导读:本文包含了磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:磷脂,谷胱甘肽,化物酶,基因,活性氧,精子,山羊。
磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶论文文献综述
王晶晶,张新笑,卞欢,耿志明,李鹏鹏[1]（2019）在《麻鸭磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶高效可溶性表达及其部分酶学性质》一文中研究指出【目的】克隆麻鸭磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因(GPx4)并在大肠杆菌中表达,分析其酶学特性,为研究GPx4功能及其在羟基脂肪酸形成过程中的调节机制打下基础。【方法】采用RT-PCR克隆麻鸭GPx4(DGPx4)的编码基因,利用定点突变的方法构建半胱氨酸突变体DGPx4表达载体pMBP-DGPx4(48Sec→Cys),并在大肠杆菌中通过添加His标签进行可溶性表达,经Ni-NTA亲和层析和离子交换层析纯化得到融合蛋白DGPx4;采用总谷胱甘肽过氧化物酶活性检测试剂盒检测DGPx4活力以研究其酶学性质。【结果】克隆获得的DGPx4基因编码序列全长516 bp,编码172个氨基酸,编码蛋白分子量约20 k D,理论等电点(p I)为8.9。构建的突变体基因原核表达载体pMBP-DGPx4(48Sec→Cys)可在大肠杆菌中成功诱导表达获得融合蛋白DGPx4,经Ni-NTA亲和层析和离子交换层析即获得高纯度的DGPx4。以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)为底物时,DGPx4的最适反应温度为32℃,最适pH为8.0,对NaCl浓度较敏感;Cu2+和Ni2+对DGPx4活力有较高的促进作用,Mg2+和Mn2+对DGPx4活力有一定的抑制作用,Ca2+和Zn2+对DGPx4活力则无明显的促进或抑制作用。【结论】从鸭肝细胞中克隆获得的DGPx4基因序列经定点突变后可在原核细胞中高效表达,且纯化后的高纯度融合蛋白DGPx4具有GPx4活力,能在抗脂质氧化过程中发挥作用。(本文来源于《南方农业学报》期刊2019年05期）
纠敏,汪伦记,任利娜,代威,李晶晶[2]（2019）在《烟粉虱MEAM1隐种磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因克隆与表达分析》一文中研究指出【目的】本研究旨在从烟粉虱Bemisia tabaci中东-小亚细亚1隐种(Middle East-Asia Minor 1, MEAM1)中克隆磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase, PHGPX)基因,鉴定其在烟粉虱不同发育阶段及吡虫啉处理不同时间后雌成虫体内的表达情况,明确其在烟粉虱应对外界环境压力中的功能。【方法】利用3′RACE克隆和测定烟粉虱MEAM1隐种内PHGPX基因的cDNA全长序列,并对其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析;利用定量RT-PCR技术对该基因在烟粉虱MEAM1隐种不同发育阶段及吡虫啉处理不同时间后雌成虫体内的表达量进行分析。【结果】获得了烟粉虱MEAM1隐种两个磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因的全长cDNA序列,分别命名为BtB-PHGPX1(GenBank登录号:KY312116)和BtB-PHGPX2(GenBank登录号:KY312117)。序列分析表明,BtB-PHGPX1基因开放阅读框全长732 bp,编码243个氨基酸;BtB-PHGPX2基因开放阅读框全长567 bp,编码188个氨基酸。序列比对结果表明两基因的编码蛋白内均具有谷胱甘肽过氧化物酶保守的半胱氨酸、谷氨酰胺和色氨酸残基位点。BtB-PHGPX1在烟粉虱MEAM1隐种卵内表达量显着高于其在若虫、伪蛹、雌成虫和雄成虫内的表达量,BtB-PHGPX2在烟粉虱MEAM1隐种卵内的表达量显着低于其在若虫、伪蛹和雌成虫内的表达量(P<0.05)。BtB-PHGPX1和BtB-PHGPX2在雌成虫内的表达量均显着高于雄成虫内。吡虫啉处理雌成虫2 h时两基因的表达量均较对照显着提高(P<0.05),处理后5, 10和24 h时其表达量均较对照显着下降(P<0.01)。【结论】本研究克隆了烟粉虱MEAM1隐种两个PHGPX基因的序列全长,明确了其在不同发育阶段及吡虫啉处理不同时间后雌成虫体内的差异表达,推测PHGPX在烟粉虱抵御环境压力及杀虫剂胁迫时可能发挥着重要的防御作用。(本文来源于《昆虫学报》期刊2019年02期）
冯凯,李胜,麻锐,姜锐,孙立伟[3]（2016）在《山参磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶cDNA克隆及序列分析》一文中研究指出磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)具有明显的抗氧化活性,避免细胞膜受到过氧化损伤。本研究利用RACE技术,克隆出山参phgpx基因全长c DNA。序列分析表明:该克隆片段全长490 bp,编码162个氨基酸,有3个真核生物PHGPx特有的保守亚结构域。该片段编码的蛋白为跨膜亲水性稳定蛋白质,与柑橘、蓖麻等PHGPx氨基酸序列同源性分别为76%和75%。同时建立了9种植物的系统进化树。(本文来源于《食品工业科技》期刊2016年11期）
蔡丝丝,刘金,王林川,陈芳艳[4]（2014）在《磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在精子发育中的作用研究进展》一文中研究指出磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)是广泛存在于哺乳动物细胞内唯一能够直接还原生物膜上脂类过氧化物的一类含硒酶。该酶在保护细胞膜完整、维持细胞的正常功能中发挥着重要作用;同时PHGPx还作为精子的结构物质,在精子的发育和成熟过程中发挥着重要作用;精液中PHGPx活性是评价精液品质的重要参数之一。对PHGPx的基因结构、体内分布以及与精子发育与成熟相关的生物学特性和功能等研究进展进行了总结。(本文来源于《广东农业科学》期刊2014年16期）
李瑽,解晓雯,来鲁华[5]（2014）在《针对磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶别构位点的激活剂设计》一文中研究指出磷脂过氧氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)能还原氧化受损的细胞膜及细胞内的各种活性氧物种(ROS),在胚胎发育、抗氧化和精子生成中有不可替代的作用[1]。激活PHGPx的保护作用对治疗炎症、癌症等疾病可能有很好的效果。而通过别构调控,激活目的蛋白的功能是一种新兴的药物设计思路[2]。目前,还没有报道可以激活PHGPx活性的化合物。本文基于活性PHGPx晶体结构[3],预测了可能的别构调控位点,并进行了激活剂的虚拟筛选,通过体外测活实验挑选出7个表现出较明显的激活效果的小分子化合物。其中最强的激活剂的AC50为58±5μM,最大激活是原酶活性的约2倍,并在细胞实验中也表现出对PHGPx的激活。这些小分子化合物,验证了针对别构位点进行药物设计,特别是激活剂设计的可能性。同时,我们为找到更有效、副作用更小的抑制炎症的方法提供了新的策略。(本文来源于《中国化学会第29届学术年会摘要集——第22分会：化学生物学》期刊2014-08-04）
施力光,荀文娟,周汉林,侯冠彧,岳文斌[6]（2012）在《山羊磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶生物信息学分析》一文中研究指出旨在克隆山羊磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)基因cDNA全序列并进行序列分析。提取山羊睾丸中总RNA,利用RT-PCR和RACE技术,扩增山羊PHGPx基因cDNA序列并对其生物信息学进行分析。结果表明,山羊PHGPx基因cDNA序列全长844 bp,共编码199个氨基酸;山羊与牛、猪、人和小鼠的氨基酸序列同源性均大于90%;山羊PHGPx蛋白二级结构功能区域属谷胱甘肽过氧化物酶家族,预测23-24和28-29氨基酸位点有潜在的信号肽位点;UPGMA算法构建该物种间分子系统进化树,山羊与牛先聚为一类,再分别与猪、鼠、人、鸡聚类,最后与蜜蜂聚类,与物种动物学分类基本吻合。首次克隆了山羊PHGPx基因,具有GSH-Px家族典型特征,研究结果将为PHGPx基因表达分子调控研究提供一定的理论依据。(本文来源于《生物技术通报》期刊2012年12期）
全超,石玉琴,王璨,杨克敌[7]（2012）在《磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在p,p’-DDE致青春期雄性大鼠生殖功能障碍中的作用》一文中研究指出目的探讨磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(PHGPx)在p,p’-DDE对大鼠睾丸生精细胞脂质过氧化及诱导生精细胞凋亡中的作用。方法将20只健康清洁级50日龄雄性SD大鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组及低(20 mg/kg)、中(60 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量p,p’-DDE染毒组,每组5只。采用腹腔注射方式染毒,注射容积为10ml/kg,每隔1 d染毒1次,连续进行10 d。测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力和丙二醛(MDA)的含量。采用Western blotting方法和检测大鼠睾丸组织PHGPx蛋白相对表达情况,采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)测定大鼠睾丸组织PHGPx及B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bcl-2 associated protein X,Bax)、细胞色素C(Cyt C)、凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA的表达水平。结果与对照组相比,60 mg/kg p,p’-DDE染毒组血清SOD、GSH-Px活力和睾丸组织PHGPx蛋白表达水平均降低,100 mg/kg p,p’-DDE染毒组大鼠睾丸组织中PHGPx、Cyt C、Apaf-1 mRNA表达水平和60 mg/kg p,p’-DDE染毒组Caspase-3 mRNA表达水平较高,60 mg/kg、100 mg/kg p,p’-DDE染毒组Bax mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PHGPx在p,p’-DDE所致男(雄)性生殖功能紊乱中起拮抗作用。(本文来源于《环境与健康杂志》期刊2012年06期）
刘冠兰[8]（2010）在《萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的抗氧化功能研究》一文中研究指出已证实磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(Phospholipid Hydroperoxide Glutathione Peroxidase ,PHGPx)可以通过降低磷脂过氧化程度来防止膜过氧化损伤。自1982年PHGPx被作为一种过氧化抑制蛋白从猪肝脏中提取出以来,PHGPx的酶学功能和催化性质得到了广泛的研究。目前的发现已经证明,PHGPx可以作为氧化胁迫下的细胞保护剂。特别的是,在一些细胞模型中PHGPx可以在针对磷脂过氧化时扮演独特的作用。但是到目前为止,外源性的PHGPx蛋白对氧化胁迫下细胞体系的保护作用还未见报道。本文利用生物和化学的实验方法,建立了氧化胁迫的细胞模型;选取在原核细胞中高效表达、活性高、易纯化的萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx),对其抗氧化作用进行了研究。通过细胞形态学检验、细胞活力测定以及细胞内脂质过氧化程度检测,研究了RsPHGPx对于细胞生长状况的影响。实验结果显示,在氧化胁迫的条件下,RsPHGPx预处理可以有效地维持正常的细胞形态、保持较高的细胞活力并且降低丙二醛(MDA)水平。此外,通过与RsPHGPx的失活突变体mRsPHGPx对照,证实RsPHGPx对细胞的这一保护作用是由其催化活性决定的。通过检测细胞内活性氧水平和凋亡情况,证明RsPHGPx的加入可以有效降低细胞内的活性氧水平,并且抑制氧化胁迫情况下的细胞凋亡。这一结果证实了RsPHGPx的处理可以通过清除活性氧的方式保护细胞。此外,本研究还进行了RsPHGPx与谷胱甘肽联合作用保护细胞的实验。结果证明,RsPHGPx的加入可显着提高谷胱甘肽对氧化胁迫下细胞的保护作用,从而高效地清除细胞内的活性氧。这一实验结果为复合型抗氧化制剂的研究提供了参考。(本文来源于《清华大学》期刊2010-05-01）
李文静[9]（2010）在《海马齿磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆及功能分析》一文中研究指出海马齿(Sesuvium portulacastrum)又名滨水菜,是一种生长繁殖快,对盐碱、干旱和重金属离子具有高度耐受性的多年生红树林伴生植物,多生长于海边沙地及河流入海口两岸滩涂地带,可以在海水浇灌下正常生长,驯化后也能在淡水中生长。为解析海马齿耐盐碱的生理机制和分子基础,我们成功构建了海水诱导下根系差异表达基因的差减文库。在文库中筛选中,发现了一个与植物PHGPx具有高度同源性的EST。以此为基础,本研究检测了海马齿PHGPx酶活性与盐胁迫、H2O2胁迫之间的关系,成功克隆了海马齿PHGPx基因全长cDNA,获得了较为完整的分子信息,同时对其器官表达特异性、盐和H2O2胁迫与基因表达的相关性进行了研究。主要结果如下：1、测定了NaCl和H2O2胁迫条件下,海马齿叶片中的PHGPx酶活性与NaCl和H2O2剂量的相关性。研究结果表明,海马齿叶片PHGPx酶活性与NaCl和H2O2剂量呈正向关；在内源过氧化氢被清除的情况下,NaCl依然能够刺激SpPHGPx酶活升高,而H2O2却不起作用。推测海马齿盐胁迫的信号传导,可能与非依赖H2O2的抗氧化防御途径有关。2、以筛选获得的SpSSH 713 EST序列为基础,利用RACE技术从海马齿根中成功克隆了编码磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的基因,命名为SpPHGPx (GenBank登录号：GU479913)。该基因cDNA全长为821bp,含有一个513bp的开放阅读框,编码170个氨基酸；预测的SpPHGPx分子量为18.78kDa,等电点为7.62。推导的氨基酸序列与冰叶日中花(Mesembryanthemum crystallinum,AAB61592)、菠菜(Spinacia oleracea, CAA46649)、蓖麻(Ricinus communis,XP-002509790)和杨树(Populus trichocarpa, XP_002299536)相应的PHGPx的同源性分别为86%、87%、89%和85%。生物信息学分析表明,SpPHGPx含有真核生物磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶所特有的3个保守的亚结构域,N端没有明显的信号肽,是一个非跨膜的亲水性稳定蛋白。3、利用半定量RT-PCR检测了SpPHGPx结的表达特征。结果显示：SpPHGPx呈组成型表达,但叶中的表达量明显高于根和茎；非生物刺激,如海水、NaCl和H2O2均能诱导其表达量显着增加。4、成功构建原核表达载体pET-30a-SpPHGPx,获得了特异表达蛋白；成功构建植物表达载体pCAMBIA1304-SpPHGPx,通过农杆菌介导的叶盘转化法获得了22株转基因烟草植株。结论：1、盐胁迫可以提高海马齿PHGPx酶活性,海马齿PHGPx参与了对盐胁迫的响应；内源过氧化氢清除试验表明,海马齿盐胁迫的信号传导可能与非依赖H2O2的抗氧化防御途径有关。2、编码海马齿磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的基因SpPHGPx在海马齿中呈组成型表达,但叶中的表达量明显高于根和茎；海水、NaCl和H2O2处理均能诱导其表达。(本文来源于《海南大学》期刊2010-05-01）
李洋,李晖,祝建波,刘进元[10]（2010）在《重组萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在毕赤酵母优化表达初步纯化与鉴定》一文中研究指出将萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)基因插入到分泌表达载体pPIC9K中,转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞,筛选具有G418抗性的单拷贝转化子。经过优化表达条件,RsPHGPx在1%甲醇、pH6.0、28℃条件下诱导60h后得到最大表达量,产率约为102mg/L。通过硫酸铵分级沉淀、脱盐柱脱盐、凝胶过滤等纯化步骤,得到了90%以上纯度的RsPHGPx.活性分析显示纯化获得的RsPHGPx具有依赖于GSH的还原活性,比活性为4.2μmol/min.mg,为获得大量RsPHGPx而用于应用开发研究奠定了基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2010年04期）
磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
【目的】本研究旨在从烟粉虱Bemisia tabaci中东-小亚细亚1隐种(Middle East-Asia Minor 1, MEAM1)中克隆磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase, PHGPX)基因,鉴定其在烟粉虱不同发育阶段及吡虫啉处理不同时间后雌成虫体内的表达情况,明确其在烟粉虱应对外界环境压力中的功能。【方法】利用3′RACE克隆和测定烟粉虱MEAM1隐种内PHGPX基因的cDNA全长序列,并对其编码的氨基酸序列进行生物信息学分析;利用定量RT-PCR技术对该基因在烟粉虱MEAM1隐种不同发育阶段及吡虫啉处理不同时间后雌成虫体内的表达量进行分析。【结果】获得了烟粉虱MEAM1隐种两个磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因的全长cDNA序列,分别命名为BtB-PHGPX1(GenBank登录号:KY312116)和BtB-PHGPX2(GenBank登录号:KY312117)。序列分析表明,BtB-PHGPX1基因开放阅读框全长732 bp,编码243个氨基酸;BtB-PHGPX2基因开放阅读框全长567 bp,编码188个氨基酸。序列比对结果表明两基因的编码蛋白内均具有谷胱甘肽过氧化物酶保守的半胱氨酸、谷氨酰胺和色氨酸残基位点。BtB-PHGPX1在烟粉虱MEAM1隐种卵内表达量显着高于其在若虫、伪蛹、雌成虫和雄成虫内的表达量,BtB-PHGPX2在烟粉虱MEAM1隐种卵内的表达量显着低于其在若虫、伪蛹和雌成虫内的表达量(P<0.05)。BtB-PHGPX1和BtB-PHGPX2在雌成虫内的表达量均显着高于雄成虫内。吡虫啉处理雌成虫2 h时两基因的表达量均较对照显着提高(P<0.05),处理后5, 10和24 h时其表达量均较对照显着下降(P<0.01)。【结论】本研究克隆了烟粉虱MEAM1隐种两个PHGPX基因的序列全长,明确了其在不同发育阶段及吡虫啉处理不同时间后雌成虫体内的差异表达,推测PHGPX在烟粉虱抵御环境压力及杀虫剂胁迫时可能发挥着重要的防御作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶论文参考文献
[1].王晶晶,张新笑,卞欢,耿志明,李鹏鹏.麻鸭磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶高效可溶性表达及其部分酶学性质[J].南方农业学报.2019
[2].纠敏,汪伦记,任利娜,代威,李晶晶.烟粉虱MEAM1隐种磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因克隆与表达分析[J].昆虫学报.2019
[3].冯凯,李胜,麻锐,姜锐,孙立伟.山参磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶cDNA克隆及序列分析[J].食品工业科技.2016
[4].蔡丝丝,刘金,王林川,陈芳艳.磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在精子发育中的作用研究进展[J].广东农业科学.2014
[5].李瑽,解晓雯,来鲁华.针对磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶别构位点的激活剂设计[C].中国化学会第29届学术年会摘要集——第22分会：化学生物学.2014
[6].施力光,荀文娟,周汉林,侯冠彧,岳文斌.山羊磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶生物信息学分析[J].生物技术通报.2012
[7].全超,石玉琴,王璨,杨克敌.磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在p,p’-DDE致青春期雄性大鼠生殖功能障碍中的作用[J].环境与健康杂志.2012
[8].刘冠兰.萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶的抗氧化功能研究[D].清华大学.2010
[9].李文静.海马齿磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆及功能分析[D].海南大学.2010
[10].李洋,李晖,祝建波,刘进元.重组萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在毕赤酵母优化表达初步纯化与鉴定[J].中国生物工程杂志.2010
论文知识图
