导读:本文包含了原代培养肝细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:紫杉醇,肝癌HepG2细胞,肝细胞,细胞增殖
原代培养肝细胞论文文献综述
徐雅玲,梁菁[1]（2018）在《紫杉醇对肝癌细胞HepG2和大鼠原代培养肝细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究》一文中研究指出目的探究紫杉醇对肝癌细胞HepG2和大鼠原代培养肝细胞增殖抑制和凋亡的影响。方法将肝癌细胞HepG2和原代肝细胞分别分为阴性对照组、不同浓度(5、10、20、40、80μg·L~(-1))紫杉醇组。MTT法检测不同浓度紫杉醇组作用肝癌细胞HepG2和原代肝细胞24、48、72 h的增殖抑制率;通过Hoechst 33258染色,在荧光倒置显微镜下观察细胞凋亡的形态学改变;Annexin V-FITC/PI双染,用流式细胞术检测不同浓度的紫杉醇对肝癌细胞HepG2和原代肝细胞细胞周期变化和凋亡率的影响。结果 MTT结果表明,紫杉醇对肝癌细胞HepG2和原代肝细胞剂量依赖性地抑制增殖(P<0.05)。Hoechst 33258染色结果显示,紫杉醇诱导肝癌细胞HepG2和原代肝细胞24 h后呈现凋亡形态学改变。流式结果提示,紫杉醇作用肝癌细胞HepG2和原代肝细胞24 h均能改变细胞周期,与阴性对照组相比,均能提高G_2/M期细胞比例(P<0.05),且阻滞作用随着药物浓度的增加而增强。其中紫杉醇能明显提高肝癌细胞HepG2 G_2/M期比例(P<0.05),G_0/G_1期细胞比例降低(P<0.05);S期细胞变化不大(P>0.05)。同时紫杉醇均能诱导两种细胞发生凋亡。但凋亡的程度不同,紫杉醇诱导肝癌细胞HepG2凋亡率明显高于原代肝细胞,且随着紫杉醇浓度的增高,细胞的凋亡率逐渐增加。结论紫杉醇能够抑制肝癌细胞HepG2和原代肝细胞的活力,是通过诱导细胞凋亡和阻滞细胞周期在G_2/M期完成的。(本文来源于《中国药理学通报》期刊2018年07期）
刘佳,孔嗣强,张明,陈丹娜,周鹏[2]（2018）在《过量人参皂苷对小鼠原代培养肝细胞的毒性实验》一文中研究指出目的研究过量人参皂苷对原代培养小鼠肝细胞的毒性作用。方法给小鼠原代肝细胞培养液中加入人参皂苷(终浓度分别为4000mg/L,200mg/L和10mg/L),设为高、中、低浓度组,台盼蓝拒染法及MTT法测定人参皂香对肝细胞增殖的影响,并测定肝细胞培养液中谷丙转氨酶(GPT)及谷草转氨酶(GOT)的含量。结果与对照组相比,高浓度人参皂苷对原代培养肝细胞增殖有明显的抑制作用:给药后3d、4d、5d、6d和7d,高浓度组活细胞数分别为对照组的85%、81%、71%、64%和59%。人参皂苷给药24h开始,高浓度组培养液上清中GPT含量均显着升高(P<0.05),给药48h、72h和96h时高浓度组细胞培养液GPT含量分别为对照组的2.6倍、8.0倍和12.5倍(P<0.01);随着给药时间延长,GPT含量呈上升趋势。给药72h和96h后高浓度组细胞与空白组相比,外液GOT含量均显着增加(P<0.05)。结论过量人参皂苷能够抑制肝细胞增殖,引起肝细胞损伤,对肝细胞可能存在直接的毒副作用。(本文来源于《长沙医学院学报》期刊2018年01期）
宋凯,骆源,张春晓,王玲,游文煌[3]（2016）在《皮质醇对斜带石斑鱼原代培养肝细胞糖代谢的影响》一文中研究指出本试验旨在研究皮质醇对斜带石斑鱼原代培养肝细胞糖代谢的影响。分离斜带石斑鱼肝细胞,选取2个孵育时间(24和36 h)和3个皮质醇浓度[0(对照)、100和1 000 nmol/L],测定培养上清液中葡萄糖含量(即肝细胞葡萄糖释放量),肝细胞糖原和丙酮酸含量以及肝细胞糖代谢关键酶[磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)、糖原合成酶(GSase)、苹果酸脱氢酶(MDH)、异柠檬酸脱氢酶(ICD)和丙酮酸激酶(PK)]的活性。结果表明:在孵育24和36 h时,与对照组相比,100和1 000 nmol/L皮质醇组肝细胞葡萄糖释放量显着提高(P<0.05),而肝细胞丙酮酸含量显着降低(P<0.05);皮质醇孵育时间对肝细胞葡萄糖释放量、丙酮酸含量均无显着影响(P>0.05)。在孵育24 h时,皮质醇浓度对肝细胞糖原含量无显着影响(P>0.05),而在孵育36 h时,肝细胞糖原含量则随着皮质醇浓度的升高而显着降低(P<0.05);随着皮质醇孵育时间的延长,肝细胞糖原含量显着下降(P<0.05)。在孵育24和36 h时,100和1 000 nmol/L皮质醇显着提高了肝细胞PEPCK和G6Pase的活性(P<0.05),显着降低了肝细胞MDH和ICD的活性(P<0.05),但对肝细胞GSase活性则无显着影响(P>0.05);在孵育24 h时,皮质醇浓度对肝细胞PK活性无显着影响(P>0.05),但在孵育36 h时,100和1 000 nmol/L皮质醇则显着提高了肝细胞PK活性(P<0.05)。随着孵育时间的延长,肝细胞G6Pase活性显着下降(P<0.05),PK活性显着升高(P<0.05),而MDH和ICD活性均无显着变化(P>0.05)。由此可见,皮质醇能够促进斜带石斑鱼原代培养肝细胞糖异生作用,抑制葡萄糖的分解代谢,而对糖原合成无调节作用。(本文来源于《动物营养学报》期刊2016年11期）
陈贵英,郭秋平,温晓雪,黄振平[4]（2014）在《葛根素对SD大鼠原代培养肝细胞色素P450的影响》一文中研究指出目的:本研究以原代肝细胞为体外肝代谢模型,研究原代培养肝细胞色素P450的浓度时间曲线,通过给予中药单体葛根素和阳性药物CYP450抑制剂对乙酰氨基酚,探讨中药单体葛根素对大鼠原代培养肝细胞色素CYP450的影响,为葛根素的药物代谢研究提供依据,中药单体体外CYP450的研究奠定基础。方法;用二步灌流法分离提取大鼠肝细胞进行培养,5%CO2培养,采用Elisa法检测细(本文来源于《中华中医药学会中药实验药理分会2014年学术年会论文摘要汇编》期刊2014-08-07）
郭秋平,杨威,肖百全,覃仁安,金若敏[5]（2014）在《大鼠原代培养肝细胞作为早期肝毒性筛选模型的研究》一文中研究指出目的研究大鼠原代培养肝细胞作为早期肝毒性的筛选模型的生物学特征。方法采用二步灌流法分离提取大鼠肝细胞进行培养;采用荧光倒置显微镜观察原代培养肝细胞的生长情况;采用MTT法绘制肝细胞生长曲线;采用全自动生化分析仪检测细胞上清液的ALT、AST、ALP、CK、LDH、TP、ALB、GGT值;采用爬片技术进行HE检查;采用Elisa法检测细胞上清液中细胞色素P450(CYP450)的总量,并采用肝细胞毒性药物对乙酰氨基酚对肝细胞作为早期肝毒性筛选模型进行验证。结果肝细胞培养4 h后开始贴壁,24 h后绝大多数肝细胞贴壁,体积明显增大;48 h后肝细胞贴壁牢固,维持至第8日,细胞开始逐渐脱落。肝细胞的对数生长期为第2至第3日,ALT、AST、LDH、CK在提取4 h后增高,第1日大幅降低后趋于平稳至第7日。TP、ALB、GGT、ALP提取4 h降低,后趋于平稳至第7日,肝细胞CYP450第1日至第5日分泌呈上升趋势,第6~7日,轻微下降。HE结果显示提取的肝细胞与肝组织的HE涂片基本一致。对乙酰氨基酚对肝细胞的生长具有抑制作用,IC50为20.5 mmol·L-1,能使肝细胞肿胀,细胞核萎缩,使肝细胞分泌ALT、ALP、LDH增多,对肝细胞分泌CYP450的功能具有抑制作用。结论系统全面的阐述肝细胞的生物学特征及在早期毒性评价中的应用,肝细胞作为肝早期毒性筛选模型敏感的评价指标,对于原代培养肝细胞用于药物的早期毒性筛选研究起到了一个示范作用。(本文来源于《中南药学》期刊2014年05期）
孙培龙[6]（2013）在《携带HLA-G慢病毒转染大鼠原代培养肝细胞及对抗大鼠肝移植排斥反应的研究》一文中研究指出目的：人类白细胞抗原G(HLA-G)因为在母体胎儿之间的免疫耐受中发挥了关键性作用而被注意,提示它可能应用于器官移植。HLA-G在体外诱导表达已被证实有诱导免疫耐受的特性,移植术后患者体内HLA-G的表达已被证实与移植术后急性和慢性排斥反应发生率降低有关。我们使用转染携带人HLA-G基因的慢病毒转染大鼠原代培养肝细胞及大鼠移植肝脏,在体外及在体条件下探讨HLA-G的表达是否有直接保护移植肝脏免受排斥反应损伤的效果。方法：1、取260只健康雄性SD大鼠,分叁个阶段进行,先建立大鼠原位肝移植模型的手术训练和探索。手术熟练后,取40只SD大鼠和40只Wistar大鼠,建立SD至Wistar大鼠肝移植急性移植排斥反应模型。2、建立携带HLA-G的慢病毒表达体系。3、进行SD大鼠肝细胞原代培养。4、将携带人HLA-G的慢病毒转染SD大鼠原代培养肝细胞,转染后7天,通过免疫荧光、RT-PCR和Western Blot实验进行检测,分别从病毒转染、mRNA水平和蛋白水平全面评价HLA-G慢病毒转染的效果。5、采用kamada二套管法建立SD和Wistar大鼠的原位肝移植模型45例,随机分为叁组,每组15例。实验组在SD大鼠的供体肝脏取下后,从门静脉输注2ml包含有107TU/ml携带HLA-G基因的慢病毒,将携带人HLA-G的慢病毒转染大鼠供肝,与不加任何处理的对照组和术后规律使用FK506的对照组进行对比,对比术后叁组肝组织中的HLA-G的表达水平、术后第7天、第14天和第56天的AST和BIL值以及病理切片、术后生存天数。探讨携带HLA-G基因的慢病毒转染供肝,是否可对抗大鼠急性肝移植排斥反应。结果：1、经训练,成功建立SD至Wistar大鼠肝移植急性移植排斥反应模型。2、携带人HLA-G的慢病毒可成功转染SD大鼠原代培养肝细胞。3、转染携带有HLA-G'慢病毒的实验组术后7天大鼠的AST和BIL值,与术后使用FK506的对照组差别有显着性(P<0.05),与术后不加处理的对照组差别有极显着性(P<0.01)。转染携带有HLA-G慢病毒的实验组术后12天、56天大鼠的AST和BIL值,与术后使用FK506的对照组差别有显着性(P<0.01)；转染携带有HLA-G的实验组的AST和BIL值,与术后不加处理的对照组差别有极显着性(P<0.01)。对照组中位生存时间12.00天,FK506组中位生存时间70.50天,HLA-G组中位生存时间91.50天,各组之间差别有显着性(P<0.01)。提示这种治疗可延长受体大鼠的存活期。病理切片结果显示,转染携带有HLA-G慢病毒的实验组和术后使用FK506的阳性对照组,术后7天病理切片仅有轻度排斥反应,而术后不加任何处理的阴性对照组则显示为重度排斥反应。术后56天,FK506组病理切片显示存在轻度排斥反应,而HLA-G组无排斥反应。结论：1、转染携带有HLA-G慢病毒作为治疗性的手段用于大鼠肝移植急性排斥反应模型,能有效保护大鼠移植肝的功能和延长存活期。2、体外实验及动物实验均表明,肝细胞对慢病毒介导的基因转移易感,表明慢病毒对肝细胞有很高的转导效率,且转入的外源基因可长期表达。图16幅,表9个,参考文献316篇(本文来源于《中南大学》期刊2013-05-01）
曹丽萍,贾睿,杜金梁,丁炜东,殷国俊[7]（2012）在《甘草提取物对叔丁基氢过氧化物(t-BHP)诱导的建鲤原代培养肝细胞损伤的保护作用（英文）》一文中研究指出以肝(细胞)损伤为主要特征的鱼类肝胆综合症是水产养殖中日趋严重的病害之一,目前还没有有效的防治措施。本研究拟以叔丁基氢过氧化物(t-BHP)构建建鲤(Cyprinus carpio var.jian)原代肝细胞损伤模型,并利用该模型评价甘草(Glycyrrhiza glabra)提取物对t-BHP诱导的鱼类急性肝细胞损伤的保护作用。1mmol/L的t-BHP与原代肝细胞共培养2h能显着提高肝细胞培养上清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)水平,显着降低谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量以及肝细胞增殖活性。在t-BHP诱导肝细胞损伤前(前处理)、损伤后(后处理)、损伤前和损伤后(前后处理)将不同浓度(0.1、0.2和0.4mg/mL)的甘草提取物加入肝细胞培养液中,与肝细胞共培养2h,结果显示,前后处理时,不同浓度(0.1、0.2和0.4mg/mL)的甘草提取物均能显着抑制t-BHP诱导的GOT、GPT、LDH和MDA水平的升高,恢复GSH-Px和SOD水平;前处理时,高浓度(0.4mg/mL)的甘草提取物对抑制GOT、GPT、LDH和MDA水平的升高,恢复GSH-Px水平有显着效果;后处理时,只有高浓度(0.4mg/mL)的甘草提取物能有效提高GSH-Px活性;中浓度和高浓度(0.2和0.4mg/mL)的甘草提取物在前处理、后处理及前后处理时均能显着提高肝细胞的增殖活力。研究的结果表明,中药与损伤剂的给予顺序影响着甘草提取物对肝细胞的保护作用,前后处理时甘草提取物对损伤肝细胞的保护效果明显优于前处理和后处理。研究证实了甘草提取物对t-BHP诱导的鱼类肝细胞损伤具有保护作用,对应用甘草提取物作为鱼类肝胆综合症的防治药物还需要进一步的在体研究。(本文来源于《农业生物技术学报》期刊2012年10期）
孙培龙,叶启发[8]（2012）在《携带人HLA-G慢病毒转染SD大鼠原代培养肝细胞及对抗大鼠急性肝移植排斥反应的实验研究》一文中研究指出【目的】HLA-G在体外诱导表达已被证实有诱导免疫耐受的特性,移植术后患者体内HLA-G的表达已被证实与移植术后急性和慢性排斥反应的发生率降低有关,迄今直接的证实HLA-G术后对于移植物的保护作用仅限于大鼠的皮肤移植。我们使用转染人HLA-G基因的慢病毒体外转染SD大鼠原代培养肝细胞及在体移植肝脏,在体外及在体条件下测试HLA-G的表达是否有直接的保护移植肝脏免受排斥反应损伤的效果。(本文来源于《2012中国器官移植大会论文汇编》期刊2012-10-25）
杨建泉,马宏兵,刘学忠[9]（2012）在《镉对大鼠原代培养肝细胞毒性的研究》一文中研究指出为探讨镉对原代大鼠肝细胞的毒性作用。用二步灌流法获得大鼠肝细胞,肝细胞暴露于浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmoL/L的醋酸镉中12、24 h,应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测醋酸镉对肝细胞存活率的影响及培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性变化。结果表明,肝细胞暴露于浓度为2.5、5.0、10.0、20.0μmoL/L的醋酸镉中,细胞相对存活率显着下降(P<0.01),LDH的释放量增加,且具有剂量效应关系。提示一定浓度的醋酸镉可引起肝细胞的毒性损伤。(本文来源于《现代农业科技》期刊2012年15期）
方心灵,束刚,朱晓彤,王松波,王丽娜[10]（2010）在《α-亚麻酸对仔猪原代培养肝细胞IGF-Ⅰ分泌和IGFs基因表达的影响》一文中研究指出α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)是一种ω-3系列多不饱和脂肪酸,对机体的生长、发育和代谢具有重要的调节作用。为了深入研究ALA调控动物生长的分子机制,本试验选用5日龄的长白仔猪,采用改良的原位两步灌流法分离肝细胞,以1×10~5个/cm~2的密度接种于24和6孔细胞培养板中;待细胞铺满单层后,使用无血清培养基全量换液,分别添加0μM、0.01μM、0.1μM和1μM的ALA处理肝细胞24 h、48 h和72 h,(本文来源于《全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编》期刊2010-07-01）
原代培养肝细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究过量人参皂苷对原代培养小鼠肝细胞的毒性作用。方法给小鼠原代肝细胞培养液中加入人参皂苷(终浓度分别为4000mg/L,200mg/L和10mg/L),设为高、中、低浓度组,台盼蓝拒染法及MTT法测定人参皂香对肝细胞增殖的影响,并测定肝细胞培养液中谷丙转氨酶(GPT)及谷草转氨酶(GOT)的含量。结果与对照组相比,高浓度人参皂苷对原代培养肝细胞增殖有明显的抑制作用:给药后3d、4d、5d、6d和7d,高浓度组活细胞数分别为对照组的85%、81%、71%、64%和59%。人参皂苷给药24h开始,高浓度组培养液上清中GPT含量均显着升高(P<0.05),给药48h、72h和96h时高浓度组细胞培养液GPT含量分别为对照组的2.6倍、8.0倍和12.5倍(P<0.01);随着给药时间延长,GPT含量呈上升趋势。给药72h和96h后高浓度组细胞与空白组相比,外液GOT含量均显着增加(P<0.05)。结论过量人参皂苷能够抑制肝细胞增殖,引起肝细胞损伤,对肝细胞可能存在直接的毒副作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原代培养肝细胞论文参考文献
[1].徐雅玲,梁菁.紫杉醇对肝癌细胞HepG2和大鼠原代培养肝细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究[J].中国药理学通报.2018
[2].刘佳,孔嗣强,张明,陈丹娜,周鹏.过量人参皂苷对小鼠原代培养肝细胞的毒性实验[J].长沙医学院学报.2018
[3].宋凯,骆源,张春晓,王玲,游文煌.皮质醇对斜带石斑鱼原代培养肝细胞糖代谢的影响[J].动物营养学报.2016
[4].陈贵英,郭秋平,温晓雪,黄振平.葛根素对SD大鼠原代培养肝细胞色素P450的影响[C].中华中医药学会中药实验药理分会2014年学术年会论文摘要汇编.2014
[5].郭秋平,杨威,肖百全,覃仁安,金若敏.大鼠原代培养肝细胞作为早期肝毒性筛选模型的研究[J].中南药学.2014
[6].孙培龙.携带HLA-G慢病毒转染大鼠原代培养肝细胞及对抗大鼠肝移植排斥反应的研究[D].中南大学.2013
[7].曹丽萍,贾睿,杜金梁,丁炜东,殷国俊.甘草提取物对叔丁基氢过氧化物(t-BHP)诱导的建鲤原代培养肝细胞损伤的保护作用（英文）[J].农业生物技术学报.2012
[8].孙培龙,叶启发.携带人HLA-G慢病毒转染SD大鼠原代培养肝细胞及对抗大鼠急性肝移植排斥反应的实验研究[C].2012中国器官移植大会论文汇编.2012
[9].杨建泉,马宏兵,刘学忠.镉对大鼠原代培养肝细胞毒性的研究[J].现代农业科技.2012
[10].方心灵,束刚,朱晓彤,王松波,王丽娜.α-亚麻酸对仔猪原代培养肝细胞IGF-Ⅰ分泌和IGFs基因表达的影响[C].全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编.2010