哺乳细胞转化论文_郭佳,蒋韵,滕飞,尹衍新,于丽华

导读:本文包含了哺乳细胞转化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,质粒,乙型肝炎,抗原,哺乳动物,甲基丙烯酸,病毒。

哺乳细胞转化论文文献综述

郭佳,蒋韵,滕飞,尹衍新,于丽华[1](2019)在《间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体重链CDR3随机突变哺乳动物细胞表面展示文库的构建》一文中研究指出目的采用哺乳动物细胞表面展示技术构建间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体3E1D7的重链补体决定区3(CDR3)随机突变抗体库。方法用定向进化的方法在嵌合抗体3E1D7重链CDR3内部造成基因随机突变,将其通过双酶切克隆到哺乳动物细胞展示载体pSZI-CD中构建随机突变抗体库。抗体库基因转染CHO细胞,流式细胞术检测抗体基因是否在细胞表面表达。结果 3E1D7重链CDR3随机突变抗体库构建成功,库容量达到5.52×10~6。随机挑选20个阳性克隆进行测序鉴定, 20个克隆均在不同位置发生碱基突变且没有重复突变,编码20种不同的氨基酸序列,抗体库具有较好的多样性和随机性。流式细胞术分析抗体基因库上膜情况,均检测到全长抗体在CHO细胞表面的表达。结论通过哺乳动物细胞表面展示技术,成功构建了库容量达到5.52×10~6的c-Met嵌合抗体重链CDR3随机突变抗体库。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年06期)

林艳,李照熙,王芳,王天云[2](2012)在《一种简单的哺乳动物细胞附着体质粒CaCl_2转化方法》一文中研究指出目的:建立一种简单经济的哺乳动物细胞附着体质粒还原实验方法。方法:构建附着体载体,转染中国卵巢仓鼠(CHO)细胞和小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a,利用改良的赫特裂解法提取附着体质粒,CaCl2法转化附着质粒至宿主菌大肠杆菌DH5α,再次从DH5α中提取质粒,将转染前后质粒用KpnⅠ/BamHⅠ双酶切和BamHⅠ单酶切,并将转染前后的质粒进行DNA测序分析。结果:与最初转染的质粒相比,还原质粒双酶切和单酶切后的条带大小一致;DNA测序分析表明,转染前后质粒中的插入序列相同。结论:建立了可用于质粒还原实验的简单的CaCl2转化方法。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2012年04期)

陈丽丽,王玥,赵光,于翠平,吴永会[3](2008)在《煤焦油致哺乳动物细胞转化作用的实验研究》一文中研究指出采用转化细胞灶法,观察煤焦油致小鼠肺成纤维细胞的形态学转化,并以刀豆球蛋白A凝集实验进一步验证其转化活性。结果煤焦油剂量为0.1μg/ml、1.5μg/ml、22.5μg/ml的转化率分别为7.80%、9.88%、12.06%,煤焦油处理的NIH/3T3细胞均可与刀豆球蛋白A发生凝集反应。提示煤焦油具有细胞转化活性。(本文来源于《中国工业医学杂志》期刊2008年04期)

吴红英,刘培勋,岳井银,宋永良,穆传杰[4](2005)在《E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响》一文中研究指出1、目的研究抗放药物E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响。 2、方法用不同剂量的137Cs γ射线照射培养的CHO和CHL细胞,比较在有或没有E838的情况下,其对细胞集落形成率以及转化率的影响。 3、结果在3Gy照射剂量下,CHO细胞加药1 μg/ml处理组集落形成率显着高于不加药组(P<0.05),而转化率加药组比不加药组低且有统计学意义(P<0.01)。CHL细胞在此范围内变化亦有同样的趋势,但结果无统计学意义(P>0.05)。(本文来源于《天津市核学会2005年学术交流会论文汇编》期刊2005-11-01)

吴红英,刘培勋,岳井银,宋永良,穆传杰[5](2001)在《E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响》一文中研究指出目的 研究抗放药物E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响。方法 用不同剂量的13 7Csγ射线照射培养的CHO和CHL细胞 ,比较在有或没有E838的情况下 ,其对细胞集落形成率以及转化率的影响。结果 在 3Gy照射剂量下 ,CHO细胞加药 1μg/ml处理组集落形成率显着高于不加药组 (P <0 0 5 ) ,而转化率加药组比不加药组低且有统计学意义 (P <0 0 1)。CHL细胞在此范围内变化亦有同样的趋势 ,但结果无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 E838在一定浓度范围内对辐射诱导哺乳动物细胞转化有一定的抑制作用。(本文来源于《中华放射医学与防护杂志》期刊2001年01期)

刘东瀛[6](1999)在《慢性持续性支原体感染导致恶性转化的哺乳类细胞中无支原体基因存在》一文中研究指出为了探讨支原体介导的细胞转化的可能机制,用抗生素除去支原体后,检测已发生永久转化的C3H细胞中有无支原体基因存在。 用完整的支原体基因组或克隆的支原体基因为探针通过斑点杂交检测,均未发现永久转化的C3H细胞中有支原体基因存在。对此,作者考虑到可能有支原体DNA小片段插入细胞DNA后促进某些癌基因表达,但不能为斑点杂交法检出。在此研究中,作者应用一种称为表象差异分析(representationaldifference analysis.RDA)的新技术检查永久转化细胞中有无支原体基因存在。RDA技术利用扣除(本文来源于《国外医学(分子生物学分册)》期刊1999年01期)

谭明家,许建宁,李忠生,王瑗,方福德[7](1998)在《甲基丙烯酸环氧丙酯诱导哺乳类细胞转化的实验研究》一文中研究指出用人胚肺成纤维细胞的体外转化实验检测出甲基丙烯酸环氧丙酯可诱导人胚肺成纤维细胞形态学改变,转化细胞核浆比例增大,排列紊乱,交叉重迭生长。从转化集落分离的细胞可被较低浓度的刀豆凝集素A凝集,在半固体琼脂内非贴壁依赖生长。转化细胞的染色体发生结构和数目改变。上述结果表明:甲基丙烯酸环氧丙酯具有诱导人胚肺成纤维细胞恶性转化的作用,预示它可能对人具有潜在的致癌危险性。(本文来源于《卫生研究》期刊1998年03期)

李凤知,林建波[8](1992)在《一种磷酸钙DNA共沉淀转化哺乳化物细胞较易成功的简易变通方法》一文中研究指出磷酸钙共沉淀法转化哺乳动物细胞具有好,方法简便易推广等特点。但由于被共沉淀的DNA分子大小、纯度和用量(20-40 μg)的不同,想获得理想的共沉淀颗粒大小,对特定(本文来源于《中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编》期刊1992-11-01)

戴长柏,孙茂盛,陶应双,王丽春,彭小忠[9](1991)在《脊髓灰质炎病毒cDNA转化哺乳动物细胞的研究(论着摘要)》一文中研究指出将病毒全基因重新转化成活病毒,是病毒基因工程表达的一项基础性工作.已有实验证实,脊髓灰质炎病毒在体外将全基因导入敏感细胞后,可产生性质同亲本病毒相同的完整体.本文报道用带脊髓灰质炎病毒Ⅰ型Mahoney株cDNA质粒转化HeLa细胞后,产生完整病毒颗粒的研究结果.试验采用DEAE—Dextran介导方法,将环状质粒pSV_(202)(带Mahoney全基因)导入HeLa细胞中,5d后细胞发生肿胀,变圆,折光性增强,产生典型细胞病理效应(CPE),所释放出的病毒颗粒经电镜检查,具有典型脊髓灰(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊1991年05期)

景新,朱既明[10](1989)在《乙型肝炎病毒核心抗原与e抗原在转化的哺乳动物细胞中的高效稳定表达》一文中研究指出将乙型肝炎病毒(HBV)ayw亚型Bam HI 1.5kb片段插入到载体pSV 2-dhfr Bgl Ⅱ位点,构建重组质粒。其正向插入的重组质粒pSV 2-DHBc-54转化L细胞之后,在细胞内测得乙型肝炎核心抗原(HBcAg)与e抗原(HBeAg),在含10%小牛血清的细胞培养液上清中仅测到HBeAg。此转化细胞用氨甲喋呤处理后,转化细胞表达HBcAg与HBeAg的量增加10倍以上。转化细胞系C-54-24传20代仍能稳定分泌HBeAg。转化细胞分泌的HBeAg,在含10%小牛血清的培养液中可在4℃稳定保存一年7个月以上。(本文来源于《病毒学报》期刊1989年03期)

哺乳细胞转化论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:建立一种简单经济的哺乳动物细胞附着体质粒还原实验方法。方法:构建附着体载体,转染中国卵巢仓鼠(CHO)细胞和小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a,利用改良的赫特裂解法提取附着体质粒,CaCl2法转化附着质粒至宿主菌大肠杆菌DH5α,再次从DH5α中提取质粒,将转染前后质粒用KpnⅠ/BamHⅠ双酶切和BamHⅠ单酶切,并将转染前后的质粒进行DNA测序分析。结果:与最初转染的质粒相比,还原质粒双酶切和单酶切后的条带大小一致;DNA测序分析表明,转染前后质粒中的插入序列相同。结论:建立了可用于质粒还原实验的简单的CaCl2转化方法。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

哺乳细胞转化论文参考文献

[1].郭佳,蒋韵,滕飞,尹衍新,于丽华.间质上皮转化因子(c-Met)嵌合抗体重链CDR3随机突变哺乳动物细胞表面展示文库的构建[J].细胞与分子免疫学杂志.2019

[2].林艳,李照熙,王芳,王天云.一种简单的哺乳动物细胞附着体质粒CaCl_2转化方法[J].生物技术通讯.2012

[3].陈丽丽,王玥,赵光,于翠平,吴永会.煤焦油致哺乳动物细胞转化作用的实验研究[J].中国工业医学杂志.2008

[4].吴红英,刘培勋,岳井银,宋永良,穆传杰.E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响[C].天津市核学会2005年学术交流会论文汇编.2005

[5].吴红英,刘培勋,岳井银,宋永良,穆传杰.E838对辐射诱导哺乳动物细胞恶性转化的影响[J].中华放射医学与防护杂志.2001

[6].刘东瀛.慢性持续性支原体感染导致恶性转化的哺乳类细胞中无支原体基因存在[J].国外医学(分子生物学分册).1999

[7].谭明家,许建宁,李忠生,王瑗,方福德.甲基丙烯酸环氧丙酯诱导哺乳类细胞转化的实验研究[J].卫生研究.1998

[8].李凤知,林建波.一种磷酸钙DNA共沉淀转化哺乳化物细胞较易成功的简易变通方法[C].中国细胞生物学学会第五次会议论文摘要汇编.1992

[9].戴长柏,孙茂盛,陶应双,王丽春,彭小忠.脊髓灰质炎病毒cDNA转化哺乳动物细胞的研究(论着摘要)[J].中国医学科学院学报.1991

[10].景新,朱既明.乙型肝炎病毒核心抗原与e抗原在转化的哺乳动物细胞中的高效稳定表达[J].病毒学报.1989

论文知识图

BHK-21细胞变化情况 (左:转染空载体...表达产物间接免疫荧光检测该表达产物...裸鼠成瘤的病理组织学 (×100)间接免疫荧光检测不同代次转染病毒感...实时荧光定量PCR产物琼脂糖凝胶电泳结...根癌农杆菌介导真菌转化原理示意图

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