灰褐链霉菌与黄色短杆菌属间原生质体融合提高ε-聚赖氨酸产量（英文）

论文摘要

为提高灰褐链霉菌（Streptomyces griseofuscus LS-6）的ε-聚赖氨酸（ε-poly-lysine,ε-PL）发酵水平,从增加内源性前体赖氨酸角度考虑,将S. griseofuscus LS-6与赖氨酸生产菌株黄色短杆菌（Brebvibacterium flavum S62）进行属间的原生质体融合。以S. griseofuscus LS-6产黑色素作为遗传标记挑选到1株融合子LS-32,其ε-PL摇瓶产量为2.82 g/L,是亲本菌株LS-6的1.73倍;LS-32在补料分批发酵中的ε-PL产量达到56.4 g/L,比亲本提高了38.9%。随机引物扩增多肽DNA技术显示融合子LS-32中确实有来自B. flavum S62的基因;融合子ε-PL代谢途径中关键酶的活力（己糖激酶、天冬氨酸激酶、ε-PL合成酶等）和胞内氨基酸含量（赖氨酸、谷氨酸、精氨酸等）均高于亲本,是LS-32高产ε-PL的重要原因。本研究明确了内源性赖氨酸对于提升ε-PL产量的重要性,且属间融合为ε-PL产生菌的育种研究提供了新的参考途径。

论文目录

• 1 Materials and Methods
•   1.1 Materials and chemicals
•   1.2 Instruments and equipment
•   1.3 Methods
•     1.3.1 Culture conditions
•     1.3.2 Protoplast preparation and protoplast fusion
•     1.3.316S rDNA identification and randomly amplified polymorphic DNA （RAPD）
•     1.3.4 Fed-batch fermentation
•     1.3.5 Analytical methods
•   1.4 Data and figure analysis
• 2 Results and Analysis
•   2.1 Intergeneric hybridization between S.griseofuscus and B.flavum
•   2.2 Hybrids screening and?-PL production in shake-flask fermentation
•   2.3 16S rDNA identification and RAPD
•   2.4 Fed-batch fermentation of hybrid LS-32
•   2.5 Comparison for enzymatic activities between LS-32and S.griseofuscus
•   2.6 Comparison for intracellular amino acids between LS-32 and S.griseofuscus
• 3 Conclusion

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李树,杜宗军,陈冠军

关键词: 聚赖氨酸,内源性赖氨酸,属间融合,发酵

来源: 食品科学 2019年06期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学,一般化学工业

单位: 微生物技术国家重点实验室山东大学(威海)海洋学院

基金: 中国博士后科学基金项目(2017M622185),山东省自然科学基金项目(ZR2017PC025)

分类号: TQ920.1;Q93

页码: 173-179

总页数: 7

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