普通白菜1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基基因Bcrbc S的克隆及表达分析

论文摘要

利用RACE技术,从普通白菜抗霜霉病品种苏州青叶片克隆到1,5-二磷酸核酮糖羧化/加氧酶小亚基（ribulose-1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit,Bcrbc S）基因的全长c DNA序列。采用q RT-PCR分析该基因在普通白菜不同组织的表达模式。利用SDS-PAGE技术分析了该基因的原核表达特征。序列分析结果表明,Bcrbc S基因的c DNA序列全长为733 bp,其中开放阅读框长度为543 bp,共编码181个氨基酸,分子质量为20.3×103 Da,理论等电点为8.23。氨基酸同源系统进化分析表明,普通白菜Bcrbc S基因与同科植物的进化关系相近。实时定量分析结果表明,Bcrbc S基因在普通白菜叶中表达最强;在SA和Na Cl处理下,Bcrbc S基因表达量均在处理24 h后达到峰值。原核表达载体经IPTG诱导表达出分子质量约为20×103Da的融合蛋白。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试验材料
•   1.2 试验方法
•     1.2.1 外源胁迫处理及取样
•     1.2.2 RNA提取和c DNA合成
•     1.2.3 普通白菜Bcrbc S基因全长c DNA克隆
•     1.2.4 序列分析
•     1.2.5实时定量分析
•     1.2.6 原核表达
• 2 结果与分析
•   2.1 Bcrbc S基因c DNA全长克隆及序列分析
•   2.2 Bcrbc S蛋白氨基酸序列同源性和系统进化分析
•   2.3 Bcrbc S基因的组织特异性表达分析
•   2.4外源胁迫下Bcrbc S基因的表达分析
•   2.5 Bcrbc S基因的原核表达分析
• 3 结论与讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘东让,侯喜林,肖栋

关键词: 普通白菜,二磷酸核酮糖羧化,加氧酶小亚基基因,序列分析,原核表达

来源: 中国蔬菜 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,园艺

单位: 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,中国农业科学院蔬菜花卉研究所农业农村部园艺作物生物学与种质创制重点实验室,江苏现代园艺工程技术中心

基金: 国家重点研发计划项目(2016YFD0101701),农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室开放课题(IVF201804)

分类号: S634;Q943.2

页码: 20-25

总页数: 6

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