多壁碳纳米管致人肝癌细胞HepG2毒性及代谢酶表达变化

论文摘要

采用实时无标记细胞分析系统研究多壁碳纳米管（MWCNTs）对人肝癌细胞HepG2毒性作用,确定MWCNTs是否会影响肝脏代谢酶谷胱甘肽S转移酶P1（GSTP1）和细胞色素P450亚酶CYP1A1的表达。利用0.12、0.25、0.5、1和2 mg/mL的MWCNTs处理HepG2细胞24、48和72h后,采用噻唑蓝比色法（MTT）测定MWCNTs对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。利用实时无标记动态细胞分析（RTCA）系统动态监测不同剂量（0.25、0.5、1 mg/mL）MWCNTs对HepG2细胞生长的影响。细胞经MWCNTs处理48 h后,实时定量荧光PCR（RT-PCR）和蛋白质印迹法（Western Blot）检测肝脏代谢酶GSTP1和CYP1A1的mRNA水平和蛋白水平的变化情况。结果显示MWCNTs可以抑制HepG2细胞的增殖,且呈一定的剂量和时间依赖性。实时无标记细胞分析法能够准确监测MWCNTs对细胞增殖的过程,并且能避免多壁碳纳米管材料对数据的干扰。经MWCNTs处理后的细胞中肝脏代谢酶GSTP1mRNA水平和蛋白水平上调,而CYP1A1的mRNA水平和蛋白水平显著下降。

论文目录

• 1 前言
• 2 实验部分
•   2.1 细胞
•   2.2 主要试剂与仪器
•   2.3 HepG2 肝癌细胞培养
•   2.4 MWCNTs预处理
•   2.5 MTT实验测定细胞增殖
•   2.6 RTCA检测MWCNTs对HepG2细胞增殖的影响
•   2.7 实时定量PCR（Real-Time PCR）检测相关基因mRNA水平的变化情况
•   2.8 Western-Blot印迹分析
•   2.9 统计学分析
• 3 结果与讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵琢,柳明,杨磊,刘伟,王华,刘美玲,张秀霞,申敬,张园

关键词: 多壁碳纳米管,细胞,毒性研究,实时无标记细胞分析技术,肝脏代谢酶

来源: 新型炭材料 2019年06期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

专业: 无机化工,材料科学,肿瘤学

单位: 天津海关工业产品安全技术中心,天津科技大学生物工程学院

基金: 海关总署科研计划项目(2018IK004)~~

分类号: R735.7;TB383.1;TQ127.11

DOI: 10.19869/j.ncm.1007-8827.2019.06.005

页码: 600-605

总页数: 6

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