RT-RPA方法灵敏性高。综上所述,建立的RT-RPA方法检测BPMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2018年21期）
袁俊杰,魏霜,龙阳,马新华,杨卓瑜[5]（2018）在《一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增技术(RT-RPA)检测大豆花叶病毒》一文中研究指出大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是一种在全世界广泛分布并且破坏性极大的植物病毒,可以导致大豆产量骤减以及种质的衰退,为此,建立了快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测技术(RT-RPA),利用该技术可以快速、准确、有效地检测大豆中携带的SMV。根据Gen Bank数据库中SMV的外壳蛋白基因序列,设计RPA特异性引物,采用SMV、BPMV、SBMV、Ar MV及TRSV共5种病毒进行RT-RPA特异性验证;并设计5个模板浓度梯度,验证RT-RPA方法的灵敏性。结果显示,建立的RT-RPA检测方法能够从SMV样品中检测到154 bp的特异性条带;特异性验证试验表明除SMV能检测到特异性条带以外,其他4种病毒BPMV、SBMV、Ar MV及TRSV均未检测到条带;RT-RPA检测SMV的灵敏度达到10-4稀释度。综上所述,本研究建立的RT-RPA方法检测SMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。(本文来源于《检验检疫学刊》期刊2018年02期）
陈淑丹,罗鹏,张小平,蔡玉峰,何蕾[6]（2018）在《甲型流感病毒的逆转录重组酶介导核酸扩增快速检测方法研究》一文中研究指出目的利用逆转录重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA)建立检测甲型流感病毒的快速方法。方法通过使用逆转录酶,将甲流病毒RNA逆转录为cDNA,根据NCBI基因库中甲型流感病毒保守序列设计引物及探针,用cDNA作模板,进行RT-RAA检测甲型流感病毒;构建携带甲型流感病毒的质粒,检测已知样本,分析该方法的灵敏度和特异性。结果采用甲型流感病毒通用型引物和探针,能有效扩增出相应病毒的核酸,而对其他非甲流病毒无交叉反应;RT-RAA反应过程均在39℃恒温条件下完成,用时30min即可得到扩增结果,反应体系中最低扩增拷贝数为100copies。结论建立的RT-RAA检测甲型流感病毒方法灵敏度和特异性高,反应快速、操作简单,适用于甲型流感病毒通用型的快速检测。(本文来源于《中华医院感染学杂志》期刊2018年05期）
颜腾飞[7]（2018）在《逆转录重组酶介导扩增技术在柯萨奇病毒A10型以及A6型检测中的应用》一文中研究指出目的:建立逆转录重组酶介导扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aid Amplification Assay,RT-RAA)分别对柯萨奇病毒A10型(coxsackievirus A10,CVA10)以及柯萨奇病毒A6型(coxsackievirus A6,CVA6)进行简便有效的检测,扩增产物采用荧光法和侧流层析试纸条法两种检测方法。方法:通过对目的基因进行序列比对,找出其保守序列,根据重组酶介导扩增技术(Recombinase-aid Amplification Assay,RAA)引物探针的设计原则在其保守序列设计引物探针。根据荧光法和侧流层析试纸条法不同的要求分别对设计好的引物探针进行不同的修饰而建立荧光法逆转录重组酶介导扩增技术(Real-time Reverse Transcription Recombinase-aid Amplification Assay,Real-time RT-RAA)和侧流层析试纸条法逆转录重组酶介导扩增技术(Reverse Transcription Recombinase-aid Amplification Assay Lateral Flow Dipstick,RT-RAA-LFD)。对建立的方法分别进行灵敏度、特异度评估。收集2016年~2017年河北、山东、湖南叁个地区不同医院的455例手足口病患儿的粪便样本,提取核酸,使用建立的方法进行检测,同时采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法作为参照实验,实验结果通过SPSS21.0统计软件进行统计分析。结果:1.荧光法RT-RAA检测柯萨奇病毒A10型结果荧光法RT-RAA检测柯萨奇病毒A10的灵敏度为35 copy/μl,特异度为100%。以RT-qPCR为参照方法进行临床样本检测,两种方法的Kappa值为0.920(P<0.001)。2.荧光法RT-RAA检测柯萨奇病毒A6型结果荧光法RT-RAA检测柯萨奇病毒A6的灵敏度为38 copy/μl,特异度为100%。以RT-q PCR为参照方法进行临床样本检测,两种方法的Kappa值为0.952(P<0.001)。3.侧流层析试纸条法RT-RAA检测柯萨奇病毒A10型结果侧流层析试纸条法RT-RAA检测柯萨奇病毒A10的灵敏度为38 copy/μl,特异度为100%。以RT-qPCR为参照方法进行临床样本检测,两种方法的Kappa值为0.948(P<0.001)。4.侧流层析试纸条法RT-RAA检测柯萨奇病毒A6型结果侧流层析试纸条法RT-RAA检测柯萨奇病毒A6的灵敏度为38 copy/μl,特异度为100%。以RT-qPCR为参照方法进行临床样本检测,两种方法的Kappa值为0.952(P<0.001)。结论:RT-RAA对CVA10和CVA6具有良好的诊断检测能力,非常适合开展床旁检测和现场检测,在对CVA10和CVA6的检测、监控等方面有重要作用。而荧光法和侧流层析试纸条法为RT-RAA提供了不同的结果判读方法,可根据不同的条件做出更合理的选择。(本文来源于《河北医科大学》期刊2018-03-01）
罗鹏,姜梓凡,郑伟,吴忠华,吕沁风[8]（2017）在《逆转录重组酶介导扩增技术快速检测基孔肯雅热病毒》一文中研究指出本研究通过使用逆转录酶,将基孔肯雅热病毒RNA首先逆转录为cDNA。选取基孔肯雅热病毒保守序列设计引物及探针,建立基孔肯雅热病毒重组酶介导一步法等温核酸扩增RT-RAA(Reverse transcription recombinase aided amplification,RT-RAA)快速检测法,并分析其灵敏度及特异性。结果显示,该方法整个过程在39℃进行,检测时间短(<20 min),检测下限可达100 copy,并与黄热病毒、日本乙型脑炎病毒、西尼罗病毒、登革病毒I型等蚊媒病毒不存在交叉反应。本文建立的基孔肯雅热病毒RT-RAA检测法,灵敏度高、特异性强、操作简便,适应于口岸基层基孔肯雅热病毒的快速检测。(本文来源于《寄生虫与医学昆虫学报》期刊2017年04期）
朱欠元,曾常爱,肖帆,李宝金[9]（2015）在《重组IL-12逆转录病毒转染树突细胞体外对鼻咽癌细胞的杀伤作用》一文中研究指出目的体外实验评估重组白细胞介素(IL)-12逆转录病毒转染树突细胞对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法构建重组IL-12重组逆转录病毒,体外转染树突细胞(DC),经培养后收集上清液,检测IL-12、干扰素-γ(IFN)的分泌水平。以鼻咽癌细胞CNE-2为靶细胞,进行细胞毒T淋巴细胞(CTL)细胞毒活性测定。结果成功构建含有m IL-12的重组逆转录病毒;IL-12基因修饰DC可以显着诱导的大量IL-12和IFN-γ分泌,与未转染DC组比较,差异有显着意义(P<0.01);DC-IL-12诱导的CTL及其上清液对鼻咽癌细胞CNE-2均有显着杀伤作用,与未转染DC组相比较差别有显着(P<0.01)。结论 IL-12基因修饰树突细胞可显着诱导大量IFN-γ分泌并增强其诱导特异性CTL对肿瘤的杀伤效能。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2015年18期）
刘燕芬,韦贞伟,黄绍标[10]（2015）在《抗逆转录病毒治疗后HIV/AID患者对重组乙型肝炎疫苗的免疫应答》一文中研究指出方法:比较抗逆转录病毒治疗后HIV/AID患者与健康者接种乙型肝炎疫苗后免疫应答的差异。方法:健康对照者19例和抗逆转录病毒治疗后CD4~+T淋巴细胞计数均≥200/ul的HIV/AID患者30例分别在0、1、6个月肌内注射重组乙肝疫苗20 ug,并在第3次疫苗注射后1个月检测抗-HBs水平,高(本文来源于《中华医学会第七次全国艾滋病、丙型肝炎学术会议论文汇编》期刊2015-09-18）
重组逆转录病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
小鼠是科学研究中使用最多的实验动物,小鼠诺如病毒(MNV)是试验小鼠感染率最高的病毒性病原,因此MNV感染小鼠将影响研究结果,及时对小鼠健康状态进行监测必不可少。本研究根据逆转录重组酶聚合酶扩增技术(RT-RPA),通过引物探针的筛选,建立了检测MNV的RT-RPA方法。该方法具有较好的敏感性和特异性,通过荧光扩增曲线判定样本中是否含有MNV,在20 min内即可实现样本的检测。将该方法应用于临床样本的检测,结果显示32个样本中有6个阳性,和RT-qPCR检测结果总符合率达到97%。该方法的建立对于试验小鼠的日常病原监测和MNV流行病学研究具有重要意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组逆转录病毒论文参考文献
[1].张阳,孙涛,徐聪林,周冲.登革病毒逆转录重组酶聚合酶扩增-测流层析试纸条检测方法的建立与评价[J].口岸卫生控制.2019
[2].马磊,曾繁文,丛锋,袁文,朱余军.小鼠诺如病毒逆转录重组酶聚合酶扩增检测方法的初步建立[J].中国兽医学报.2019
[3].齐菊菊.逆转录重组酶介导等温核酸扩增技术在呼吸道合胞病毒检测中的应用[D].河北医科大学.2019
[4].张永江,魏霜,袁俊杰,乾义柯,李桂芬.一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增(RT-RPA)技术检测菜豆荚斑驳病毒[J].江苏农业科学.2018
[5].袁俊杰,魏霜,龙阳,马新华,杨卓瑜.一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增技术(RT-RPA)检测大豆花叶病毒[J].检验检疫学刊.2018
[6].陈淑丹,罗鹏,张小平,蔡玉峰,何蕾.甲型流感病毒的逆转录重组酶介导核酸扩增快速检测方法研究[J].中华医院感染学杂志.2018
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[10].刘燕芬,韦贞伟,黄绍标.抗逆转录病毒治疗后HIV/AID患者对重组乙型肝炎疫苗的免疫应答[C].中华医学会第七次全国艾滋病、丙型肝炎学术会议论文汇编.2015
论文知识图
